广东省自然科学基金(1015102240100002)
- 作品数：4 被引量：40H指数：1
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- 细胞自分泌对小鼠骨髓基质细胞体外培养的影响
- 2015年
- 目的阐明小鼠骨髓基质细胞体外培养的影响因素,优化骨髓基质细胞体外培养方法。方法以小鼠骨髓基质细胞为研究对象,倒置显微镜和MTT法观察骨髓基质细胞不同接种数目(1×105个/孔,3×105个/孔,5×105个/孔)条件下和相同接种数目不同培养基体积(100、150、200μl)条件下的骨髓基质细胞体外生长状态。制备骨髓基质细胞体外培养条件培养基,观察条件培养基对骨髓基质细胞体外生长状态的影响。结果骨髓基质细胞体外培养7 d,100μl培养体系时,接种1×105个细胞的培养孔基本无基质细胞生长,接种3×105个细胞的基质细胞贴壁约30%左右,接种5×105个细胞的基质细胞贴壁达90%左右。当接种细胞数目为3×105个时,随培养基体积的增多基质细胞数目明显减少(P<0.05),而条件培养基组基质细胞的数目明显多于普通培养基组(P<0.05);当接种细胞数目为5×105个时,培养基体积对基质细胞生长状态基本无影响,条件培养基组与普通培养基组骨髓基质细胞的生长状态无显著差异。结论骨髓基质细胞在体外培养时,接种细胞数目过低会影响自身分泌胞外因子的浓度从而影响其自身的生长;细胞自分泌对自身的生长有促进作用,但是当分泌的胞外因子达到一定浓度后促生长作用将达到平台期。
- 薄华本郑迪威钱佳碧邵宏伟黄树林
- 关键词：骨髓基质细胞自分泌细胞生长
- 当归补血汤调控骨髓造血机理及对造血微环境的影响被引量：39
- 2013年
- 目的探讨当归补血汤调控骨髓造血的机理。方法 50只ICR小鼠随机分为5组,每组10只。除正常组外其他组小鼠连续腹腔注射多柔比星4 mg·kg^(-1)·d^(-1),共3 d,正常组给予同等体积的生理盐水。注射多柔比星3 d后,当归补血汤低、中、高剂量组分别连续腹腔注射补血汤5、15、25 g·kg^(-1)·d^(-1),共7 d,正常组和模型组给予同等体积的生理盐水。给药结束制备骨髓单细胞悬液,体外培养观察骨髓基质细胞生长状态,流式细胞仪检测骨髓细胞增殖和黏附情况。结果当归补血汤组骨髓基质细胞生长状态好于正常组和模型组,骨髓细胞之间的聚集明显。模型组聚集细胞数占总细胞比例为(4.00±1.10)%,低于正常组[(3.07±2.35)%],但无显著差异(P>0.05)。当归补血汤低、中、高剂量组聚集细胞数目占总细胞数比例分别为(5.40±2.91)%、(7.36±2.32)%和(9.27±3.35)%,均高于模型组(P<0.05或P<0.01)。正常组G2期细胞比例高于其他四组(P<0.05),当归补血汤各剂量组G2/M期细胞比例与模型组比较无显著差异(P>0.05)。结论当归补血汤可能通过改善基质细胞的状态、增强骨髓细胞之间的黏附来改善骨髓造血微环境。
- 薄华本陈启助沈晗吴凤麟邵宏伟黄树林
- 关键词：当归补血汤骨髓造血干细胞细胞黏附造血微环境
- 建立一种survivin抗原肽诱导T淋巴细胞优势取用TCR Vβ基因的方法
- 2013年
- 目的:探讨survivin抗原肽体外诱导健康人外周血单个核细胞(PBMC)后T淋巴细胞活化情况及TCRVβ表达谱变化。方法:分离健康人PBMC经rhIL-4、rhGM-CSF诱导DCs,将成熟DCs分为阴性组(不负载肽)、未洗脱负载组(负载survivin肽)、洗脱负载组(经酸液洗脱并多聚甲醛固定后负载survivin肽),分别与自体淋巴细胞共培养诱导抗原特异性T淋巴细胞。分别于24小时、48小时、96小时和7天以Elisa法检测诱导后T淋巴细胞中IFN-γ的分泌,并于第7天通过流式细胞仪分析TCRVβ表达谱。结果:随着时间延长两实验组IFN-γ的分泌比阴性组显著增高,且洗脱负载组增加更为显著。流式细胞仪分析结果显示洗脱负载组相比于阴性组及未洗脱负载组引起TCR Vβ表达谱的改变更为明显,其中TCR亚家族Vβ7.2、Vβ12、Vβ14、Vβ16、Vβ20、Vβ22最为显著。结论:DCs经酸液洗脱表面多肽并固定的方法更能有效地诱导TCRVβ亚家族优势取用。
- 林燕梅沈晗邵红伟吴凤麟黄树林肖兰凤
- 关键词：SURVIVINTCR
- 葛花提取物对急性心肌梗死小鼠心肌的保护作用被引量：1
- 2014年
- 目的:阐明葛花对急性心肌梗死小鼠心肌的保护作用及作用机制。方法:结扎小鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型。实验分为生理盐水组,复方丹参组,葛花提取物低、中、高剂量组共5组。通过心肌梗死面积和心肌酶的变化来评价保护效果,通过检测血清中SOD、MDA的含量和心肌中β-ARK1、eNOS基因的表达情况来阐明其作用机制。结果:与生理盐水组比较,葛花提取物能够减少心肌梗死面积(P<0.05),降低血清中心肌酶的含量(P<0.05),同时能够升高血清中SOD的含量(P<0.05),并能降低血清中MDA的含量(P<0.05)和心肌中β-ARK1的表达(P<0.05)。结论:葛花提取物通过升高SOD的含量和降低心肌中βARK1的表达来保护急性心肌梗死心肌。
- 薄华本郑迪伟钱佳碧
- 关键词：葛花急性心肌梗死心肌
