国家自然科学基金(30370343)
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
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- 相关机构：复旦大学上海医学院复旦大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 1-脱氧甘露糖野尻霉素诱导人肝癌SMMC7721细胞发生内质网应激被引量：2
- 2006年
- 目的探讨人肝癌SMMC7721细胞中1-脱氧甘露糖野尻霉素(1-deoxymannojirimycin,DMJ)对高尔基体中α-甘露糖苷酶Ⅰ活性的抑制作用与内质网应激的关系。方法人肝癌SMMC7721细胞经DMJ诱导后,用RT-PCR和Western blot检测内质网应激中的重要分子葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)、X盒结合蛋白1(X box binding protein1,XBP1)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologus protein,CHOP)及caspase-12的表达变化。结果GRP78的mRNA和蛋白质表达量升高;XBP1的mRNA发生剪接,蛋白相对分子质量从33 000变为54 000;CHOP蛋白表达量上调;caspase-12剪切激活。结论DMJ可诱导SMMC7721细胞发生内质网应激。
- 徐莺莺陆祎申宗侯
- 关键词：内质网应激
- Sulindac通过抑制Wnt通路诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡被引量：3
- 2007年
- 目的初步研究Wnt通路及蛋白激酶B(PKB)在非甾体类抗炎药sulindac诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡过程的作用。方法利用流式细胞仪检测肝癌细胞7721的凋亡,利用Western blot检测caspase-9、PARP(poly ADP-ribose polymerase)等凋亡相关分子的剪切,β连环蛋白(β-catenin)及糖原合酶激酶3β(GSK3β)与蛋白激酶B(PKB)磷酸化水平的变化,利用RT-PCR检测β-catenin及c-myc的mRNA水平。结果sulindac能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,显著降低β-catenin的蛋白水平,抑制GSK3β9位丝氨酸的磷酸化,同时促使caspase-9、PARP等凋亡相关分子发生剪切;β-catenin的mRNA水平未见变化;PKB的磷酸化水平未见降低,反而略有增高。结论sulindac能够通过抑制Wnt通路,促进β-catenin的蛋白降解,降低其蛋白水平,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且该作用不依赖PKB活性的抑制。
- 冯晓铖王晓明张毅李姣申宗侯
- 关键词：凋亡WNT通路Β-连环蛋白人肝癌细胞
- N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V表达下调可通过GLUT1的糖基化改变和活性下降引起人肝癌SMMC-7721细胞内质网应激
- 2007年
- 目的初步探讨N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V(GnT-V)表达下调的人肝癌细胞SMMC-7721中引起内质网应激的机制。方法利用RT-PCR检测SMMC-7721(以下简称7721)细胞中葡萄糖转运蛋白(GLUT)的表达情况,利用Western blot、免疫沉淀及凝集素印迹分析检测转染了反义GnT-V的SMMC-7721细胞(以下简称As/7721)以及转染空质粒pcDNA3的SMMC-7721细胞(以下简称Mock/7721)中GLUT1的N-糖链变化,利用葡萄糖摄取率分析来检测以上3种细胞中GLUT1葡萄糖转运活性的变化。结果在As/7721细胞中GLUT1的N-糖链糖基化水平较Mock/7721明显下降,而且其GLUT1的葡萄糖转运活性也较Mock/7721细胞明显下降。结论葡萄糖转运蛋白GLUT1N-糖基化的改变和转运活性的下降可能是GnT-V表达下调的SMMC-7721细胞中引起内质网应激的机制之一。
- 方芳张力王琼李姣申宗侯
- 关键词：葡萄糖转运蛋白内质网应激
- 内质网驻留的分子伴侣与内质网应激的细胞内信号传导途径被引量：7
- 2005年
- 李姣申宗侯
- 关键词：信号传导途径细胞内内质网应激分子伴侣高尔基体GOLGI
- Blocking of N-acetylglucosaminyltransferase V induces cellular endoplasmic reticulum stress in human hepatocarcinoma 7721 cells被引量：7
- 2006年
- N-acetylglucosaminyltransferase V (GnT-V ) 是重要 tumorigenesis 和联系转移的酶。为了学习它的简历，工作， GnT-V 稳定地压制了房间线(GnT-V-AS/7,721 ) 在以前的学习从 7,721 个 hepatocarcinoma 房间被构造。在这研究， cDNA 数组基因表示侧面在 GnT-V-AS/7,721 之间被比较并且父母 7,721 个房间。数据显示 GnT-V-AS/7,721 显示出与 ER 压力一致的一个典型表达式模式。ER 压力的分子的机制被分析在二展开的蛋白质回答(UPR ) 在关键分子上在 GnT-V-AS/7,721 探索小径。为 ATF6 和 Ire1/XBP-1 小径，它被 BIP 的起来规定在 mRNA 和蛋白质证实 XBP-1 的拼接的形式的水平，和外观。至于 PERK/eIF2alpha 小径，激活嗯 eIF2alpha kinase 津贴被观察。从 GnT-V-AS/7,721 房间证实结果，在 UPR 的关键分子在 7,721 个房间再被检验由特定的 RNAi 处理防碍 GnT-V。结果与从 GnT-V-AS/7721 的那些是类似的，显示那块 GnT-V 能明确地激活嗯在 7,721 个房间的应力。率(3 )H 人加入与率改正了(3 ) 在 GnT-V-AS/7,721 的 H 列伊加入与控制相比极大地是下面调整的，它表明了综合的酶的缺乏的功能在堵住的 GnT-V 以后的 N-glycans。而且，与 underglycosylation 联系的女伴 GRP94 的更快的移居形式，和细胞内部的 glycoproteins 的广泛地改变的 N-glycans 结构是也在 GnT-V-AS/7,721 检测了。这些结果支持了机制损害的那块 GnT-V 表达式女伴和 N-glycan-synthesizing 酶工作，它在 vivo 引起了 UPR。
- Huan FangWei HuangYing Ying XuZong Hou ShenChao Qun WuShou Yi QiaoYan XuLong YuHui Li Chen
- 关键词：乙酰转移酶
- 肝癌细胞N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V表达受阻与内质网应激之间的关系被引量：4
- 2005年
- 目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V(GnTV)表达受阻与内质网应激之间的关系。方法:应用RNAi技术,构建GnTVsiRNA表达质粒,抑制GnTV的表达,用RTPCR和Westernblot检测内质网应激中的重要分子GRP78(glucoseregulatedprotein,葡萄糖调节蛋白)、XBP1(Xboxbindingprotein1,X盒结合蛋白1)和PERK[RNAdependentproteinserine/threoninekinase(PKR)likekinase,RNA依赖蛋白丝/苏氨酸激酶的类似激酶]的表达变化。结果:GRP78的mRNA和蛋白质表达量升高;XBP1的mRNA发生剪接,蛋白分子量从33×103(33kD)变为54×103;PERK蛋白发生磷酸化。结论:GnTV受阻可导致内质网应激。
- 徐莺莺陆祎张毅申宗侯
- 关键词：内质网应激RNAI
- 抑制肝癌细胞N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ表达导致细胞未折叠蛋白质反应被引量：1
- 2005年
- 目的探讨N乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnTⅤ)对细胞基因表达和功能的影响。方法用WesternBlot验证GnTⅤ的反义cDNA稳转的细胞株AsGnTⅤ7721(AsGnTⅤSMMC7721)中GnTⅤ表达,用基因芯片技术比较AsGnTⅤ7721与7721(SMMC7721)细胞的基因表达差异,同时用RTPCR和WesternBlot检测AsGnTⅤ7721细胞中未折叠蛋白质反应信号通路关键分子Bip和XBP1的表达变化。结果基因芯片检测到的AsGnTⅤ7721细胞中的基因表达变化表明,细胞中产生未折叠蛋白质反应。同时AsGnTⅤ7721细胞中未折叠蛋白质反应信号途径中的关键分子Bip的mRNA和蛋白表达升高,XBP1mRNA被剪接。结论GnTⅤ表达受阻能导致细胞产生未折叠蛋白质反应。
- 张毅张力方欢申宗侯
- 关键词：肝癌细胞
- 全反式维甲酸通过内质网应激诱导N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V受阻的人肝癌SMMC-7721细胞凋亡被引量：2
- 2006年
- 目的初步探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)诱导N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V(N-acetylglucosaminyltransferase V,GnT-V)表达受阻的人肝癌SMMC-7721细胞(AsGnT-V/SMMC-7721)发生凋亡与细胞中内质网应激的关系。方法利用RT-PCR检测ATRA处理前后AsGnT-V/SMMC-7721细胞中内质网应激关键分子GRP78(glucose regulated protein78)、XBP1(X box binding protein1)等的变化,并用West-ern blot检测ATRA处理前后AsGnT-V/SMMC-7721细胞中内质网应激相关凋亡途径中的重要分子CHOP(C/EBP homologus protein)、caspase-9、caspase-12以及caspase-3的变化。结果GRP78和XBP1的变化表明经ATRA处理后AsGnT-V/SMMC-7721细胞的内质网应激加剧了,而与内质网应激相关的凋亡分子CHOP、caspase-9、caspase-12以及caspase-3都发生了激活。结论ATRA诱导AsGnT-V/SMMC-7721细胞发生的凋亡与内质网应激有关。
- 陆祎徐莺莺范恺谊申宗侯
- 关键词：内质网应激凋亡
