国家自然科学基金(31001080)
- 作品数：7 被引量：60H指数：5
- 相关作者：冯志新邵国青刘茂军熊祺琰吴叙苏更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院河北远征药业有限公司石家庄市动物卫生监督所更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪肺炎支原体的分离方法被引量：17
- 2012年
- 为了寻求分离猪肺炎支原体更好的方法,本试验采用剪碎法、研磨法、匀浆法和灌洗法对猪肺组织进行处理,并研究了不同肺脏组织处理方法对猪肺炎支原体活力的影响。结果显示,剪碎法与灌洗法获得的处理液对猪肺炎支原体的影响小于研磨法与匀浆法。采用剪碎法、灌洗法和研磨法对100份猪肺组织进行猪肺炎支原体野毒株分离的结果显示,经PCR鉴定,剪碎法分离到1株猪肺炎支原体,分离率为1%;研磨法分离到7株猪肺炎支原体,分离率为7%;灌洗法分离到2株猪肺炎支原体,分离率为2%。以上结果表明,研磨法获得的组织处理液对支原体活力有一定的影响,但其分离率好于剪碎法和灌洗法。因此,研磨法是一种较好的猪肺炎支原体分离方法。
- 韦艳娜白昀孔猛冯志新刘茂军熊祺琰白方方吴叙苏邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体
- 猪肺炎支原体DnaK蛋白质单抗的制备与鉴定被引量：1
- 2012年
- 为了获得针对猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)DnaK蛋白质的单克隆抗体,利用Mhp全菌抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备Mhp DnaK蛋白质的单抗。获得了3株可稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3A8、3E2及5D10。3株单抗的Ig重链均为IgG1,轻链均为κ链。Western Blot分析结果显示,3A8与猪鼻支原体和Mhp均有反应,3E2和5D10只与Mhp反应,同时3E2和5D10能与Mhp 168株105代、J株、临床分离株XLW-1、XLW-2、XLW-3、XLW-4、AH、WX产生特异性反应。采用间接ELISA测得3株单抗腹水与DnaK重组蛋白质及Mhp 168全菌蛋白质反应效价均为1∶1 000 000。单抗3A8为针对Mhp和猪鼻支原体(Mycoplasmahyorhinitis,Mhr)共同抗原表位的单抗;3E2和5D10为猪肺炎支原体特异性抗体,且抗体效价高。
- 缪芬芳王海燕白昀刘茂军冯志新熊祺琰白方方邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体单克隆抗体
- 猪初乳中SIgA纯化及其单抗制备被引量：6
- 2011年
- 为制备猪SIgA的特异性单克隆抗体,该研究采用饱和硫酸铵盐析法从猪初乳中提取猪SIgA蛋白,分别经Sephadex G-200凝胶层析、DEAE52纤维柱离子层析及Protein A柱亲合层析纯化。以纯化的猪SIgA蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备抗猪SIgA的单克隆抗体。结果显示:已获得6株特异的抗猪SIgA的单克隆抗体,分别命名为2D9E6、2D9E9、3E1G2、3E1H5、4H5B7和4H5B10,6株单抗均为IgG1,κ型。将其中1株2D9E6制备腹水,经纯化后ELISA效价可达1∶81 000以上。表明以猪SIgA天然蛋白为免疫原,成功制备了6株高特异性的单克隆抗体,可为猪黏膜免疫研究提供基础材料。
- 冯志新王海燕刘茂军甘源吴叙苏邵国青
- 关键词：纯化单克隆抗体
- 泰地罗新研究进展被引量：24
- 2012年
- 概述了泰地罗新的理化性质、作用机理、抗菌活性、药动学、药效学、不良反应及残留,以期为该药在兽医临床的应用提供参考资料。泰地罗新是动物专用的新型大环内酯类抗生素,其吸收快,达峰时间短,生物利用度高,肺组织浓度高,消除半衰期长,药效持久。单次肌注或皮下注射给药,即能提供全程治疗,在兽医临床具有广阔的应用前景。
- 李伟岭杨芳于振梅岳永波
- 关键词：药动学药效学抗菌活性
- 猪肺炎支原体显色原位杂交研究方法的建立被引量：6
- 2012年
- 为建立猪肺炎支原体(Mhp)显色原位杂交(CISH)定位检测方法,本研究利用地高辛标记的Mhp P36核酸探针和DAB/H2O2显色系统,对人工Mhp感染组、自然感染组和健康对照组的实验猪肺组织样品和临床样品进行显色原位杂交检测。结果显示,设计的地高辛标记探针针对Mhp具有特异性,而与其他的猪病原菌无交叉反应;检测结果可以通过显微镜观测到Mhp定位在支气管/细支气管黏膜表面。人工感染组、自然感染组和健康对照组的CISH结果与PCR检测结果一致,临床样品的CISH检测结果低于PCR检测结果。本研究建立的Mhp显色原位杂交法是一种集直观和敏感为一体的检测方法,可以用于Mhp的定位检测和致病机理研究。
- 王占伟熊褀琰刘茂军冯志新白方方邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体显色原位杂交斑点杂交
- 不同因素对猪肺炎支原体颜色变化单位测定的影响被引量：8
- 2012年
- 为摸清猪肺炎支原体的颜色变化单位(CCU)测定是否受试验相关因素的影响,通过不同培养体系、不同种类的容器、不同的稀释方法测定猪肺炎支原体的CCU,观察培养基的变色情况,最终通过测定各组猪肺炎支原体的CCU来分析不同因素对猪肺炎支原体培养滴度的影响。结果显示,利用不同培养体系、不同容器及不同的稀释方法测定猪肺炎支原体的CCU,其结果差异均不显著(P>0.05)。该研究可为今后支原体的CCU测定提供参考。
- 韦艳娜熊祺琰刘茂军冯志新吴叙苏杨莉莉邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体
- 猪肺炎支原体量子点荧光原位杂交研究方法的建立与应用被引量：1
- 2012年
- 利用生物素化的猪肺炎支原体核酸探针和量子点荧光显色系统,对人工感染组、自然感染组和健康对照组的试验猪肺样品,以及临床样品进行量子点荧光原位杂交检测。结果表明:按照探针质量浓度为1 mg/L、80～90℃变性10 min、37℃杂交10 h和QDs-SA复合物浓度为10 nmol/L的条件进行猪肺炎支原体的量子点荧光原位杂交检测结果比较理想;而人工感染组、自然感染组和健康对照组样品的QD-FISH检测结果与分离培养结果和PCR检测结果相比,符合率均达到100%;临床样品的QD-FISH检测结果与PCR检测结果相比,符合率为83.3%。从而证明猪肺炎支原体量子点荧光原位杂交法是一种直观和敏感的检测方法,可以用于猪肺炎支原体的检测、定位和致病机理研究,也为其他病原的研究提供了参考方法。
- 王占伟熊祺琰冯志新刘茂军路璐范志鹏邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体量子点斑点杂交
