国家科技支撑计划(2011BAI13B02-5)
- 作品数：9 被引量：93H指数：6
- 相关作者：文国松杨生超徐绍忠孟衡玲曾淑华更多>>
- 相关机构：云南农业大学红河学院浙江农林大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划云南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 铁皮石斛可溶性糖含量与蔗糖代谢酶活性的相关性研究被引量：5
- 2012年
- 通过对F型及H型铁皮石斛不同时期可溶性糖含量与蔗糖代谢酶活性的测定,并对其相关性进行分析,分析了可溶性糖的合成与蔗糖代谢酶活性间的关系。结果表明,移栽后F型和H型铁皮石斛叶片中蔗糖磷酸合成酶的活性与季节性变化趋势一致,但F型较H型高;蔗糖降解酶与可溶性糖含量及其还原糖间存在相关关系,达到显著水平。对可溶性糖和相关因子进行偏相关分析和通径分析可知,还原糖的直接通径系数最大为1.015,酸性转化酶的直接通径系数为负值(-0.356),与可溶性糖呈负相关关系,4个因子对可溶性糖含量的直接作用大小顺序为还原糖>酸性转化酶>中性转化酶>蔗糖。
- 杨骏孟衡玲杨生超张薇查应洪文国松
- 关键词：铁皮石斛可溶性糖蔗糖代谢酶
- 不同产地铁皮石斛主要化学成分及指纹图谱研究
- 目的比较云南省不同产地铁皮石斛药材质量,为云南省铁皮石斛适宜产地的选择提供依据。方法采用热浸法、紫外分光光度法、HPLC色谱法测定铁皮石斛中醇溶性浸出物、多糖、甘露糖的含量,同时采用HPLC梯度洗脱技术建立指纹图谱系统,...
- 刘文杰孙志蓉杜远张世定郭培俊彭贵湖陈龙
- 关键词：铁皮石斛化学成分指纹图谱聚类分析
- 文献传递
- 药用植物通关藤中总黄酮提取工艺研究被引量：8
- 2013年
- 采用乙醇提取法提取通关藤中的总黄酮,利用正交试验研究提取温度、料液比、提取时间、乙醇体积分数对通关藤中总黄酮提取率的影响。结果表明,影响总黄酮提取率的因素依次为乙醇体积分数>料液比>提取时间>提取温度,最佳工艺为乙醇体积分数70%,料液比1∶20,提取时间3h,提取温度70℃,在最佳提取工艺条件下提取率为40.22mg/g。
- 孟衡玲杨生超苏一兰文国松
- 关键词：通关藤总黄酮
- 铁皮石斛生长进程及多糖积累研究被引量：9
- 2013年
- 对9个不同来源的铁皮石斛种质材料在一个生育期内的主要植物学性状和体内多糖积累情况实施了动态测定,并于采收时统计单位面积产量。结果表明,铁皮石斛营养体生长呈"S"型曲线变化,在当年的2～9月生长速度最快;9个铁皮石斛种质材料的单位面积产量为90.65～407.08 g/m2,其中源于云南省广南县杨柳井乡、麻栗坡县天保镇、麻栗坡县麻栗镇的3个种质材料单位面积产量显著高于其他来源地的种质材料,单位面积产量分别为407.08、389.58、346.05 g/m2。在多糖积累上,9个铁皮石斛种质材料的多糖积累趋势一致,都是在当年12月为多糖积累的高峰期;其中源于福建省武夷山市种质材料的多糖含量最高,为25.23%,而源于云南省广南县杨柳井乡种质材料的多糖含量最低,为20.55%。
- 曾淑华文国松徐绍忠查应红杨生超段承俐
- 关键词：铁皮石斛植物学性状多糖
- 通关藤中总酚酸的提取工艺被引量：1
- 2013年
- 采用正交试验设计法,以绿原酸为对照,分析物液比、提取温度、提取时间、乙醇体积分数4个因子对通关藤(Marsdenia tenacissima)中总酚酸提取率的影响。结果表明,影响提取率的主次因素为乙醇体积分数、提取时间、料液比、提取温度,最佳提取条件为乙醇体积分数70%,提取时间1.0 h,料液比1∶16(m/V,g∶mL),提取温度50℃。
- 孟衡玲杨生超苏一兰文国松
- 关键词：总酚酸
- 两种铁皮石斛总RNA提取方法的比较研究被引量：6
- 2012年
- 铁皮石斛是我国重点保护药材,因其富含多糖及次生代谢物,用普通的方法难以从叶中提取到能满足构建全长cDNA文库等分子生物学实验对高质量RNA需要的总RNA。分别通过对异硫氰酸胍法和CTAB法进行改良。异硫氰酸胍法:往裂解液中加入PVP,通过PVP去除多酚;用56℃热水水浴5min加速组织细胞裂解;抽提时间由原来15 min缩短为5min;根据材料多糖多酚的多寡情况适当增加裂解液。CTAB法:根据材料多糖多酚的多寡情况适当增加CTAB裂解液;用LiCl对RNA进行选择性过夜沉淀;灵活处理,适当增大LiCl浓度。结果表明用改良后的2种方法均可提取到总RNA,经对比发现,改良CTAB法提取效果更好,可重复性强,抽取到的RNA更适合于后续的分子生物学实验。
- 容天聚文国松钱雄查应洪徐绍忠
- 关键词：铁皮石斛多糖总RNA提取异硫氰酸胍法CTAB法
- 铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶基因的克隆与原核表达被引量：13
- 2013年
- 应用同源序列克隆法克隆了铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因cDNA全长,并进行了原核表达分析,为进一步研究该基因的时空表达、功能分析及多糖合成机理提供理论依据。结果表明:(1)铁皮石斛SPS基因cDNA全长3 502bp,编码区3 186bp,GenBank登录号JF423929。该基因编码1 061个氨基酸,与文心兰的SPS基因氨基酸序列的一致性最高为93%,与其他科植物SPS基因的氨基酸序列的一致性均高于60%。(2)原核诱导表达结果显示,SPS基因在大肠杆菌中的重组蛋白分子质量约为118.7kD,其表达与序列分析推测的结论一致。(3)生物信息学分析表明,铁皮石斛SPS基因的二级结构包括了螺旋、β-折叠和无规则卷曲,是非跨膜结构的亲水性不稳定蛋白,有2个功能结构域,分别是蔗糖合成功能域及糖基转移功能域。
- 孟衡玲杨生超查应洪文国松
- 关键词：铁皮石斛蔗糖磷酸合成酶基因克隆原核表达
- 铁皮石斛均一化全长cDNA文库的构建与序列分析被引量：7
- 2013年
- 目的:为了获得药用植物铁皮石斛功能基因的信息和筛选功能基因。方法:以SMART(switching mechanism at5'end of RNA transcript)方式合成全长cDNA,结合DSN(duplex-specific nuclease)均一化技术,构建铁皮石斛茎组织的均一化全长cDNA文库。结果:该文库重组率为93.9%,文库滴度1.3×106cfu.mL-1,插入片段平均大小1.5 kb左右。随机挑取163个阳性克隆进行单侧测序,通过生物信息学分析,获得150个单一序列,其中147个序列与相应的同源蛋白匹配,GO(geneontology)分类表明这些序列参与各种生化途径。8个序列包含了完整编码框,可判断为全长基因。结论:成功构建了铁皮石斛茎组织均一化全长cDNA文库,为满足铁皮石斛代谢途径等功能基因筛选和基因信息研究奠定了基础。
- 蒋敏王江文国松徐绍忠查应洪容天聚钱雄
- 关键词：铁皮石斛CDNA文库
- 铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及表达分析被引量：15
- 2012年
- 目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(pepc)基因,并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析,为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据。方法基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛pepc基因全长。采用荧光定量PCR方法研究pepc基因在2种铁皮石斛中的表达。结果成功克隆了铁皮石斛pepc基因,登录号为JF423930,该基因全长为3 560 bp,其中cds序列为2 895 bp,与兰科植物的同源性为80%左右,与其他科属植物的同源性达到70%以上,编码964个氨基酸。pepc基因在F型铁皮石斛中的表达量为H型的5.55倍。结论成功克隆了铁皮石斛pepc基因,且F型铁皮石斛pepc基因的表达量高于H型。
- 曾淑华文国松徐绍忠查应红杨生超段承俐
- 关键词：铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因克隆同源性分析RT-PCR
- 不同产地铁皮石斛主要化学成分及指纹图谱研究被引量：34
- 2013年
- 目的比较云南省不同产地铁皮石斛药材质量,为云南省铁皮石斛适宜产地的选择提供依据。方法采用热浸法、紫外分光光度法、高效液相色谱法(HPLC)测定铁皮石斛中醇溶性浸出物、多糖、甘露糖的含量,同时采用HPLC梯度洗脱技术建立指纹图谱系统,并进行聚类分析。结果云南省不同产地铁皮石斛药材在主要化学成分含量上有一定差异。其中勐海铁皮石斛的醇溶性浸出物和多糖含量最高,分别为13.65%和35.87%;德宏铁皮石斛的甘露糖含量最高,为24.96%,勐海居第2,为24.01%;而红河铁皮石斛的有效成分含量最低。不同产地铁皮石斛药材的HPLC指纹图谱相似度较好,在0.883～0.987之间,其中勐海与对照图谱间的相似度最低,为0.883,其余5个产地均在0.950以上。对6个产地铁皮石斛HPLC指纹图谱的共有峰总面积进行聚类分析发现,6个产地可分为两大类,勐海与文山为一类,思茅、德宏、红河和玉溪为一类。结论云南省内不同产地的铁皮石斛内在质量存在一定差异,其中勐海铁皮石斛的质量最优。
- 刘文杰孙志蓉杜远张世定郭培俊彭贵湖陈龙
- 关键词：铁皮石斛化学成分指纹图谱聚类分析
