国家自然科学基金(31001096)
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
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- 饲养层密度对兔类ES细胞分离培养的影响被引量：1
- 2013年
- 探讨饲养层细胞接种密度对兔类ES细胞分离培养影响,筛选适合兔类ES细胞分离培养最适饲养层密度。将兔囊胚分别接种到密度为10×103、20×103和40×103个·cm-2的小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonicfibroblast cell,MEF)饲养层上,观察兔类ES细胞贴壁和克隆生长情况,并对所得兔类ES细胞进行碱性磷酸酶和Oct-4检测。结果表明,接种于密度为20×103个·cm-2饲养层上的囊胚贴壁率(82.5%)、内细胞团(Inner cellmass,ICM)形成率(67.5%)高于接种于密度为40×103个·cm-2的饲养层上囊胚贴壁率(80.0%)、内细胞团(Innercell mass,ICM)形成率(65.7%),差异不显著(P>0.05);显著高于(P<0.05)接种于密度为10×103个·cm-2饲养层上的囊胚贴壁率(55.6%)、ICM形成率(44.4%)。密度为20×103个·cm-2饲养层上的兔类ES细胞F1、F2代细胞克隆率均显著高于其他两组(P<0.05),最高已传至20代;获得的兔类ES细胞经碱性磷酸酶染色及表面抗原Oct-4表达检测均呈阳性。密度为20×103个·cm-2的MEF饲养层可更好支持兔类ES细胞体外培养。
- 李小佳张君涛徐秋勤王鸽曹书郡王新庄张志平
- 关键词：成纤维细胞
- 红细胞裂解法及不同培养条件对兔骨髓间充质干细胞体外增殖的影响被引量：5
- 2012年
- 研究采用红细胞裂解液法从兔骨髓中分离BMSCs,相差显微镜观察其形态,四甲基偶氮唑盐法(MTT法)筛选基础培养液和血清浓度,绘制生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学鉴定表面抗原。分离的细胞在形态学观察与生长动力学上均符合BMSCs特征;在实验范围内DMEM/F12+20%FBS是体外培养兔BMSCs的最佳体系;细胞周期结果显示,BMSCs平均82%处于G0/G1期,18%处于S+G2期;免疫细胞化学结果显示所分离的BMSCsCD90、CD44阳性表达,CD34阴性表达。本研究结果表明,通过红细胞裂解液法分离的兔BMSCs,其具有体外增殖和多向分化的潜能,可以作为组织工程的种子细胞。
- 吕婧玉和小娥张志平许晓婷冯建昆王新庄
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 不同激活剂对兔卵母细胞孤雌激活效果的研究
- 2014年
- 目的：探寻一种稳定有效的卵母细胞激活方法,为兔体细胞核移植提供实验基础。方法：兔超排后获得卵母细胞体外成熟22-24 h,经脱颗粒处理后采用不同激活剂和不同处理时间进行激活,体外培养5-7 d,观察胚胎发育与囊胚形成情况。结果：卵母细胞经过离子霉素作用5 min或者乙醇作用7 min均能被激活,但两者卵裂率、囊胚率都较低;乙醇和离子霉素分别与6-DMAP联合激活兔卵母细胞时,离子霉素＋6-DMAP处理组卵裂率（73.7%）显著高于乙醇＋6-DMAP处理组（38.5%,P〈0.05）;与离子霉素联合激活时,2.0 mmol/L的6-DMAP处理5.0 h时的卵裂率和囊胚率最高,达75.6%和45.5%。结论：激活方法对兔卵母细胞孤雌激活率的影响很大,不同激活剂的联合应用及激活剂的作用时间对兔卵母细胞的激活存在显著差异。
- 王鸽张君涛张胜军魏莉莉曹书郡徐秋勤柳文龙刘童张志平
- 关键词：孤雌激活乙醇
- 羊孕酮阴道栓法同期发情技术的研究进展被引量：8
- 2016年
- 羊同期发情技术是提高羊繁殖效率和生产经济效益的关键技术,文章综述了关于羊孕酮阴道栓法同期发情技术中孕酮缓释载体的种类、阴道栓内孕酮的种类、阴道栓放置时间、辅助激素等技术要点的运用情况,总结了各技术要点,尤其是阴道栓放置时间和辅助激素的使用对同期发情效果的影响,为以后羊同期发情试验方案的设计与开展提供数据与理论支持。
- 张胜军张君涛李小燕魏莉莉张志平
- 关键词：同期发情孕酮阴道栓
