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国家自然科学基金(81101895)

作品数:5 被引量:2H指数:1
相关作者:杨涛杨利军赵海霞郑海锋王少华更多>>
相关机构:山西医科大学教育部首都儿科研究所更多>>
发文基金:山西省高等学校优秀青年学术带头人支持计划项目国家自然科学基金山西省自然科学基金更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇凋亡
  • 2篇整合素
  • 2篇肿瘤坏死因子
  • 2篇坏死因子
  • 2篇基因
  • 2篇基因表达
  • 2篇RGD序列
  • 1篇单链
  • 1篇单链抗体
  • 1篇凋亡诱导
  • 1篇凋亡诱导配体
  • 1篇毒理
  • 1篇毒理学
  • 1篇血栓
  • 1篇血小板
  • 1篇增殖
  • 1篇整合素ΑVΒ...
  • 1篇生物学
  • 1篇生物学活性
  • 1篇受体

机构

  • 5篇山西医科大学
  • 2篇教育部
  • 1篇首都儿科研究...

作者

  • 5篇杨利军
  • 5篇杨涛
  • 2篇张栋
  • 2篇赵海霞
  • 2篇王少华
  • 2篇郑海锋
  • 1篇孙栋栋
  • 1篇刘海桃
  • 1篇牛勃
  • 1篇王惠珍
  • 1篇王宇涛

传媒

  • 4篇中国生物制品...
  • 1篇中国生化药物...

年份

  • 2篇2015
  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2011
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
RWR通过与血小板表面整合素α_(Ⅱb)β_3受体作用对血栓形成的影响被引量:2
2013年
目的探讨含RGD(Arg-Gly-Asp)序列的RWR小肽通过与血小板表面整合素αⅡbβ(3GPⅡb/Ⅲ)a结合,对血小板聚集抑制率、血栓重量、血管组织结构的影响。方法取10名无心脑血管疾病的健康志愿者的全血,分离富含血小板的血浆(platelet-rich plasma,PRP),采用血小板聚集仪检测不同剂量(6.25、12.5、25、50、100、200μmol/L)RWR对二磷酸腺苷二钠(ADPNa2)诱导的血小板聚集抑制率的影响;分别用0.3、0.6、1.2mg/kgRWR作用家兔及0.6、1.2、2.4 mg/kg RWR作用大鼠,建立兔动静脉旁路循环血栓模型和大鼠三氯化铁血栓模型,观察血栓重量的变化和血管组织结构的变化。结果随着RWR剂量增加,血小板最大聚集率降低,血小板聚集抑制率增加,RWR对血小板聚集抑制率的半数有效抑制浓度(IC50)为16.0μmol/L。随着RWR剂量的增加,血栓重量减少,血栓形成的抑制率增加,血管腔堵塞程度减弱,血管腔内孔隙增加。结论 RWR小肽通过与血小板表面整合素αⅡbβ(3GPⅡb/Ⅲ)a受体结合,抑制血小板聚集和抗血栓。
赵海霞杨涛杨利军
关键词:RGD序列血栓
抗栓小肽RWR的毒理学试验研究
2015年
目的对具有自主知识产权的抗栓小肽RWR进行毒理学研究和安全性评价。方法分别对RWR进行小鼠急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核形成试验、小鼠精子畸形试验和大鼠30d喂养试验。结果急性毒性试验动物经腹腔注射MTD大于120mg/kg;骨髓细胞微核试验、精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验对大鼠体质量、食物利用率、脏器系数、血生化等各项指标均未见不良影响。病理组织学观察肺、肝、脾、肾、心脏均未见明显与注射样品有关的组织学病理改变。结论在本试验条件下,RWR对动物的生长发育、造血功能、肝肾功能、器官组织均无明显毒性作用。
郑海锋赵海霞王少华杨涛杨利军
关键词:毒理学安全性
ERC(N^5)多肽识别整合素α_vβ_3的特异性及其对HepG2细胞增殖与凋亡的影响
2012年
目的分析含RGD序列的多肽ERC(N5)与整合素αVβ3结合的能力,并探讨其对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响。方法利用流式细胞术检测HepG2细胞表面整合素αVβ3的含量以及ERC(N5)与FITC-αVβ3抗体LM609竞争结合HepG2细胞的情况;用ERC(N5)处理HepG2细胞,CCK-8法检测细胞增殖活力,光学显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术分析细胞凋亡率。结果 HepG2细胞表面αVβ3的含量为47.0%;浓度为8、16、32和64μmol/L的ERC(N5)均能抑制LM609与HepG2细胞的结合及细胞的增殖活力,且呈剂量依赖性(P<0.05);与对照组相比,经16μmol/L ERC(N5)处理的细胞可见形态发生明显改变,细胞凋亡率明显升高。结论 ERC(N5)可特异结合整合素αVβ3,并通过抑制αVβ3的作用来抑制肝癌HepG2细胞增殖,并诱导细胞凋亡。
刘海桃孙栋栋杨利军张栋杨涛
关键词:RGD序列整合素ΑVΒ3细胞增殖
抗肿瘤坏死因子-α单链抗体在大肠杆菌中的表达及表达条件的优化
2011年
目的构建抗肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)单链抗体(Single chain fragment variable,scFv)的原核高效表达体系,并优化表达条件。方法在引物中添加编码6×His的核苷酸片段,使目的蛋白C-末端带有6×His标签。从质粒pCANTAB 5E-scFv中PCR扩增scFv基因,连接至pBV220载体,连接产物分别转化至E.coli BL21(DE3)和DH5α中,42℃诱导表达,并对诱导时间、培养基pH值和类型进行优化,Western blot分析表达产物的反应原性。结果 PCR扩增出的scFv基因片段长度约770 bp,且序列正确;重组表达质粒pBV220-scFv经酶切鉴定证明构建正确;在E.coli BL21(DE3)中可获得表达,在E.coli DH5α中不表达;表达的重组scFv相对分子质量约为28 000,以包涵体形式存在于胞浆中,表达量约占菌体总蛋白的15%,且可与抗His-Tag抗体发生特异性反应;工程菌的最佳诱导表达条件为:以E.coli BL21(DE3)为宿主菌,在pH 7.4的LB培养基中,42℃诱导5 h。结论将scFv的表达载体更换为pBV220,可提高scFv的表达量,在优化表达条件下,scFv的表达水平进一步提高。
杨利军张栋王惠珍牛勃杨涛
关键词:单链抗体肿瘤坏死因子-Α大肠杆菌基因表达
可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在E.coil中的表达、纯化及其生物学活性
2015年
目的表达纯化可溶性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosisinducing ligand,TRAIL)蛋白,并测定其生物学活性。方法利用E.coli中表达C-端带有6×His标签的可溶性TRAIL蛋白,并优化诱导时间(4、6和8 h)和诱导剂IPTG的浓度(0.06、0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)。表达产物经Ni亲和层析和离子交换层析纯化后,采用MTT法测定不同浓度TRAIL(终浓度分别为100、200、400 ng/ml)的活性,并检测亲和层析过程中两种洗脱方式(洗脱液4℃留柱过夜后进行洗脱和洗脱液进柱后直接收集流出液)及纯化过程中两次透析的时间(均为24和48 h)对TRAIL活性的影响。结果最佳诱导时间为6 h,最佳IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L。表达产物的表达量占菌体总蛋白的20%,相对分子质量为20 000,可与兔抗人TRAIL单克隆抗体发生特异性结合。TRAIL终浓度为100、200和400 ng/ml的实验组的抑制率分别约为36%、53%和73%。亲和层析的两种洗脱方式的TRAIL活性差异无统计学意义(P>0.05),透析48 h比透析24 h获得的TRAIL活性显著降低(P<0.05)。结论 TRAIL蛋白成功在E.coli中表达,具有抑制肿瘤细胞生长的作用,优化后的TRAIL诱导条件和纯化方法可进一步大量生产高TRAIL蛋白的活性,满足了TRAIL的基础及临床相关研究的要求。
王少华郑海锋王宇涛杨利军杨涛
关键词:可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体大肠埃希菌基因表达纯化生物学活性
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