国家自然科学基金(30370314)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：杨安钢王成济孟艳玲张莉赵晶更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 针对HBVx基因的siRNA重组腺病毒的制备及其对HBVx基因表达的抑制作用被引量：1
- 2007年
- 目的:构建针对乙型肝炎病毒x基因(HBx基因)的小干扰RNA(siRNA)重组腺病毒表达载体,并在能表达HBx基因的人肝癌细胞株HepG2中观察其对HBx基因表达的抑制作用.方法:重组腺病毒穿梭载体pShuttle-HBx与骨架载体在大肠杆菌BJ5183中同源重组得到重组腺病毒载体,后者转染HEK293细胞,包装并扩增出病毒颗粒.用获得的病毒感染能表达HBx基因人肝癌细胞株HepG2,收集细胞总RNA和总蛋白,采用RT-PCR和Western Blot方法检测细胞中HBx基因表达的变化.结果:经限制性内切酶酶切鉴定,证实针对HBx基因的siRNA重组腺病毒载体构建成功.RT-PCR和Western Blot方法证实,在HepG2细胞中,HBx基因在mRNA和蛋白水平均有降低.结论:腺病毒介导的针对HBx基因的siRNA在体外能够高效、特异地抑制HBx基因的表达.
- 秦炜炜刘家云张瑞王涛王凯孟艳玲杨安钢
- 关键词：RNA干扰腺病毒
- 重组抗HER2 ScFv／tBid基因的表达对SGC7901胃癌细胞的促凋亡作用
- 2006年
- 目的:构建重组抗HER2 ScFv／tBid载体并观察其对胃癌SGC7901细胞的促凋亡作用。方法:将重组抗HER2 ScFv／tBid基因克隆入真核表达载体pCMV中,转染SGC7901细胞,用RT- PCR方法检测目的基因在mRNA水平的表达,间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,通过细胞计数检测转染目的基因后对细胞生长的影响,通过检测细胞周期来观察其促凋亡作用。结果:转染SGC7901细胞后,检测出目的蛋白的表达。细胞计数发现细胞的增殖被明显抑制。细胞周期分析有明显的凋亡峰出现,说明重组抗HER2 ScFv／tBid表达后有促凋亡作用。结论:重组抗HER2 ScFv／tBid基因可以在转染的SGC7901细胞中表达,并且可抑制转染细胞的生长,诱导细胞发生凋亡。
- 王芳王立锋裘秀春许彦鸣鲍炜孟艳玲王成济范清宇杨安钢
- 转运结构域的研究进展被引量：2
- 2004年
- 利用非病毒载体转运目的基因时 ,具有转运结构域的蛋白质或多肽片段可以有效地促进外源效应分子进入细胞浆 ,发挥其效应。这些转运结构域广泛的存在于毒素蛋白、病毒蛋白、转录因子、同源结构域及合成肽当中。
- 张莉赵晶杨安钢王成济
- 关键词：转运
