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白蚁肠道木质素分解菌、染料脱色菌的分离鉴定及产酶条件优化被引量：2: 2014年; 分离具有木质素分解功能的菌株,并优化其产酶条件,同时观察分离菌株对染料的脱色情况,可为有效分解利用木质素提供必要的微生物资源。利用苯胺蓝平板法从黑胸散白蚁肠道中分离到2株具有木质素分解功能的菌株PY12、MX5,经16srRNA鉴定PY12、MX5分别为肠杆菌属的霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)、芽孢杆菌属的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。优化后菌株PY12LiP活力提高为278U/L,菌株MX5LiP活力提高为256U/L。并研究二者对6种染料的脱色效果观察,发现菌株PY12、MX5对6种染料都有不同程度的脱色作用,但对结晶紫脱色作用较弱。; 高云航王巍刘萌勾长龙娄玉杰马红霞; 关键词：白蚁产酶条件染料脱色

响应面优化Bacillus licheniformis MX5产木质素过氧化物酶的发酵条件被引量：4: 2015年; 通过响应面分析方法对地衣芽孢杆菌MX5产木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase,Lip)的发酵条件进行研究。根据Box-Benhnken中心组合设计原理,在单因素试验基础上采用三因素三水平的响应面分析法确定MX5产Lip的最佳培养条件为:培养基初始pH 8.76,培养温度37.6℃,发酵时间为98.32h,酶活达到最大值103.965U/L。表明试验建立的模型在预测Lip生产中具有良好的效果。; 高云航王巍勾长龙李秋菊娄玉杰马红霞; 关键词：木质素过氧化物酶响应面

基于宏基因组学的成年和老年袋鼠肠道菌群多样性和差异性研究: 2016年; 为了了解袋鼠粪便中菌群的多样性,分析成年和老年袋鼠粪便中菌群的差异性。应用高通量测序技术测定成年和老年袋鼠粪便细菌16S rDNA的V3-V4变异区序列,应用Prinseq和Mothur等软件整理和统计样品序列数目和操作分类单元(OTUs)数量,分析菌群物种丰度、分布和Alpha多样性。获得成年袋鼠粪便(AK)的OTU数为7 210,老年袋鼠粪便(OK)的OTU数为6 120。AK和OK的丰富度指数分别为4 377.028/7301.574和1 430.718/1858.623,香农指数分别为6.275和4.273。AK和OK肠道优势菌群均隶属厚壁菌门,分别占65%(AK)和78%(OK),除此之外,共有优势菌门还有变形菌门、拟杆菌门和螺旋菌门,但AK有四种独有菌门。获得了成年和老年袋鼠粪便中细菌的丰富度、菌群结构及差异性。; 高云航徐佳萍赵晗旭邸海洋王巍娄玉杰马红霞; 关键词：袋鼠肠道菌群宏基因组学

2株不同来源纤维素分解菌的分离鉴定及产酶条件优化被引量：6: 2013年; 试验旨在分离具有纤维素分解功能的菌株,并对菌株产酶条件进行优化,为有效分解利用纤维素提供良好的微生物资源。本研究采用刚果红平板染色法分别从牛粪及白蚁肠道中分离高效纤维素分解菌,并对其进行理化、遗传学鉴定和产酶条件研究。结果表明:经初筛、复筛最终得到2株纤维素分解菌N12及Y5,其FPA酶活分别为5.167 U/mL和6.05 U/mL。通过形态特征观察、生化鉴定和16S rRNA遗传学鉴定,菌株N12鉴定为芽孢杆菌属的短小芽孢杆菌,Y5为芽孢杆菌属蜡样芽孢杆菌;菌株N12和Y5产酶的最佳碳源为0.5%玉米粉;最佳氮源分别为1%酵母粉、1%蛋白胨0.5%牛肉膏,初始pH分别为3.0及5.0;发酵温度分别为42、37℃;均在培养54 h产酶活性最高。综上,本试验筛选到了2株不同来源的高效降解纤维素的菌株。; 高云航王巍王艳秋历娜马红霞娄玉杰; 关键词：牛粪白蚁纤维素分解菌

蜡样芽胞杆菌纤维素酶基因的克隆与其在乳酸菌中的表达被引量：1: 2015年; 全球每年可产生的纤维素数量庞大。为了探索纤维素资源,更为科学合理的利用纤维素类饲料提供理论依据,根据蜡样芽胞杆菌纤维素酶基因序列设计1对特异性引物,扩增纤维素酶(Cell)基因,获得片段大小约为1 269bp的目的基因。该基因与Bacillus cereus B4264、Bacillus cereus G9842纤维素酶基因序列同源性分别达96%和95%。将Cell基因与乳酸乳球菌表达载体pNZ8149进行连接,电转化入乳酸菌NZ3900中,构建纤维素高效分解基因工程乳酸菌,经乳链菌肽(Nisin)诱导表达,SDS-PAGE分析得到分子量大小约为42kDa的目的片段。刚果红平板验证该表达蛋白具有纤维分解活性。FPA法测定表达产物酶活力为0.57U/mL。该基因的成功表达,对纤维素基因工程菌的相关研究具有指导意义。; 高云航张喜宏王巍葛铮历娜娄玉杰马红霞; 关键词：蜡样芽胞杆菌纤维素酶克隆乳酸菌

圈养成年非洲狮和幼年非洲狮肠道菌群多样性的比较分析: 2017年; 通过PCR-DGGE技术探讨同一养殖环境中的成年非洲狮和幼年非洲狮肠道菌群多样性。提取总DNA,对16S rDNA的V3区进行变形梯度凝胶电泳,对DGGE图谱进行特异性条带回收和克隆测序,通过BLAST与已知条带对比,结果显示:成年非洲狮肠道内含有梭菌属Clostridium)、毛螺旋菌Lachnospiraceae bacterium)、优杆菌属Anaerovorax)、乳球菌属Lactococcus)、消化链球菌属Peptostreptococcus)和Blautia菌属。而幼年非洲狮肠道内菌群较少且均为共有菌群,如:拟杆菌Bacteroidetes bacterium)、瘤胃菌属(rumen bacterium),UPGMA聚类分析得出,成年非洲狮与幼年非洲狮之间菌群结构相似度较低,仅为34%.以上结果表明,非洲狮成长的不同阶段,菌群结构存在明显的差异。这为野生动物不同阶段微生态制剂的研发提供理论基础。; 贾小营王巍董文龙王家祯朱世馨娄玉杰高云航; 关键词：非洲狮肠道菌群多样性 PCR-DGGE

牛粪中纤维素分解菌的分离鉴定及其产酶条件优化研究被引量：5: 2014年; 本试验通过对牛粪进行富集培养、分离纯化,利用刚果红染色法和摇瓶复筛得到1株产酶活较高的纤维素分解菌N12,经形态观察、生化鉴定和16SrRNA遗传学鉴定为芽孢杆菌属的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),并对其产酶条件进行了初步优化。结果表明,菌株N12以0.5%玉米粉为碳源、1%酵母粉为氮源、初始pH 3.0、42℃摇瓶培养54h产酶活最高。; 高云航张喜宏王巍王艳秋马红霞娄玉杰; 关键词：牛粪纤维素分解菌

白蚁肠道木质素分解菌PY12的分离鉴定及lip基因的克隆被引量：2: 2014年; 利用苯胺蓝平板法从白蚁肠道中分离到一株木质素分解高效菌株PY 12,经形态观察、生化鉴定和16 SrRNA鉴定为肠杆菌属的霍氏肠杆菌(Enterobacterhormaechei).根据已报道的lip(木质素过氧化物酶,Lignin Peroxidase)基因序列设计特异性引物,克隆该菌的lip基因,将其克隆入pMD19-T载体,获得的核苷酸序列为918 bp,并与GenBank中已知的lip序列进行同源性对比,同源性不高,但该核苷酸翻译后的氨基酸序列比对结果发现,其与假单胞杆菌Pseudomonas sp.编码蛋白质的氨基酸序列同源性为88.5%.; 高云航王巍刘萌勾长龙娄玉杰马红霞; 关键词：白蚁 RRNA 木质素过氧化物酶基因

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吉林省教育厅科学技术研究项目(201358)