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盐地碱蓬过氧化氢酶基因的克隆及盐胁迫下的表达分析(英文)被引量：9: 2003年; 过氧化氧酶是清除H2O2的重要酶类。从400 mmol/L NaCl处理的盐地碱蓬(Suaeda salsa(L.)Pall)地上部分的cDNA文库中克隆了两个编码过氧化氢酶的cDNA(Sscat1和Sscat2),其中Sscat1(1.7 kb)是一个全长cDNA克隆,编码一个492个氨基酸的开放阅读框架,而Sscat2(1.1 kb)是一个cDNA片段。据编码Sscatl 3’端的287个氨基酸的cDNA序列与Sscat2的cDNA序列进行的BLAST同源性分析表明,Sscat1和Sscat2在核苷酸水平的一致性为71.9％,在氨基酸水平上的一致性为75％。Southern杂交表明,Sscat1在盐地碱蓬基因组中为多拷贝基因,Sscat2则为一个单拷贝基因。Northem杂交结果表明在盐胁迫条件下Sscat1和Sscat2的表达存在差异:400 mmol/L NaCI处理48 h的盐地碱蓬根中的Sscat1和Sscat2 mRNA水平比对照显著提高,但是在叶中仅Sscat1受盐诱导表达。不同盐处理时间下的表达分析也证实,在盐地碱蓬叶中仅Sseat1受盐诱导表达。这说明Sscat1和Sscat2在盐地碱蓬中是差异调控的。生理分析表明过氧化氢酶的活性在盐胁迫条件下显著提高。; 马长乐王萍萍曹子谊赵彦修张慧; 关键词：盐地碱蓬过氧化氢酶盐胁迫活性氧基因克隆

过量表达GST基因对盐胁迫下转基因拟南芥氧化损伤的影响被引量：9: 2006年; 利用模式生物拟南芥作为实验材料,通过测定谷胱甘肽-抗坏血酸代谢相关酶(GST、GPX、APX、GR、DHAR、MDHAR)的活性和GSH、ASA、MDA含量以及生物量等来研究过量表达具有过氧化物酶活性的盐地碱蓬谷胱甘肽转移酶基因(GST基因)对盐胁迫下转基因拟南芥氧化损伤的影响.结果显示,转基因拟南芥比野生型具有较高的GST、GPX以及MDHAR酶活性;前者还具有较多的还原型谷胱甘肽和抗坏血酸,并且谷胱甘肽库氧化水平较野生型高.盐胁迫不但部分抑制了野生型拟南芥的生长,同时也导致了大量脂质过氧化物的积累;而盐胁迫对转基因拟南芥的生长抑制不明显,也没有较多的脂质过氧化物的积累.结果表明,过量表达盐地碱蓬谷胱甘肽转移酶基因提高了转基因拟南芥依赖于还原型谷胱甘肽的过氧化物清除途径,同时有可能改变了GSH和ASA的代谢途径,这两方面的作用导致了转基因拟南芥氧化损伤的降低,使转基因拟南芥在盐胁迫下保持较好的生长态势.; 戚元成高玉千张世敏张慧邱立友; 关键词：盐胁迫谷胱甘肽转移酶拟南芥

盐地碱蓬(Suaedasalsa)APX基因的克隆及盐胁迫下的表达被引量：44: 2002年; 从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠菜(Spinaciaoleracea)细胞质抗坏血酸过氧化物酶基因同源性最高 ,在核苷酸水平上一致性为 87% ,在氨基酸水平上一致性为 89%。Southern杂交表明APX基因在盐地碱蓬基因组中只有 1个拷贝。盐 (NaCl 40 0mmol/L)处理不同时间后的Northern杂交分析表明盐地碱蓬中SsAPX基因在盐胁迫下表达量增加 ,而且在盐胁迫下抗坏血酸过氧化物酶的活性也显著地增加 ,说明该基因受盐诱导。; 马长乐王萍萍曹子谊赵彦修张慧; 关键词：盐地碱蓬 CDNA APX 活性氧盐胁迫

硫腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及其在盐胁迫条件下的不同表达(英文)被引量：13: 2003年; 硫腺苷甲硫氨酸作为甲基供体在转甲基反应中起到重要作用。为了解硫腺苷甲硫氨酸在盐地碱蓬(Suacdasalsa(L.)Pall)耐盐中的作用,我们对可能编码硫腺苷甲硫氨酸合成酶的基因(SsSAMS2)进行了分析。该基因在经400 mmol/L NaCl处理的盐地碱篷地上部分的λ-Zap cDNA文库中克隆到,其插入片段伞长1 531 bp,包含一个395个氨基酸的开放阅读框架,该基因推断的分子量约为43 kD。SsSAMS2与长春花(Catharanthus roscus)的SAMS2在氨基酸水平上的一致性为93％。Southern杂交显示,SsSAMS2在盐地碱蓬基因组中可能是两个拷贝。Northern分析显示硫腺苷甲硫氨酸合成酶基因受NaCl等胁迫的正调控。酶活性检测表明,NaCl胁迫条下该酶活性增强。; 马秀灵王增兰戚元成赵彦修张慧; 关键词：盐胁迫盐地碱蓬

盐地碱蓬延伸因子 (Ss EF-1α)的克隆与表达分析(英文)被引量：11: 2004年; 从盐胁迫下的盐地碱蓬(Suaedasalsa)的cDNA文库中获得了一个延伸因子(SsEF-1α)的cDNA片段。以此片段为探针,对其在不同胁迫处理下的盐地碱蓬中表达利用Northern杂交进行分析,结果表明,不同盐浓度处理、同一盐浓度不同时间处理下及双氧水刺激条件下延伸因子在碱蓬叶中的表达量先呈现减少然后增加的趋势;聚乙二醇(PEG)及低温诱导下均呈现上升趋势。由此可见该基因在盐、氧化、高渗和低温胁迫条件下产生一定的反应。; 孙伟李燕赵彦修张慧; 关键词：盐地碱蓬杂交胁迫

过量表达谷胱甘肽转移酶基因对转基因拟南芥抗旱能力的影响被引量：14: 2008年; 盐地碱蓬谷胱甘肽转移酶基因(GST)在拟南芥中过量表达后,在干旱胁迫下,转基因拟南芥植株的干重比野生型植株高,其总谷胱甘肽含量和谷胱甘肽库的氧化水平都比野生型植株的高,而丙二醛含量则比野生型的低。这些显示转基因拟南芥的抗干旱胁迫能力有所增强。; 戚元成张小强刘卫群邱立友; 关键词：抗旱性拟南芥

盐地碱蓬甲硫氨酸合成酶基因(Ss MS)的克隆与表达分析被引量：7: 2003年; 从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了甲硫氨酸合成酶基因的cDNA片段 .通过Southern杂交和Northern杂交对其表达特性进行分析 ,结果表明 ,同一盐浓度不同时间处理下、双氧水及冷害刺激条件下甲硫氨酸合成酶在碱蓬叶中的表达量先呈现减少然后增加的趋势 ;聚乙二醇 (PEG)透导下呈现下降趋势 .由此可见该酶在盐、氧化和低温胁迫条件下产生一定的反应 .; 李燕孙伟赵彦修张慧; 关键词：盐地碱蓬甲硫氨酸合成酶萌发

盐地碱蓬Δ~1-二氢吡咯-5-羧酸合成酶基因(SsP5CS)的克隆及表达特性被引量：12: 2002年; 从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了Δ1 -二氢吡咯 -5 -羧酸合成酶基因的cDNA片段 (S .salsaΔ1 -pyrroline -5 -carboxylatesynthasegene,Ssp5CS) .Southern杂交表明SsP5CS基因在盐地碱蓬基因组中只有一个拷贝 ;Northern杂交结果表明 ,不同盐处理 (4 0 0mmol/LNaCl)时间下SsP5CS在盐地碱蓬叶中的表达量明显增加 ;同时盐胁迫条件下盐地碱蓬叶中的脯氨酸含量与对照相比显著的增加 ,并且其渗透调节能力也逐渐增强 .; 王萍萍马长乐赵可夫赵彦修张慧; 关键词：合成酶基因盐地碱蓬脯氨酸盐胁迫

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国家重点基础研究发展计划(G1995011700)