海南省自然科学基金(30216)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- QY1骨髓多能间质干细胞系多向分化潜能的检测被引量：1
- 2007年
- 目的:检测QY1骨髓间质干细胞系在体外向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞和神经细胞分化的能力。方法:选用第5代QY1骨髓间质干细胞系,分别用成脂培养基、成软骨培养基、成骨培养基、5?氮胞苷、血管内皮生长因子、神经细胞培养液(诱导液1为10mmol/Lβ-巯基乙醇;诱导液2为2%二甲基亚砜和10-8mol/L地塞米松)对其进行定向诱导分化。采用染色法、免疫组化法、RT-PCR法鉴定分化后的细胞。结果:在成脂培养基培养21d左右出现大量含脂滴的脂肪细胞,苏丹III染色法检测脂肪细胞胞浆呈桔红色。在成软骨培养基培养21d左右有软骨结节形成,阿尔新蓝染色法将软骨结节染为深蓝色。在成骨培养基培养35d左右有凸出的骨结节形成,VonKossa染色法显示有黑色矿化结节形成。在10μmol/L5?氮胞苷诱导液中能出现自发性搏动的心肌细胞和肌管样结构,免疫组化法显示心肌特异性的表面抗体α-横纹肌肌动蛋白、心肌连接蛋白-43表达阳性,RT-PCR法检测有心肌特异性因子α-肌球蛋白重链表达。在含有50ng/mL血管内皮生长因子的诱导液中能出现呈直线排列的血管内皮细胞和血管内皮细胞网状结构,免疫组化法显示血管内皮特异性表面抗体CD31和VIII因子表达阳性。神经诱导液1处理组出现神经元,免疫组化法显示胶质纤维酸性蛋白表达阴性,神经元特异性核蛋白表达阳性;神经诱导液2处理组出现神经胶质细胞,免疫组化法显示胶质纤维酸性蛋白表达阳性,神经元特异性核蛋白表达阴性。结论:本研究证实QY1骨髓间质干细胞系细胞具有分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞、神经元和神经胶质细胞的潜能,提示QY1骨髓间质干细胞系具有向多个胚层、7个方向分化的多向潜能。
- 杨晶谢祁阳张翼向红霞郭赞
- 关键词：多向分化脂肪细胞软骨细胞成骨细胞神经胶质细胞
- QY1骨髓多能间质干细胞系向心肌细胞和血管内皮细胞分化被引量：3
- 2007年
- 目的:探索QY1骨髓多能间质干细胞系在体外向心肌细胞、血管内皮细胞分化的能力;优化骨髓多能间质干细胞向心肌细胞分化的体外适宜诱导条件;并初步探讨骨髓间质干细胞向成心肌成血管细胞分化的能力。方法:分别用5-氮胞苷、血管内皮生长因子对QY1骨髓多能间质干细胞进行定向诱导分化。利用免疫组化、RT-PCR鉴定分化后的细胞。结果:在传代培养至72h时,加入10μmol/L5-氮胞苷诱导24h后换液培养,以后每7d换液1次,培养14d进行再次诱导的条件下,细胞能出现自发性搏动的心肌细胞和肌管样结构,诱导率达(39.47±0.56)%。心肌特异性的表面抗体α-横纹肌肌动蛋白、心肌连接蛋白-43表达阳性,RT-PCR检测有心肌特异性因子α-肌球蛋白重链表达。在用血管内皮生长因子诱导48h后,出现呈直线排列的血管内皮细胞;7d后,有部分区域细胞相互连接呈血管内皮细胞网状;14d时免疫组化检测,发现诱导后的细胞血管内皮特异性表面抗体CD31和VIII因子表达阳性。结论:QY1骨髓多能间质干细胞系细胞在体外特定条件下具有分化为心肌细胞和血管内皮细胞的能力。
- 杨晶谢祁阳向红霞
- 关键词：分化血管内皮细胞
- 卵黄囊干细胞向粒-单系造血祖细胞的定向诱导分化被引量：2
- 2004年
- 目的 :观察卵黄囊干细胞向粒 单系造血祖细胞 (CFU GM )的定向诱导分化 ,稳定和优化检测卵黄囊CFU GM的方法。方法 :应用体外琼脂培养法 ,观察多种因素对小鼠卵黄囊干细胞形成粒 单系造血祖细胞集落形成单位的影响 ;应用染色压片法对所生成的集落性质作鉴定。结果 :植入不同数量的E7.5～ 8.5d的卵黄囊干细胞与CFU GM生成数量之间呈高度正相关 ;在接种相同数量的卵黄囊细胞数的情况下 ,DMEM培养体系生成的CFU GM数明显多于IMDM培养体系生成的集落数 (P <0 .0 1 ) ;马血清 (HS)组优于胎牛血清 (FBS)组 (P <0 .0 1 ) ;与GM CSF相比 ,WEHI 3条件培养液 (W3 CM)能明显促进卵黄囊CFU GM的生成 (P <0 .0 1 )。采用完整琼脂凝块压片法对卵黄囊细胞所形成的集落进行鉴定表明为粒 单系细胞集落。结论 :卵黄囊干细胞具有向CFU GM分化的能力 ;卵黄囊干细胞CFU GM诱导体系中各组分变化均可影响CFU GM的集落生成率 ;以DMEM ,GM CSF或W 3 CM ,HS为组分的体系可稳定地检测卵黄囊细胞CFU
- 秘祖霞谢祁阳
- 关键词：CFU-GM卵黄囊干细胞定向诱导分化DMEM条件培养液
