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教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET050370)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：郭文毅李希吴继红方媛莫晓芬更多>>
相关机构：复旦大学上海医学院复旦大学更多>>
发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”上海市青年科技启明星计划国家重点实验室开放基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇电穿孔
  • 1篇色素上皮
  • 1篇色素上皮细胞
  • 1篇色素性
  • 1篇上皮
  • 1篇上皮细胞
  • 1篇视网膜
  • 1篇视网膜色素
  • 1篇视网膜色素上...
  • 1篇视网膜色素上...
  • 1篇视网膜炎
  • 1篇素性
  • 1篇网膜
  • 1篇网膜色素上皮
  • 1篇细胞
  • 1篇膜炎
  • 1篇光感
  • 1篇光感受器
  • 1篇感受器
  • 1篇穿孔

机构

  • 1篇复旦大学
  • 1篇复旦大学上海...

作者

  • 1篇张圣海
  • 1篇张萌
  • 1篇莫晓芬
  • 1篇方媛
  • 1篇吴继红
  • 1篇李希
  • 1篇郭文毅

传媒

  • 1篇中华眼底病杂...

年份

  • 1篇2010
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮细胞层和光感受器细胞层的实验研究
2010年
目的探讨在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮（RPE）细胞层和光感受器（PR）细胞层的可行性。方法147只健康雄性Spragne—Dawley（SD）大鼠根据电穿孑L刺激模式电压值分为5、10、15、20、25、30、35V组，右眼视网膜下腔注射增强型绿色荧光蛋白（EGFP）真核表达质粒pEGFP—N1为实验眼，左眼注射TE Buffer为对照眼。各组根据不同转染方向再分为RPE和PR两个亚组。各组除电压不同外，其余参数均为脉宽99ms，脉冲间期0．5s，连续5个脉冲。将带有负电荷的质粒在电场作用下，拟转染到RPE细胞层，反向置电极，拟转染到PR细胞层。转染后7d取各组视网膜铺片，荧光显微镜下观察EGFP表达强弱、范围及荧光细胞计数分析；采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）、实时逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）半定量观察EGFP蛋白和mRNA的表达。结果转染后7d，荧光显微镜观察发现，各组RPE亚组对照眼RPE细胞层内均未见特异性荧光表达，实验眼可见绿色荧光表达；各组RPE亚组对照眼视网膜铺片均未见荧光表达，实验眼视网膜铺片均可见转染了EGFP的RPE细胞。Western blot检测显示，随电压增加，EGFP蛋白与β-肌动蛋白条带灰度相对比值呈上升趋势。RTPCR检测显示，各组均产生阳性扩增条带，随电压增高，EGFP mRNA与GADPH mRNA扩增条带灰度相对比值逐渐增高。结论在体电穿孔方法可以有效辅助基因转染大鼠RPE细胞层。
张萌莫晓芬郭文毅吴继红方媛张圣海李希
关键词：色素上皮视网膜炎电穿孔光感受器
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