上海市教育委员会创新基金(09YZ76)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 相关作者：王忠卢慕峻张明李伟吴稼晟更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院上海交通大学上海市组织工程研究重点实验室更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会创新基金国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人脂肪来源干细胞与聚己内酯/壳聚糖支架的生物相容性研究被引量：4
- 2013年
- 目的观察人脂肪来源干细胞(Human adipose derived stem cells,hADSCs)在聚己内酯/壳聚糖[Poly(ε-capro-lactone)/chitosan,PCL/CS]支架中的生长情况。方法取PCL/CS浸提液培养hADSCs,CCK-8法检测细胞活力,评价支架细胞毒性。hADSCs传代扩增后,接种到PCL/CS支架上,体外培养1周、2周,裸鼠体内培养2周,HE染色观察细胞在支架上的生长情况,免疫组化HLA-Ⅰ监测经裸鼠体内培养后复合支架上细胞的种属来源。结果 hADSCs在PCL/CS浸提液中可保持较高的增殖率,PCL/CS浸提液无细胞毒性。hADSCs终止于PCL/CS支架后,经过体外、内培养,hADSCs均能长入支架的空隙内,且体内培养比体外培养有更多的细胞长入支架。体外培养1周,已有细胞黏附生长在PCL/CS支架的边缘,体外培养2周后,部分细胞渗透到材料内部。体内培养2周后,大量细胞能渗透到材料内部,同时HLA-Ⅰ抗体检测发现,支架材料内部分细胞HLA-Ⅰ阳性表达,说明PCL/CS支架内该部分的细胞来源于hADSCs。结论 PCL/CS支架安全无毒,hADSCs能在PCL/CS支架上较好生长,该支架可用于组织工程膀胱的研究。
- 周哲吴稼晟张明赵阳周娟李伟王忠孙康卢慕峻
- 关键词：聚己内酯壳聚糖
- 聚羟基乙酸作为支架材料体外构建复层膀胱壁结构的探讨被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨聚羟基乙酸(polyglycolic acid,PGA)作为支架材料并复合成年猪膀胱平滑肌细胞和尿路上皮细胞,体外构建复层膀胱壁结构的可行性。方法:采用PGA作为支架材料,并以聚乳酸(polylact acid,PLA)塑形。以酶消化法分别获得猪膀胱尿路上皮细胞和平滑肌细胞,并体外扩增。以MTT法分别检测P3代膀胱平滑肌细胞(SMC)和尿路上皮细胞(UC)的体外增殖能力。将P3代膀胱平滑肌细胞先接种在支架上,再接种尿路上皮细胞。将细胞-材料复合物体外培养1～2周并行组织学鉴定。结果:酶消化法获得的膀胱平滑肌细胞和尿路上皮细胞经过体外培养仍具有较强的体外增殖能力。细胞材料复合物体外培养1周后形成分层排列结构,包括黏膜上皮层和膀胱平滑肌层。免疫组织化学显示平滑肌层α-Smooth MuscleActin表达阳性,黏膜上皮层广谱角蛋白表达阳性。而细胞材料复合物继续体外培养至2周,细胞从支架上大量脱落。结论:PGA适合作为复层膀胱壁结构体外构建的支架材料。采用PGA作为支架材料并复合膀胱平滑肌细胞和尿路上皮细胞,可以体外构建出类似复层膀胱壁结构。细胞材料复合物体外培养1周左右较适合进行体内回植修复。
- 卢慕峻王忠董国勤姜华周广东刘伟曹谊林
- 关键词：膀胱聚羟基乙酸
- 干细胞在组织工程膀胱修复中的应用被引量：3
- 2011年
- 利用干细胞进行膀胱缺损修复是近年来组织工程膀胱研究的一项热点。干细胞具有自我更新和多向分化的潜能，是组织工程膀胱修复的理想种子细胞。本文分别就利用胚胎干细胞和成体干细胞作为种子细胞，进行膀胱缺损组织工程修复进行综述。
- 张明卢慕峻王忠
- 关键词：干细胞膀胱
- 胶原海绵支架体外构建组织工程膀胱黏膜被引量：3
- 2012年
- 背景:组织工程膀胱黏膜层的构建在组织工程膀胱修复中占有重要的地位,但目前并没有最合理的构建方法。目的:探讨胶原海绵支架复合猪膀胱尿路上皮细胞体外构建膀胱黏膜结构的可行性。方法:刮取猪膀胱黏膜层后用酶消化方式进行猪膀胱尿路上皮细胞原代培养,并进行尿路上皮细胞标志物免疫荧光和RT-PCR鉴定。制备疏松多孔的胶原海绵支架材料,将第3代尿路上皮细胞接种在胶原海绵支架上,体外培养4～8d后观察尿路上皮细胞和胶原海绵材料的复合情况。结果与结论:原代培养的猪膀胱尿路上皮细胞呈"多角形"、"铺路石"样,以克隆团形式生长。免疫荧光鉴定AE1/AE3阳性,RT-RCR检测uroplakin-ⅠA、uroplakin-Ⅱ阳性。胶原海绵复合尿路上皮细胞体外培养4～8d后,细胞在胶原海绵支架上生长良好,覆盖胶原材料的表面并长入材料内部,保持了尿路上皮细胞的特性。体外培养6d时,尿路上皮细胞与胶原支架复合效果最好,同时细胞数量也最多。结果初步表明了胶原海绵复合膀胱尿路上皮细胞可以构建组织工程膀胱黏膜,且体外培养6d为最佳时间点。
- 张明徐明曦吴稼晟李伟孙康王忠周哲卢慕峻
- 关键词：膀胱黏膜胶原尿路上皮细胞
- 人包皮脱细胞基质组织工程化尿道的可行性研究被引量：4
- 2009年
- 目的:为人包皮脱细胞基质作为尿道组织工程修复材料提供依据。方法:制备人包皮脱细胞基质,对其进行组织学观察、细胞毒性以及体内实验,检验其作为尿道材料的安全性和组织相容性。结果:制备的人包皮脱细胞基质,细胞去除完全,用原代包皮上皮细胞测定其细胞毒性,结果显示细胞相对增值率在75%～99%之间,细胞毒性为1级,符合国家标准,回植体内后,随着时间的延长,人包皮脱细胞基质与尿路上皮细胞结合完好,正常尿道复层结构层次逐步恢复。结论:人包皮脱细胞基质抗原性低,相容性好,可以作为组织工程尿道的支架材料。
- 姜华马利民周娟卢慕峻蔡志康王浩达骏陈其王忠
- 关键词：包皮脱细胞基质尿道
- 人脂肪来源干细胞与胶原支架共培养的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察评价人脂肪来源干细胞(Human adipose derived stem cells,hADSCs)在胶原支架中的生长情况,为进一步体内组织修复研究提供依据。方法取人抽脂术后脂肪,经胶原酶解、过滤、离心获得hADSCs,代传代扩增后,接种到胶原支架上。细胞-材料复合物分别体外培养1周、2周,裸鼠体内培养2周、4周后,HE染色观察细胞在支架上的生长情况,免疫组化HLA-Ⅰ检测经裸鼠体内培养后的复合物上的细胞的种属来源。结果原代培养的hADSCs呈"梭形"或"成纤维细胞"样,并以克隆团形式生长。免疫荧光Vimentin染色阳性。第3代hADSCs经流式细胞鉴定,CD29、CD44、CD105表达阳性,CD45、CD34表达阴性。胶原支架复合hADSCs经过体外、体内培养,hADSCs均能长入胶原支架的空隙内,且体内培养比体外培养有更多的细胞长入支架。体外培养1周,已有细胞粘附生长在胶原支架的边缘,体外培养2周后,更多的细胞渗透到材料内部。体内培养2周后,大量细胞占据材料的边缘,有部分细胞能渗透到材料内部甚至材料全层。体内培养4周后,大量细胞渗透支架全层。HLA-Ⅰ抗体检测发现,支架材料内部细胞阳性表达,说明胶原支架内部的细胞来源于hADSCs。结论胶原支架与hADSCs具有较好的相容性,可作为hADSCs的载体材料,用于组织工程缺损修复的研究。
- 徐明曦周哲张明吴稼晟李伟孙康王忠赵阳卢慕峻
- 关键词：脂肪来源干细胞胶原
- 人永生化尿路上皮细胞系与胶原支架共培养的实验研究
- 2014年
- 目的观察评价人永生化尿路上皮细胞系(immortalized human bladder urothelium cell line)SVHUC-1在胶原支架中的生长情况,为进一步体内组织修复研究提供依据。方法制备疏松多孔的胶原支架材料,SV-HUC-1传代扩增后,接种在胶原支架上,体外培养7 d后取材,观察SV-HUC-1和胶原的复合情况。结果 SV-HUC-1呈"多角形"、"铺路石"样,以克隆团形式生长。HE染色显示胶原支架上的SV-HUC-1经过体外培养7 d后即可形成沿支架表面排列的复层上皮结构,大量SV-HUC-1渗透到胶原的空隙内。扫描电镜显示细胞材料复合良好。结论 SV-HUC-1能在胶原支架上较好的生长,胶原可以作为理想的支架材料,进一步用于组织工程膀胱修复的研究。
- 周哲赵阳吴稼晟张明李伟孙康王忠卢慕峻
- 关键词：尿路上皮细胞胶原
