江苏省自然科学基金(BK2006058)
- 作品数：27 被引量：52H指数：4
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- Cortactin表达水平与结直肠癌细胞分裂状态及临床病理关系的研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨cortactin在结直肠癌组织、癌前病变（腺瘤性息肉）、癌旁正常组织中的表达及其意义，结直肠癌细胞cortactin表达水平与细胞分裂状态的关系。方法采用免疫组织化学方法，检测cortactin在结直肠癌组织、癌前病变（腺瘤性息肉）、癌旁正常组织中的表达。用Kaplan—Meier法比较cortactin不表达或者低表达患者组与高表达患者组5年生存率。分析cortactin在结直肠癌组织中的表达与临床病理参数的关系。FISH技术观察cortactin编码基因CTTN在结直肠组织中的扩增。体外合成cortactinsiRNA后转染结直肠癌细胞株SW620，用Westernblot和免疫荧光观察转染后cortactin表达量的变化及细胞分裂状态。结果Cortactin在结直肠癌组织中的表达明显高于腺瘤性息肉和癌旁结直肠正常组织。在结直肠癌组织中cortactin表达增高与结直肠癌不良分化（P〈0．01）、有淋巴结转移（P=0．006）、TNM分期（P=0．022）相关。Cortactin阴性表达或者低表达组结直肠癌患者术后5年生存率明显高于cortactin高表达组。结直肠癌组织中cortactin编码基因CTTN扩增明显，结肠腺瘤与癌旁正常组织中未见扩增。导入cortactinsiRNA的结直肠癌细胞cortactin蛋白表达下降。结论Cortactin异常表达可能与结直肠癌的生长、侵袭及转移有关。
- 黄俊杰梅广林胡卫东吴寒刘贵远时雪亮朱建伟
- 关键词：结直肠肿瘤细胞分裂RNA干扰
- 癌基因CTTN编码蛋白Cortactin与大肠癌细胞内吞作用的关系被引量：3
- 2011年
- 目的分析Cortactin分子与大肠癌细胞内吞作用的关系，了解癌组织高表达Cortactin的内在意义。方法采用免疫组化和蛋白印迹检测大肠癌组织、癌旁组织及大肠癌细胞系中Cortactin表达水平；采用小干扰RNA抑制癌细胞Cortactin表达，并构建Cortactin不同功能区缺失突变体，检测各种癌细胞Tfn内吞作用的变化；采用免疫荧光化学方法分析Cortactin与癌细胞内吞作用路径的关系。结果大肠癌组织Cortactin表达高于癌旁组织，表达率分别为77．5％及47．5％（P〈0．05）。siRNA处理的癌细胞Tfn摄取值为0．61±0．02，对照为1．01±0．16（P〈0．05）。高表达Cortactin的大肠癌细胞为实现正常的内吞作用，需要足够数量和结构完整的Cortactin蛋白；Cortactin参与内吞物质的胞内运输过程。结论大肠癌细胞的内吞作用依赖Cortactin分子功能的发挥，高表达Cortactin有利于大肠癌细胞基于内吞作用的信号传导、侵袭和转移。
- 朱建伟马利林黄宝玉刘培根汝凯曹翔钱飞
- 关键词：结肠肿瘤内吞作用
- 基于高斯扰动量子粒子群优化的图像分割算法被引量：4
- 2011年
- 研究图像提取问题,在处理由不同种类纹理区域组成的彩色图像时,针对克服量子粒子群优化(QPSO)聚类算法由于早熟现象导致图像分割过程中难以计算出精确纹理区域,为了能准确提取图像目标和提高精度,提出了基于高斯扰动的量子粒子群优化(GQPSO)的新型聚类算法。受益于高斯扰动,GQPSO改善了QPSO固有的多样性下降和陷入局部早熟的问题,而快速逼近全局最优解。对Berkeley Segmentation数据库中的6幅图像的分割实验结果表明,相比于PSO和QPSO,GQP-SO的聚类效果和性能均有明显改善。
- 颜惠琴吴锡生
- 关键词：量子粒子群优化算法聚类图像分割
- Abelson相关基因在大肠癌中的表达及其临床意义
- 2011年
- 目的探讨Abelson相关基因(Arg)在人大肠癌组织中的表达及其意义。方法免疫组织化学染色法检测80例大肠癌组织、30例癌旁大肠组织和30例大肠腺瘤中Arg的表达,并分析Arg表达水平与临床病理特征的相关性。结果 Arg在大肠癌组织中阳性表达率为70%,癌旁结肠组织和大肠腺瘤组织均无Arg表达。Arg表达与大肠癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及癌胚抗原(CEA)水平有关(P<0.05),Arg高表达者生存期低(P<0.05)。结论 Arg可能在大肠癌发病过程中起重要作用,可作为大肠癌预后判断的有价值指标之一。
- 许波涛顾晓华毛勤生朱建伟
- 关键词：大肠癌
- 皮层蛋白受磷酸化调控机制的荧光共振能量转移分析被引量：1
- 2009年
- 皮层蛋白(cortactin)是一种癌基因蛋白,是酪氨酸磷酸化激酶Src的作用底物,到目前为止,皮层蛋白受磷酸化调控的机制还不清楚。本研究用荧光共振能量转移(FRET)分析皮层蛋白受磷酸化调控后的蛋白质结构变化,推测皮层蛋白受磷酸化调控的可能机制。采用蓝绿色荧光蛋白(CFP)和黄色荧光蛋白(YFP)作为配对,设计和构建基于皮层蛋白羧基端SH3功能的蛋白质传感器,转染NIH/3T3细胞,将细胞以过钒酸盐(PV)和PP2处理,人为诱导或抑制细胞蛋白磷酸化,比较皮层蛋白的磷酸化和非磷酸化状态FRET的不同;进一步观察皮层蛋白磷酸化位点突变后FRET的变化,以此判断皮层蛋白的磷酸化作用后结构的变化。所设计的生物传感器供体和受体工作良好。FRET分析显示,在PP2处理后,FRET能量变化明显较对照组增高,但用PV处理后,FRET下降。皮层蛋白的磷酸化位点突变后,产生的FRET明显较野生型皮层蛋白产生的FRET为弱。因此推测,皮层蛋白在磷酸化后其分子结构处于"展开"状态,并可能以此增强和其他细胞蛋白的相互作用。
- 朱建伟陆毅祥马利林黄宝玉刘培根詹熙
- 关键词：磷酸化蛋白质结构
- 靶向抑制皮层肌动蛋白装配对大肠癌细胞侵袭作用的影响被引量：4
- 2009年
- 目的构建能够靶向抑制细胞皮层蛋白装配的重组质粒，观察其对于肿瘤细胞侵袭作用的影响。方法构建重组质粒EGFP／N2／Repeat，将其和空载体质粒转染人人大肠癌细胞LoVo和HCT-8，分别扩增培养，绘制生长曲线，通过boyden小室模型观察大肠癌细胞侵袭性的改变。结果实验获得与预期一致的DNA特异性片段，经双酶切和测序证实目的片段正确的与载体质粒连接，重组质粒经过双酶切证实构建成功。显微镜下观察重组质粒成功转染人大肠癌细胞，细胞生长曲线提示转染与未转染该基因的细胞生长曲线相同；行细胞侵袭力实验，含有EGFP／N2／Repeat的癌细胞、空质粒转染细胞和对照组细胞（未转染）穿膜数分别为LoVo组：35．27±6．70、85．47±5．50、87．47±6．39；HCT-8组：15．07±2．34、26．73±4．43、26．07±3．67，含有拮抗分子的细胞穿膜数较其余两组明显减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论通过抑制皮层肌动蛋白装配可抑制大肠癌细胞的侵袭性。
- 丛纲徐关荣朱建伟周绍荣
- 关键词：大肠肿瘤基因转染
- MTSS1在大肠良恶性组织中的表达及其意义被引量：9
- 2010年
- 目的探讨MTSS1(metastasis suppressor1)在大肠癌组织、癌前病变(腺瘤性息肉)、正常组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学检测MTSS1在大肠癌组织、癌前病变(腺瘤性息肉)、正常组织中的表达,并用单因素分析法研究其与临床病理因素的关系。结果 MTSS1表达阳性率大肠癌组织比正常组织高,差异有统计学意义(P<0.05);大肠癌组织比癌前病变(腺瘤性息肉)高,差异有统计学意义(P<0.05);转移性比局限性大肠癌高,差异有统计学意义(P<0.05)。MTSS1在大肠癌中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期无关(P>0.05)。正常组织与癌前病变(腺瘤性息肉)的MTSS1表达阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MTSS1异常表达可能与大肠癌发生侵袭转移有关,可为临床治疗提供新的靶点。
- 王鼎徐美荣朱建伟
- 关键词：肠肿瘤免疫组织化学肿瘤侵润肿瘤转移
- 人类皮层肌动蛋白基因siRNA干预结肠癌细胞侵袭能力的研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨通过慢病毒载体介导的人类皮层肌动蛋白基因（EMS1）siRNA沉默皮层肌动蛋白（Cortactin）的表达对结肠癌细胞侵袭能力的影响。方法构建针对Cortactin的编码基因EMS1的siRNA慢病毒载体转染结肠癌细胞HCT8，分为3组：EMS1-siRNA转染组、空载体组，以及未转染组。Western blot检测3组Cortactin蛋白的表达：采用Transwell小室．观察3组癌细胞的侵袭能力的变化。取4～6周龄的裸鼠共30只，随机分成3组。每组10只。通过尾静脉分别注射上述3种细胞，6周后处死并观察这3组动物的肺转移灶形成情况。结果EMS1-siRNA转染细胞的Cortactin表达以及其侵袭能力较另外两组细胞明显降低（P〈0．05）。转染组、空载体组和未转染组裸鼠的肺转移率分别为20％、80％和80％，转染组肺转移率明显下降（P〈0．05）。结论Cortactin的表达减少可以降低结肠癌细胞的侵袭能力．并能降低肿瘤在动物体内器官转移的能力。
- 邱烽朱建伟马利林
- 关键词：结直肠肿瘤RNA干扰慢病毒载体
- 靶向干预N-WASP蛋白的ARP2/3结合功能区对抗大肠癌细胞侵袭转移的研究
- 2009年
- 背景与目的大肠癌等恶性肿瘤的侵袭和转移是一个多步骤的复杂过程,一般包括癌细胞的局部增殖和扩展、分离和脱落、肿瘤组织新生血管形成、癌细胞进入循环、癌细胞降解脉管基膜逸出循环及随后的定位生长等。然而，这一系列复杂步骤都离不开癌细胞自身的运动能力，其中的一个显著特点是癌细胞膜形成一种具有侵袭作用的突出。这一种具有侵袭性的胞膜突出在国际文献上称为Invadopodia，是一种特殊的细胞伪足，这种特殊伪足的形成依赖于细胞膜下的肌动蛋白的装配（Actinassembly），即肌动蛋白由蛋白单体（G—actin）形式聚合成肌动蛋白丝（F—actin）多聚体，这一过程依靠蛋白复合物-ARP2／3复合物的催化作用。
- 朱建伟马利林黄宝玉刘培根赵任
- 关键词：N-WASP大肠癌
- 人结直肠癌干细胞休眠与增殖阶段细胞形态学的研究被引量：2
- 2014年
- 目的初步研究人结直肠癌干细胞休眠与增殖阶段细胞形态的变化。方法流式细胞仪从新鲜人结直肠癌组织中分选EpCAMhigh／CD44＋／CD133＋细胞亚群，并通过裸鼠（NOD／SCID）成瘤实验鉴定其干细胞特性：采用三维培养，WST．1绘制人结直肠癌干细胞的生长曲线；流式细胞仪测定P27及Ki一67的表达水平，区分人结直肠癌干细胞休眠和增殖时相；细胞免疫荧光显示休眠期与增殖期人结直肠癌干细胞形态的变化。结果EpCAMhigh／CD44＋／CDl33‘细胞亚群在人结直肠癌组织中占1．6％．经NOD／SCID成瘤实验证实为人结直肠癌干细胞。人结直肠癌干细胞生长曲线呈“S”型；前3d生长缓慢，细胞为静止阶段（休眠期），P27表达水平逐渐增加，Ki．67表达偏低；从第4d开始，细胞进入增殖期，Ki-67表达逐渐增加，P27表达降低。细胞免疫荧光染色显示：休眠期人结直肠癌干细胞圆而大，伪足少；而增殖期细胞伪足增多，呈现增殖和侵袭的状态。结论肿瘤的复发、转移可能与肿瘤干细胞的生长状态发生改变有一定关系；人结直肠癌干细胞增殖期与休眠期相比。呈现出明显增殖和侵袭能力：这为治疗人结直肠癌及其他肿瘤的复发和转移提供了新的切人点。
- 刘贵远于嘉伟钱飞黄俊杰汤志杰王冶铭朱建伟
- 关键词：结直肠肿瘤肿瘤干细胞休眠增殖
