国家自然科学基金(81372466)
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 相关作者：赵青王江林谭茵李丹肖顺华更多>>
- 相关机构：广州医科大学江苏建康职业学院中国科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市教育科学规划课题广东省高等教育教学改革项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 天然反义转录本Tetraspanin31调控CDK4的分子机制
- 2019年
- 目的:探讨天然反义转录本Tetraspanin31调控CDK4的分子机制。方法:针对TSPAN31设计合成靶向干扰的siRNA,转染肝癌细胞,qRT-PCR和免疫印迹检测肝癌细胞实验组与对照组细胞CDK4的转录和翻译水平,免疫印迹检测细胞周期蛋白Cyclin D1、转录因子E2F1蛋白表达水平;在HEK293T细胞、Hela细胞中转染过表达TSPAN31全长、编码区及3’末端非翻译区质粒,qRT-PCR及免疫印迹检测CDK4基因转录和翻译水平。结果:与对照组相比,肝癌细胞siRNA干扰后TSPAN31蛋白相对表达量显著降低,CDK4相对表达量显著升高,Cyclin D1、E2F1蛋白相对表达量升高(均P<0.05)。与对照组相比,HEK293T细胞、Hela细胞转染过表达TSPAN313’末端非翻译区质粒组及过表达TSPAN31全长质粒组CDK4转录及翻译的相对表达水平显著降低(均P<0.05),而转染过表达TSPAN31编码区质粒组没有显著差异(均P>0.05)。结论:TSPAN31可在肝癌细胞中调控信号通路蛋白Cyclin D1、CDK4及E2F1蛋白表达,TSPAN31对CDK4的调控作用可能主要是通过转录产物的3’末端非翻译区进行的。
- 吕敏佳古蕾陈子鹏王江林孙雪萌赵青
- 关键词：CDK4肝癌细胞宫颈癌细胞
- 大麻素WIN55,212-2对裸小鼠肝癌移植瘤及PPARγ表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨大麻素WIN55,212-2(WIN)对裸小鼠肝癌移植瘤及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、c-myc表达的影响。方法:采用5 mg/kg的WIN对荷瘤裸小鼠进行瘤周皮下注射干预15 d,每3天测量1次瘤体体重和体积,计算肿瘤体积和抑瘤率。荧光定量PCR和Western blotting测定Hep G2移植瘤中PPARγ和c-myc的表达情况。结果:WIN对Hep G2细胞移植瘤具有抑制作用,抑瘤率为66.00%,荧光定量PCR结果显示WIN抑制Hep G2细胞移植瘤c-myc在mRNA水平的表达,促进Hep G2细胞移植瘤PPARγ在mRNA水平表达。Western blotting结果显示WIN抑制Hep G2细胞移植瘤c-myc在蛋白水平的表达,促进Hep G2细胞移植瘤PPARγ在蛋白水平表达。结论:WIN能够抑制Hep G2细胞移植瘤的生长和c-myc的表达,并上调PPARγ的表达。
- 邓远斐许达才肖顺华赵青
- 关键词：大麻素移植瘤PPARΓ
- 大麻素WIN55,212-2抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖和侵袭迁移被引量：3
- 2016年
- 目的研究大麻素WIN55,212-2(WIN)对SMMC-7721肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法应用CCK-8法分析(0、1、5、10、20)μmol/L WIN对SMMC-7721细胞活力的影响;Hoechst33258染色荧光显微镜下观察各组细胞形态改变;异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白P53、P21、Bcl-2、Bax和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的表达;采用TranswellTM侵袭实验及划痕实验检测细胞侵袭、迁移的能力,Western blot法检测基质金属蛋白酶14(MMP-14)蛋白水平。结果 WIN抑制SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡,两者都具有剂量依赖性;WIN处理后的细胞,经Hoechst33258染色,可发现细胞核浓缩、破碎,引起明显细胞凋亡;凋亡相关蛋白P53、P21、Bax激活,抗凋亡蛋白Bcl-2水平下降;AKT、p-AKT、p-ERK水平下降,而ERK总蛋白无明显变化;与对照组比较,WIN处理后的SMMC-7721细胞侵袭和迁移的能力均显著降低,MMP-14蛋白水平也下降。结论 WIN能抑制SMMC-7721细胞增殖和诱导其凋亡,与WIN激活P53,抑制AKT、p-AKT、p-ERK表达有关。WIN通过下调MMP-14蛋白水平,抑制SMMC-7721细胞侵袭和迁移。
- 王江林邓远斐谭茵李恪发温博冠赵青
- 关键词：SMMC-7721细胞细胞增殖迁移
- 中国南海底泥抗生素资源的初步研究
- 2015年
- Angucycline类抗生素是一类具有多种活性的化合物。现有研究表明angucycline合成过程的环化酶可以作为分子标签探测微生物产angucycline的潜力,指导新angucycline抗生素的开发。基于对环化酶的特异扩增和分析,本研究对来自中国南海17个底泥样品的angucycline基因资源进行了初步调查,结果显示10个底泥中存在新的angucycline抗生素资源,其中一种新的angucycline抗生素资源还同时存在于花坛土壤样品和放线菌Streptomyces sp.中。这表明中国南海底泥普遍存在着新的angucycline抗生素资源,部分angucycline抗生素资源可以通过普通的土壤样品和放线菌进行挖掘,从而避免复杂的取样过程。本研究为利用培养方法和不依赖于培养的宏基因组方法开发angucycline抗生素奠定了基础。
- 欧阳永长邓远斐戴世鲲李翔赵青
- 关键词：底泥
- TSPAN31调节靶基因CDK4对宫颈癌细胞增殖的影响被引量：2
- 2018年
- 目的探讨TSPAN31通过下调其互补反义基因CDK4对宫颈癌细胞增殖的影响。方法体外培养宫颈癌HeLa、Siha细胞,分为Scramble组、sh-TSPAN31-1组、sh-TSPAN31-2组,分别转染Scramble、sh-TSPAN31-1、sh-TSPAN31-2质粒。用qRT-PCR检测TSPAN31 shRNA对HeLa、Siha细胞中CDK4mRNA表达的影响;Western blot法检测沉默TSPAN31后细胞CDK4及相关蛋白的表达;用MTS法检测细胞增殖活性;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。结果与Scramble组比较,转染TSPAN31 siRNa组CDK4表达水平上调(P<0.05),细胞CDK4蛋白表达量增加(P<0.5)。MTS法和平板克隆形成实验结果显示,与Scramble组相比,沉默TSPAN31表达后细胞增殖活性和克隆形成能力增强,而过表达TSPAN31则能明显抑制克隆形成(P<0.05)。结论 TSPAN31能够反向调节其靶基因CDK4的表达,进而抑制宫颈癌细胞的增殖。
- 李丹孙雪萌邓远斐赵青
- 关键词：宫颈癌CDK4增殖
- 大麻受体激动剂WIN对白血病K562细胞增殖和诱导凋亡作用的研究
- 2014年
- 目的探讨大麻受体激动剂WIN-55,212-2(WIN)对白血病K562细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法将细胞分成对照组和不同剂量大麻受体激动剂WIN用药组。CCK-8测定WIN对K562细胞增殖的影响;DAPI染色观察细胞核形态变化;JC-1分析线粒体膜电位变化;分光光度法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性;流式细胞仪分析细胞凋亡率变化;Western印迹法分析Bax、Bcl-2及C-myc蛋白的表达。结果与对照组相比较,5、10、20μmol/L的WIN处理K562细胞24、48 h后,增殖抑制作用明显且具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。DAPI染色和线粒体膜电位检测结果显示,K562细胞发生凋亡。流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率升高。WIN处理24 h后,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活性均增加(P<0.05)。Western印迹法显示,Bax蛋白表达增加,C-myc、Bcl-2蛋白表达下降。结论大麻受体激动剂WIN能抑制白血病K562细胞增殖,并诱导凋亡,其机制可能通过上调Bax蛋白表达,下调C-myc、Bcl-2蛋白表达,以及促使线粒体跨膜电位下降,激活Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白而实现。
- 徐建永许达才洪跃辉陈新美赵青
- 关键词：K562细胞凋亡增殖
