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教育部“新世纪优秀人才支持计划”(2007TO)
作品数:
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相关作者:
狄静芳
王慧琪
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2009
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双链RNA和咪喹莫特联合刺激的协同作用研究
2009年
目的研究双链RNA(double—stranded RNA,dsRNA)和咪喹莫特联合刺激是否具有协同效应。方法在Toll样受体3(TLR3)的特异性刺激剂dsRNA、TLR7的特异性刺激剂咪喹莫特(R837)单独刺激或二者联合刺激条件下,检测BALB/c×C57BL/6和NK细胞缺陷的非肥胖型糖尿病(NOD)×C57BL/6小鼠胚胎吸收率。采用小鼠体内注射上述刺激剂的方法,流式细胞术检测子宫CD45^+细胞内细胞因子表达水平。为进一步鉴定CD45^+细胞身份,在体外培养系统中采用dsRNA和咪喹莫特刺激胎盘和底蜕膜来源的子宫CD3^+T细胞和CD49b^+NK细胞,并检测细胞内细胞因子表达水平。采用丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen—activated protein kinase,MAPK)抑制剂SP600125和PD98059阻断细胞因子表达水平的增加。结果dsRNA和咪喹莫特联合刺激对胚胎吸收率的增高具有协同作用,同时对CD45^+细胞内TNF—α和IFN-γ的表达增强具有协同刺激作用。进一步细胞鉴定研究显示,虽然在BALB/c小鼠CD3^+细胞和CD49b^+NK细胞中均可发现这种协同效应,但是在NOD小鼠,这种细胞因子水平的增高应主要归因于CD3^+T细胞,因为在CD49b^+NK细胞不显示这种细胞因子增高趋势。上述刺激剂合用的协同效应可部分地被JNK(Jun N-terminal kinase)MAPK抑制剂SP600125阻断,而几乎被ERK(extracellular signal—regulated kinase)MAPK抑制剂PD98059所完全阻断。结论增强的TLR3和TLR7联合信号可能是通过NOD小鼠Th1型T细胞,而不是NK细胞所传导。ERK MAPK途径可能在TLR3和TLR7参与的细胞信息传递过程中发挥关键性作用。
李萃
王慧琪
王文静
狄静芳
曾山
林羿
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动物模型
免疫缺陷
免疫调节
TOLL样受体
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