国家自然科学基金(81101819)
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
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- 脂多糖诱导肿瘤坏死因子释放因子基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定
- 2016年
- 探讨构建人脂多糖诱导肿瘤坏死因子释放因子(LITAF)基因的过表达慢病毒载体的技术方法,并检测其体外表达目的基因的水平。设计LITAF基因引物,应用聚合酶链反应(PCR)的方法扩增LITAF基因片段;应用EcoRI、Bam HI酶切LV8载体,通过连接酶将LITAF基因片段连接至线性化的LV8载体上,应用酶切及测序方法鉴定LITAF-LV8重组质粒,将其包装慢病毒后感染293T细胞(人胚肾细胞),观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,验证后感染肝癌细胞株HepG2。RT-PCR和Westernblot鉴定感染后HepG2中LITAF的表达。LITAF基因在慢病毒感染的HepG2细胞中的表达显著高于对照组细胞。说明成功构建了过表达LITAF的HepG2细胞株,为后期研究提供了实验基础。
- 姜勋亮张贺龙张峰康艳霞附舰庞海林闵婕
- 关键词：慢病毒过表达肝细胞肝癌
- 酵母双杂交诱饵表达载体pGBKT7-cide-3的构建、鉴定以及毒性、自激活效应的检测被引量：1
- 2013年
- 目的:构建并转化酵母双杂交体系中"诱饵"载体pGBKT7-cide-3以便用于人肝cDNA文库的筛选。方法:用RT-PCR方法从人肝细胞株QZG中扩增cide-3基因全外显子片段,并定向克隆入细菌-酵母穿梭表达质粒pGBKT7中;用PEG/LiAC法将pGBKT7-cide-3转化感受态酵母菌AH109。提取转化酵母菌的质粒DNA和总蛋白进行鉴定。同时检测表达产物对报告基因的激活作用及对酵母株AH109的毒性。结果:成功扩增出人cide-3 cDNA片段,限制性内切酶酶切和DNA测序证实获得正确的重组质粒pGBKT7-cide-3;获得可在色氨酸缺陷培养基(SD/-Trp)上生长含pGBKT7-cide-3的酵母菌克隆。鉴定表明pG-BKT7-cide-3已转化入酵母菌AH109,无自主激活报告基因的能力及对酵母的生长无毒性。结论:酵母双杂交"诱饵"载体pGBKT7-cide-3构建获得成功,可应用于酵母双杂交体系。
- 闵婕李青马楠康艳霞李娜
- 关键词：基因克隆酵母双杂交
- 鸦胆子油乳联合顺铂治疗肝癌腹水的疗效观察被引量：6
- 2016年
- 目的:评价鸦胆子油乳联合顺铂治疗肝癌恶性腹腔积液的疗效。方法:对92例符合入选标准的患者进行随机分组、平行对照研究。A组(治疗组,鸦胆子油乳联合顺铂组,腹腔热灌注术循环时腹腔注入顺铂40mg,术毕给予腹腔注入鸦胆子油乳注射液30mL)46例,B组(对照组,腹腔热灌注术循环时腹腔注入顺铂40mg)46例,1次/隔日,连续3次为1个周期,连续做2个周期。观察评价治疗前后临床有效率、生活质量改善、不良反应发生率。结果:与单用顺铂(B组)相比,鸦胆子油乳联合顺铂组(A组),在临床有效率(86.96%,P<0.01)、生活质量改善(52.17%,P<0.01)方面更优,其差异均有统计学意义。结论:鸦胆子油乳联合顺铂腹腔热灌注治疗肝癌恶性腹腔积液可提高临床有效率,并改善患者生活质量。
- 附舰闵婕康艳霞单宇鹏张峰张婕张贺龙
- 关键词：肝肿瘤
- 补中益气汤治疗癌性发热疗效观察被引量：10
- 2017年
- 目的:观察补中益气汤对癌性发热的疗效及不良反应。方法:选取中医辨证为气虚血亏型癌性发热者,共60例。随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组给予内服补中益气汤,对照组给予外用吲哚美辛栓剂,连续用药3周,对比观察临床疗效以及不良反应。结果:治疗组与对照组相比疗效具有显著优势(治疗组总有效率为90%,对照组总有效率66.7%),总有效率差异具有统计学意义(P<0.05)。不良反应方面,两组均未见明显不良反应。结论:补中益气汤治疗中医辨证为气虚血亏型癌性发热患者有较好疗效及安全性。
- 附舰单宇鹏闵婕史金凤王琰张贺龙
