中国农业科学院油料作物研究所所长基金(1610172010003)
- 作品数：7 被引量：31H指数：3
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- 相关机构：中华人民共和国农业部中国农业科学院油料作物研究所更多>>
- 发文基金：中国农业科学院油料作物研究所所长基金引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2012年
- 采用玉米赤霉烯酮(ZEN)与羧甲基羟胺半盐酸盐在吡啶中反应,生成玉米赤霉烯酮肟(ZENO),用活性酯法将ZENO与牛血清白蛋白(BSA)的氨基相连合成ZEN人工抗原;并进行了紫外吸收鉴定;以合成的BSA偶联物(ZEN-BSA)为免疫抗原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,采用非竞争/竞争ELISA两步筛选法获得能够稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株1C7。抗体1C7灵敏度(IC50)达0.61μg/L,与T-2毒素、呕吐毒素(DON)、黄曲霉毒素(AFT)的交叉反应率均<0.1%。本研究为研发粮油产品中玉米赤霉烯酮特异性免疫分析技术及产品奠定了重要基础。
- 唐晓倩李培武张奇张文丁小霞王海彬
- 关键词：玉米赤霉烯酮单克隆抗体人工抗原灵敏度
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫分析核心试剂特异性单克隆抗体的研制与特性研究被引量：1
- 2012年
- 采用1,1'-羰基二咪唑(CDI)活化法成功将脱氧雪腐镰刀菌烯醇分子上C-3和C-15位羟基与载体蛋白赖氨酸的氨基共价偶联得到免疫原DON-BSA和包被原DON-OVA,并用三硝基苯磺酸法对合成结果进行鉴定。以人工抗原免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/O鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和多次亚克隆,得到了1株能稳定分泌脱氧雪腐镰刀菌烯醇抗体的单克隆细胞株1D5,并制备单克隆抗体腹水。经检测该抗体亚型为IgG1,亲和力常数Ka为8.33×107L/mol,交叉反应的试验结果显示该抗体与其他真菌毒素无交叉反应率,稳定性良好,为粮油食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫快速检测技术建立及产品研发提供了关键试剂材料。
- 王海彬李培武张奇张文丁小霞张兆威
- 关键词：呕吐毒素人工抗原单克隆抗体
- 液相芯片及其在粮油主要真菌毒素同步检测中的应用被引量：3
- 2012年
- 液相芯片整合了分子生物学、免疫学、高分子材料、微流控技术、高速数字信号处理、计算机分析等多方面技术,可实现少量样本高通量定性定量检测。本文主要阐述液相芯片定性与定量分析的基本原理、特点及其在分析领域的应用现状,探讨液相芯片在小分子高通量分析中的工作模式及其当前技术难点,分析黄曲霉毒素等粮油主要真菌毒素免疫分析研究进展,指出液相芯片在粮油主要真菌毒素检测中将有广泛的应用前景。
- 李鑫李培武张奇张文张兆威
- 关键词：液相芯片真菌毒素高通量同步检测
- 抗黄曲霉毒素M_1单链抗体基因克隆与蛋白结构模拟被引量：2
- 2012年
- 为构建抗黄曲霉毒素M1单链抗体(scFv)基因,并进行蛋白质结构模拟及理化特性分析。采用重叠延伸PCR方法,以能特异性分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B12为原料,构建其单链抗体基因,进行测序,采用生物信息软件进行氨基酸序列推导、结构预测以及理化性质分析。抗黄曲霉毒素M1scFv基因全长737 bp,对应245个氨基酸,单链抗体分子量约为25 897.4,等电点预测值6.90;二级结构显示抗黄曲霉毒素M1单链抗体含α螺旋38处,β折叠24处,延伸链74处,随机卷曲109处。三级结构建模显示重链(VH)和轻链(VL)的6个环区(CDR区),共同组成抗体的抗原结合区,符合scFv的结构特点,具有抗原结合位点的空间构象。构建了一个抗黄曲霉毒素M1scFv基因,应用生物信息学技术所获得的预测和分析结果为该单链抗体的进一步表达、纯化和活性研究提供信息。
- 李鑫李培武张奇张文雷佳文
- 关键词：黄曲霉毒素M1单链抗体
- 抗黄曲霉毒素单链抗体基因的克隆与表达被引量：3
- 2012年
- 为降低黄曲霉毒素抗体制备成本,在已有的能分泌抗黄曲霉毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞系8F6的基础上,成功克隆得到了该单克隆抗体的重链(VH)和轻链可变区(VL)基因片段。通过重叠延伸PCR的方法将轻、重链可变区基因连接,并引入连接肽(Linker)编码序列,构建VH-Linker-VL结构的单链抗体(ScFv)基因,并将该基因克隆到噬菌体表达载体pCANTAB 5E上,使单链抗体以噬菌体展示形式在大肠杆菌TG1中表达。间接竞争ELISA方法检测到该ScFv对黄曲霉毒素B1的抑制率(IC50)值为0.57ng/mL,表明该单链抗体与亲本鼠单抗有相同的抗原结合特异性,且具有很高灵敏度。
- 李鑫李培武张奇张文李园园
- 关键词：黄曲霉毒素单链抗体
- 粮油产品真菌毒素抗体制备研究进展被引量：11
- 2012年
- 本文简要综述了粮油真菌毒素抗体制备的发展情况,包括真菌毒素免疫原的制备、抗体的制备以及真菌毒素常用免疫学检测方法,同时介绍了我国真菌毒素抗体研究过程中面临的问题,并对未来真菌毒素抗体技术的发展前景进行了展望。
- 王海彬李培武张奇张文
- 关键词：粮油真菌毒素免疫分析抗体制备
- 花生黄曲霉毒素污染臭氧脱毒技术研究被引量：12
- 2013年
- 研制了一种花生黄曲霉毒素污染臭氧脱毒专用装置,分析花生黄曲霉毒素污染的臭氧脱毒技术和脱毒效果,包括通气方式、臭氧浓度、处理时间和花生水分含量对脱毒的影响等。结果表明,下部通入臭氧气体,上部排气的方式下,臭氧浓度6.0mg/L、处理时间30min、花生水分含量为5%时脱毒效果最佳。在此条件下,花生中黄曲霉毒素总量和B1脱毒百分率分别为65.88%和65.90%,脱毒效果显著。花生黄曲霉毒素污染臭氧脱毒装置和技术操作简单、重现性好、环境友好,适用于花生及粮油制品黄曲霉毒素脱毒。
- 陈冉李培武马飞丁小霞张文张奇
- 关键词：黄曲霉毒素脱毒臭氧花生水分含量
