国家自然科学基金(81001540)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 密蒙花方防护糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞损伤机制探讨被引量：4
- 2018年
- 目的探讨密蒙花方防治糖尿病视网膜病变大鼠早期视网膜神经细胞损伤的作用机制,为临床实践提供实验依据。方法采用清洁级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠120只,其中正常组30只,其余大鼠采用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠动物模型,造模成功后随机分为模型组及密蒙花方组,密蒙花方组采用密蒙花方灌胃3个月,模型组用与密蒙花方组等容的蒸馏水灌胃。给药1个月后,采用TUNEL法检测大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)凋亡情况;分别在给药1个月、2个月、3个月后采用高效液相色谱法检测各组大鼠视网膜中谷氨酸含量; PCR以及Western blot法检测视网膜中Sigma-1R mRNA和蛋白表达情况。结果给药1个月后,TUNEL法检测结果示,密蒙花方组RGCs凋亡数少于模型组。高效液相色谱法检测结果示,给药1个月、2个月、3个月后,模型组较正常组谷氨酸含量均增加(均为P <0. 01),密蒙花方组谷氨酸含量较模型组均降低(均为P <0. 01)。给药3个月后,正常组、模型组和密蒙花方组视网膜Sigma-1R mRNA相对表达量分别为1. 71±0. 11、0. 67±0. 09和1. 50±0. 14,Sigma-1R蛋白相对表达量分别为0. 39±0. 02、0. 16±0. 02和0. 30±0. 01;与正常组相比,模型组Sigma-1R mRNA及蛋白水平均降低(均为P <0. 01);与模型组相比,密蒙花方组Sigma-1R mRNA及蛋白水平均升高(均为P <0. 01);密蒙花方组与正常组之间差异均无统计学意义(均为P> 0. 05)。结论糖尿病视网膜病变早期即出现视网膜神经细胞的凋亡及损伤,密蒙花方可通过谷氨酸和Sigma-1R介导机制干预糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞损伤,从而起到阻止糖尿病视网膜病变进一步发展的作用。
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- 关键词：糖尿病视网膜病变视网膜神经细胞谷氨酸
- 密蒙花方防治高糖下体外视网膜神经节细胞损伤机制探讨被引量：3
- 2018年
- 目的探讨中药复方密蒙花方防护高糖下视网膜神经节细胞(RGC-5)的损伤机制。方法将密蒙花方含药血清作用于高糖状态下的体外培养的RGC-5,采用CCK-8法检测细胞增殖状态,流式细胞术检测细胞凋亡。Real Time-PCR法及Western blot法检测RGC-5细胞内Sigma-1R mRNA,BDNF mRNA,CNTF mRNA和蛋白水平变化。结果 CCK-8法检测高糖状态下RGC-5细胞增殖受到抑制,而中药含药血清具有促进RGC-5细胞增殖的作用。高糖状态下,RGC-5细胞凋亡率增加,中药组与模型组比较,RGC-5凋亡率降低(P<0.01)。与正常组相比,高糖组BDNF、CNTF及Sigma-1R mRNA、蛋白水平降低,与高糖组相比,中药组BDNF、CNTF及Sigma-1R mRNA及蛋白水平升高。结论密蒙花方含药血清可抑制高糖状态下体外培养的RGC-5细胞发生凋亡和损伤,其机制可能与调节神经营养因子BDNF、CNTF表达和Sigma-1R介导有关。
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- 关键词：视网膜神经节细胞脑源性神经营养因子睫状神经营养因子
- 密蒙花方对高糖状态下视网膜Müller细胞增殖的影响被引量：2
- 2014年
- 目的从离体细胞研究层面,研究中药密蒙花方对高糖状态下视网膜Müller细胞损伤的保护作用。方法 (1)采用大鼠视网膜Müller细胞在30 mmol/L高糖下进行体外培养,模拟高糖环境,再分别给予20%含密蒙花方血清(以下均称含药血清)干预12 h,24 h、36 h,观察密蒙花方含药血清对大鼠视网膜Müller细胞增殖的影响。(2)采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双色染色法观察密蒙花方对高糖状态下视网膜Müller细胞凋亡的影响。结果 (1)高糖组较正常组吸光度(OD)值增高;含药血清组与高糖组相比,OD值明显降低,各含药血清组间比较,随着时间的延长,OD值逐渐降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)高糖组较正常组细胞早期凋亡比例减少,活细胞比例增高,各含药血清组与高糖组相比,细胞早期凋亡比例增高,活细胞比例减少(P<0.05)。密蒙花方通过诱导早期高糖状态下视网膜Müller细胞的早期凋亡,抑制细胞反应性增生,从而起到防护高糖状态下视网膜神经细胞损伤的作用。结论密蒙花方可以抑制早期高糖状态下视网膜Müller细胞的增殖。
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- 关键词：高糖
- 心肾同治法对糖尿病大鼠视网膜神经营养因子的作用
- 2019年
- 目的 探讨心肾同治法指导下所创密蒙花复方对糖尿病大鼠视网膜病变神经功能损伤的保护机制.方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、密蒙花复方组.通过链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型.连续灌胃给药90 d,分别于第30、60、90天检测各组大鼠视网膜电生理指标,第90天时HE染色观察视网膜形态改变、TUNEL法检测视网膜神经节细胞凋亡及PCR、West-ern blot检测脑源性神经营养因子(BDNF)、视网膜睫状神经营养因子(CNTF)mRNA和蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠视网膜电图振荡电位(OPs)波幅及b波波幅降低,视神经功能下降,差异具有统计学意义(P<0.01).模型组视网膜神经节细胞肿胀,排列紊乱,数目减少,BDNF和CNTF mRNA及蛋白表达下降.密蒙花复方组与模型组比较,OPs、b波波幅升高(P<0.01),视网膜神经节细胞凋亡数目减少,视网膜BDNF和CNTF mRNA及蛋白表达升高.结论 密蒙花复方可通过调节视网膜神经营养因子BDNF和CNTF表达水平对糖尿病大鼠视网膜病变神经功能损伤起到保护作用.
- 吴正正王谦葛东宇严京宫喜梅刘慧娴
- 关键词：糖尿病睫状神经营养因子
