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湖南省医药卫生科研计划课题(B2006-108)
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相关作者:
董昕
吴洁
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2009
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PPARγ基因真核表达载体的构建及其在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达
2009年
目的:构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组表达质粒pEGFP-C1-PPARγ,观察小鼠PPARγ基因在MDA-MB-231细胞中的表达及定位。方法:采用克隆和亚克隆技术构建小鼠PPARγ基因真核表达载体,脂质体Lip2000介导转染MDA-MB-231细胞,real-time PCR和western-blot验证其mRNA和蛋白的表达,荧光显微镜观察该基因亚细胞定位。结果:酶切和测序结果证实重组质粒含有PPARγ编码区序列且插入方向正确,转染后观察该基因亚细胞定位于胞核,胞质有弥散分布。结论:成功构建了小鼠PPARγ基因真核表达载体,该基因在MDA-MB-231细胞中成功表达,PPARγ基因主要集中表达于胞核。
董昕
钟警
周灵芝
吴洁
姜浩
关键词:
PPARΓ基因
真核表达载体
转染
亚细胞定位
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