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胶质源性神经营养因子基因修饰骨髓间充质干细胞与缺氧复氧神经细胞的共培养被引量：3: 2011年; 背景:课题组前期研究表明,胶质源性神经营养因子基因修饰的骨髓间充质干细胞能稳定地表达胶质源性神经营养因mRNA,但骨髓间充质干细胞/胶质源性神经营养因子分泌的胶质源性神经营养因子蛋白对缺氧复氧损伤的神经细胞是否积极影响,尚不清楚。目的:观察胶质源性神经营养因子基因修饰的骨髓间充质干细胞对缺氧复氧神经细胞的保护作用。方法:胶质源性神经营养因子基因修饰的骨髓间充质干细胞经诱导后与缺氧复氧神经细胞共培养,采用Hoechst33258细胞免疫荧光染色分别检测神经细胞凋亡及生长相关蛋白43在共培养细胞中的表达。结果与结论:骨髓间充质干细胞/胶质源性神经营养因子组的神经细胞凋亡率显著低于骨髓间充质干细胞组和缺氧组(P0.05),骨髓间充质干细胞/胶质源性神经营养因子组表达生长相关蛋白43的吸光度值明显高于骨髓间充质干细胞组(P0.05)。提示骨髓间充质干细胞/胶质源性神经营养因子通过抑制缺氧复氧神经细胞凋亡和促进共培养细胞生长相关蛋白4表达发挥神经保护作用。; 熊怀林邓莉高小青王特为郭侃杨朝鲜; 关键词：胶质源性神经营养因子骨髓间充质干细胞缺氧复氧神经细胞共培养

新生大鼠海马神经元的改良培养: 2011年; 目的:探讨体外培养高纯度神经元的方法。方法:体外培养新生大鼠海马神经干细胞,再使神经干细胞在无血清N2添加剂培养基条件下向神经元方向分化。结果:从新生大鼠海马组织培养出的神经干细胞,表达巢蛋白,神经干细胞的分化细胞绝大部分表达MAP2,极少数几个细胞表达GFAP。结论:通过本实验方法可获得高纯度的神经元,为后续实验奠定基础。; 高小青杜杰邓莉郭侃杨朝鲜王特为; 关键词：细胞培养神经干细胞神经元

在GDNF基因修饰的骨髓基质细胞与缺氧复氧神经细胞的共培养中神经细胞凋亡的变化被引量：1: 2011年; 目的:探讨胶质源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的骨髓基质细胞(BMSCs)对缺氧复氧神经细胞的保护作用。方法:GDNF基因修饰的BMSCs(BMSCs/GDNF)经诱导后与缺氧复氧神经细胞共培养,采用Hoechst33258检测神经细胞凋亡在共培养细胞中的表达。结果:BMSCs/GDNF组的神经细胞凋亡率显著低于BMSCs组和缺氧组(P<0.05)。结论:BMSCs/GDNF通过抑制缺氧复氧神经细胞凋亡发挥神经保护作用。; 熊怀林杨朝鲜高小青邓莉; 关键词：GDNF BMSCS 缺氧复氧神经细胞共培养

GDNF基因修饰的骨髓基质干细胞移植治疗大鼠脑出血: 2011年; 目的:探讨移植胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的骨髓基质干细胞(BMSCs)是否比单纯BMSCs移植对脑出血有更好的保护作用。方法:采用脑立体定位方法注射肝素和胶原酶制作脑出血模型,第3d分别移植BMSCs、GDNF/BMSCs以及生理盐水,分别在1w和2w处死大鼠,免疫组织化学染色观察脑源性神经营养因子和神经生长因子β在脑出血周边区的表达。结果:各时间点GDNF/BMSCs组的BDNF和NGF-β免疫阳性产物比BMSCs与生理盐水组显著增加。结论:GDNF基因修饰的BMSCs比BMSCs对大鼠脑出血有更好的保护作用。; 邓莉涂江义郭侃高小青杨朝鲜; 关键词：骨髓基质干细胞脑出血神经营养因子

GDNF基因修饰的BMSCs对大鼠缺氧复氧神经细胞凋亡的实验研究被引量：3: 2010年; 目的研究腺病毒介导的外源性胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因在大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）中的表达及其对缺氧复氧神经细胞凋亡的影响。方法将GDNF基因重组腺病毒感染大鼠BMSCs,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）技术检测外源性GDNF基因在BMSCs中的表达水平;将GDNF基因修饰的BMSCs与缺氧复氧神经元共培养,观察神经细胞的凋亡情况。结果 GDNF基因感染组在感染后3~12 d能稳定表达GDNF蛋白,空质粒载体感染组和未感染组基本上无GDNF蛋白的表达;与BMSCs共培养组相比,BMSCs/GDNF分泌的GDNF能显著降低缺氧复氧神经细胞的凋亡率（复氧12 h至5 d,P〈0.05）。结论腺病毒介导的基因感染技术能够有效地将GDNF基因转至BMSCs中,表达和分泌有生物学活性的GDNF蛋白,这为进一步研究GDNF基因修饰的BMSCs应用于中枢神经系统疾病的治疗研究奠定了基础。; 高小青周玲杜杰杨朝鲜; 关键词：胶质细胞源性神经营养因子神经细胞缺氧复氧

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四川省自然科学基金(2006J13-005-1)