苏州市科技支撑计划项目(SNG0924)
- 作品数：13 被引量：31H指数：4
- 相关作者：朱江浦冠勤孙兴鲁王文兵盛晔更多>>
- 相关机构：苏州大学江苏大学中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：苏州市科技支撑计划项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 斜纹夜蛾的人工饲养技术被引量：9
- 2011年
- 斜纹夜蛾作为一种主要的经济害虫和杀虫剂筛选靶标,被用于害虫抗性监测和杀虫剂生物测定等,人工饲养斜纹夜蛾有重要意义。本文介绍了斜纹夜蛾的人工饲养技术,比较了天然饲料和人工饲料的优缺点,提出了防止斜纹夜蛾种群衰退的措施。
- 黄艳君浦冠勤
- 关键词：斜纹夜蛾人工饲养饲料配方饲养技术
- 斜纹夜蛾对3种有机磷农药的抗性监测被引量：4
- 2010年
- 采用浸叶法测定了苏州地区斜纹夜蛾3龄幼虫的室内毒力效果。结果表明:斜纹夜蛾对毒死蜱的抗药性水平上升较慢,最高仅为5.57倍;辛硫磷次之,抗性水平为2.57～20.74倍;而乙酰甲胺磷的抗性倍数最高达到109.46倍,不宜继续使用。3种农药的毒力大小依次为:毒死蜱>辛硫磷>乙酰甲胺磷。
- 陈亮孙兴鲁浦冠勤
- 关键词：斜纹夜蛾有机磷浸叶法毒力抗性
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒ⅡORF59基因克隆及原核表达被引量：1
- 2010年
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ(Spodoptera lituramulticapsid nucleopolyhedrovirus,SpltMNPVⅡ)是一种新发现的繁殖率和毒力极强的病毒株,其全基因组序列已经测定,共149个ORFs。对SpltMNPVⅡBV和ODV的质谱分析表明,ORF59位于ODV中,是一个功能未知的ORF。本研究根据SpltMNPVⅡORF59基因序列设计引物,经PCR扩增,克隆了ORF59基因。核苷酸序列分析表明,克隆片段上游具有4个TATA box,一个早期启动子CAGT和一个晚期启动子ATAAG。读码框含645 bp,编码214个氨基酸的蛋白质,推定分子量为25.4 ku。将ORF59片段克隆至原核表达载体pET-28a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中融合表达,SDS-PAGE分析表明在约29 ku处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。融合表达产物经纯化后,免疫新西兰大白兔获得ORF59多克隆抗体。上述结果为深入研究ORF59的结构与功能提供基础。
- 金玉婷石瑞英盛晔王文兵朱江
- 关键词：斜纹夜蛾核型多角体病毒原核表达
- 昆虫杆状病毒杀虫剂的研究进展被引量：6
- 2010年
- 基于昆虫杆状病毒用于生物防治具有安全、稳定和特异性高等优点,已得到了广泛的重视。介绍了昆虫杆状病毒用于生物防治的特点及通过基因工程改造杆状病毒以提高其作用效率和扩大其作用范围的3种方法;同时,展望了重组昆虫杆状病毒杀虫剂的研究和应用方向。
- 李颖孙兴鲁浦冠勤
- 关键词：昆虫杆状病毒重组杆状病毒杀虫剂生物防治
- 类芋螺毒素基因的克隆及其斜纹夜蛾重组杆状病毒转移载体的构建
- 2011年
- 设计一对特异性的引物,以苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)基因组为模板,经PCR克隆出类芋螺毒素基因(ctx-like gene)作为重组病毒的外源基因,并在具有强毒力的斜纹夜蛾核型多角体病毒株(SpltMNPVⅡ)的基础上,利用蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(egt)同源重组臂DNA序列,构建了含有多角体基因启动子启动的类芋螺毒素基因和p10基因启动子启动的增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)的重组转移载体psk-△egt-Pph-ctx-Pp10-egfp,为进一步研制高效重组SpltMNPV生物杀虫剂奠定了基础。
- 孙兴鲁汤欣欣朱江王文兵史全良浦冠勤
- 关键词：芋螺毒素斜纹夜蛾生物杀虫剂
- 重组杆状病毒杀虫剂的研究现状与展望被引量：2
- 2011年
- 介绍了插入几种外源基因重组杆状病毒的研究状况、egt基因的缺失对杆状病毒的影响以及扩大杆状病毒宿主域方面的研究与效果。
- 孙兴鲁黄艳君朱江浦冠勤
- 关键词：杆状病毒生物杀虫剂
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒日本株pif-2基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2010年
- 为研究斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopoledrovirus,SpltMN-PV)侵染规律,根据SpltMNPV中国株(G2)ORF135基因序列设计引物,经PCR扩增,从SpltMNPV日本株(B)基因组中克隆了pif-2基因。核苷酸序列分析表明,该基因是甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera exigua nucleopoledrovirus,SeMNPV)pif-2的同源物,读码框含1278 bp,编码425个氨基酸的蛋白质,推定分子量为48.6 kD。与其他杆状病毒的同源物比对显示,SpltMNPV-JP-B PIF-2蛋白中14个Cys残基高度保守。联配分析表明,SpltMNPV-JP-B pif-2的核苷酸序列与其他13种核型多角体病毒的同源性有较大差异。将pif-2克隆至原核表达载体pET32a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中获得了融合表达,SDS-PAGE分析表明在约69 kD处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。
- 胡贵玉王文兵盛晔黄光镁石瑞英金玉婷朱江
- 关键词：斜纹夜蛾核型多角体病毒原核表达
- 重组斜纹夜蛾核型多角体病毒的构建和初步筛选被引量：1
- 2011年
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multinucleocapsid nucleopolyhedroviruse,SpltMNPV)日本株(C3)(又命名为SpltMNPV Ⅱ)是Kamiya等从日本全国各地野外感病幼虫收集、分离到189个SpltMNPV克隆中繁殖率和毒力极强的一种新型病毒株.本研究在SpltMNPV Ⅱ的基础上构建了egt缺失的,多角体启动子启动的,BmK ITa1成熟肽和增强型绿色荧光蛋白(egfp)融合表达的重组移载体psk-Δegt-pph-BmK ITa1-egfp,并通过共转染初步筛选出重组病毒感染的荧光细胞.成果为进一步研制高效重组SpltMNPV生物杀虫剂提供了可行性.
- 汤欣欣孙兴鲁浦冠勤王文兵朱江
- 关键词：斜纹夜蛾核型多角体病毒BMKEGT
- 斜纹夜蛾乙酰胆碱酯酶基因cDNA片段的克隆和序列分析被引量：5
- 2010年
- 斜纹夜蛾(Spodoptera litura)是桑树的主要害虫之一。昆虫体内的乙酰胆碱酯酶(AChE,EC3.1.1.7)是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标。通过设计简并引物,利用RT-PCR技术克隆了斜纹夜蛾的乙酰胆碱酯酶基因cDNA片段(GenBank登录号:FJ959384)。序列分析结果表明,该cDNA片段全长1 191 bp,编码397个氨基酸,包含了乙酰胆碱酯酶基因的特征位点区域。基于乙酰胆碱酯酶氨基酸同源序列的进化分析表明,斜纹夜蛾与甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)的亲缘关系最近,与棉蚜(Aphis gossypii)的亲缘关系最远。该基因cDNA片段的克隆有助于对斜纹夜蛾乙酰胆碱酯酶结构、功能及抗药性的分子机制研究。
- 陈亮李兵浦冠勤
- 关键词：斜纹夜蛾乙酰胆碱酯酶基因克隆反转录PCR
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒ⅡORF56基因的序列分析及原核表达被引量：1
- 2010年
- 对斜纹夜蛾核型多角体病毒ⅡORF56基因的序列特征及原核表达进行了初步研究。ORF56基因编码区全长675 bp,编码224个氨基酸,预测编码蛋白分子量25.9 ku。序列分析显示,ORF56具有典型的晚期启动子特征序列GTAAG,推导的氨基酸序列中含有13个磷酸化位点和3个N-糖基化位点。PCR扩增获得该基因,克隆到融合表达载体pET-32 a(+)中,在大肠杆菌BL21中诱导表达。用纯化的融合蛋白免疫家兔,制备了多克隆抗体,为深入研究Sp ltMNPVⅡORF56的结构与功能提供基础。
- 石瑞英金玉婷盛晔王文兵朱江
- 关键词：斜纹夜蛾核型多角体病毒原核表达
