山东大学自主创新基金(2009TS047)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：杨丕山葛少华杜令倩赵宁韩倩倩更多>>
- 相关机构：山东大学山东大学第二医院山东省口腔生物医学重点实验室更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒表达载体pLentiTrident1-hBMP2-Neo-hNGF的构建及鉴定
- 2013年
- 目的:构建并鉴定含有人骨形成蛋白2(hBMP2)及神经生长因子(hNGF)目的基因的慢病毒载体。方法:使用限制性内切酶,将新霉素抗性基因(Neo)从载体pLentiTrident1-EGFP-Neo切下,插入pLentiTrident1空载体的相应多克隆位点上,构建出含新霉素抗性的表达载体。采用PCR扩增得到hBMP2与hNGF的目的片段,通过多克隆位点将2个目的基因插入表达载体。对该重组载体进行酶切鉴定、PCR鉴定以及DNA序列测序分析。结果:通过酶切鉴定及测序分析,慢病毒表达载体(plentiTrident 1-hBMP2-Neo-hNGF)构建成功。结论:成功构建了hBMP2与hNGF的共表达慢病毒载体,为研究神经因素在骨组织再生中的作用奠定了基础。
- 韩倩倩葛少华闫香珍杨丕山
- 关键词：骨形成蛋白2慢病毒载体
- 人牙周膜干细胞的分离鉴定及骨形态发生蛋白-2对其趋化效应的研究被引量：6
- 2012年
- 目的研究人牙周膜干细胞(PDLSCs)对骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的趋化反应。方法通过有限稀释法分离、培养人PDLSCs,利用免疫荧光染色检测人PDLSCs波形丝蛋白及干细胞表面标志物STRO-1的表达,检测人PDLSCs多向分化能力,通过克隆形成实验和5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)共培养的方法检测其干细胞特性。利用24孔的Transwell细胞培养室来检测人PDLSCs对BMP-2的趋化反应,光镜下计迁移至滤膜下侧面的不同视野的细胞数。结果人PDLSCs抗波形丝蛋白染色阳性,表达干细胞表面标志物STRO-1,体外诱导培养的人PDLSCs能够向成骨细胞和成脂细胞分化,具有较高的自我更新能力,并在体外呈克隆状生长。在100、200 ng.mL-1 BMP-2实验组,Transwell细胞培养室中迁移的细胞数目显著多于空白对照组(P<0.01)。结论 BMP-2对人PDLSCs有趋化效应。
- 杜令倩杨丕山赵宁葛少华
- 关键词：骨形态发生蛋白-2牙周膜干细胞趋化作用
