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国家自然科学基金(31001114): 作品数：8 被引量：70H指数：6; 相关作者：刘臻鲁双庆肖调义王赏初周玲更多>>; 相关机构：长沙学院湖南农业大学河南师范大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金湖南省研究生创新基金湖南省科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

青鱼生长激素在毕赤酵母中的表达被引量：4: 2011年; 根据GenBank数据库中登记的青鱼(Mylopharyngodon picens)生长激素(bcGH)基因序列(AF389238)设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增青鱼生长激素cDNA编码区,并通过定向插入含强启动子AOX I的表达载体pPIC3.5k、电击转入毕赤酵母GS115菌株、G418多克隆子筛选和测序验证等步骤进行了重组生长激素酵母菌诱导表达等相关实验,成功获得重组生长激素酵母菌(pPIC3.5k-bcGH重组酵母菌)。蛋白表达产物经SDS-PAGE和ELISA检测,在23 kD处发现一条与预期蛋白分子量大小一致的特异性条带,并且目的蛋白能与青鱼生长激素多克隆抗体特异性结合,说明bcGH在酵母胞内得到正确表达。表达条件优化过程中发现,诱导24 h已有重组蛋白表达,pH值4.5～7.0之间都能表达重组蛋白。在pH值6.5、0.5%甲醇、温度30℃和培养时间72 h的优化条件下,目的蛋白的表达量高达893 mg/L。; 谢帝芝刘臻王赏初张建设肖调义鲁双庆; 关键词：生长激素毕赤酵母

草鱼PepT1基因的表达与抗体制备: 为在蛋白水平上研究草鱼小肽转运载体1(Oligopeptide transporter 1,PepT1)转运寡肽的作用机制,本实验利用实验室已获得的草鱼PepT1基因全长,进行序列及免疫原性分析,选择长度为107个氨基酸...; 鲁双庆刘臻冯军厂; 关键词：草鱼原核表达 ELISA 抗体效价

草鱼PepT1基因的表达与抗体制备: 为在蛋白水平上研究草鱼小肽转运载体1（Oligopeptide transporter 1,PepT1）转运寡肽的作用机制,本实验利用实验室已获得的草鱼PepT1基因全长,进行序列及免疫原性分析,选择长度为107个氨基酸...; 鲁双庆刘臻冯军厂; 关键词：草鱼原核表达 ELISA 抗体效价

营养素转运载体的研究进展被引量：9: 2013年; 大分子的营养物质,如:蛋白质、糖类和脂肪等,被动物体摄入后都要经过一系列蛋白酶消化成小分子营养物质,这些小分子的营养物质再被肠道及其他组织中相应的转运载体转运到细胞内后才能被机体利用。综述肠道内小肽转运载体、氨基酸转运载体和葡萄糖转运载体的成员和分类,介绍其结构特征、功能特性及组织分布;并简单阐述肠道内这3类营养素转运载体基因表达的影响因素。; 周玲王晓清刘臻冯军厂郝光孙浪于喆王赏初; 关键词：营养素

鱼类免疫因子作用机制及其应用被引量：6: 2011年; 由于鱼类病害发生颇为频繁.给水产业造成灾难性的危害,所以使得鱼病防治免疫防治日趋重要。本文介绍了鱼类免疫组织和器官、免疫细胞和体液免疫因子,并分别就这3类免疫系统的组成和免疫作用机制及其调节,影响因素以及在鱼病诊断与防治中的应用做了筒述。; 姚一彬刘臻鲁双庆肖调义; 关键词：鱼类免疫因子免疫应答

草鱼小肽转运载体PepT1基因的克隆与表达特征研究: 为研究小肽转运载体PepT1介导草鱼肠道对饲料蛋白消化吸收的分子机理,本文采用同源克隆和RACE技术首次克隆草鱼Pep T1基因的全长cDNA序列.该cDNA全长为2 762bp,包含141bp的5'UTR序列,...; 刘臻冯军厂鲁双庆张建社; 关键词：草鱼 CDNA 分子特征

饲料中添加茶氨酸对草鱼免疫和血清生化指标的影响被引量：11: 2012年; 研究饲料中添加茶氨酸对草鱼免疫和血清生化指标的影响,探讨茶氨酸的最适添加剂量。试验采用单因素完全随机试验设计,选择360尾当年草鱼鱼种,分成4组,在基础日粮中分别添加0、0.4%、0.8%和1.2%的茶氨酸,每组3个重复,每重复30尾鱼,试验期8周。结果表明:与对照组相比,添加适量的茶氨酸能够提高草鱼血清补体C3、补体C4和免疫球蛋白M(IgM)水平;显著提高了草鱼血清中谷草转氨酶活力和葡萄糖、甲状腺激素、促甲状腺激素和皮质醇的含量,其他血清生化指标含量都有增加的趋势。由此可知,日粮中添加茶氨酸能提高草鱼非特异性免疫能力,显著提高了草鱼血清中部分与生长代谢相关的酶活力和激素含量。; 孙浪鲁双庆肖调义王赏初周玲刘臻; 关键词：草鱼茶氨酸免疫血清生化指标

纳米缓释丁酸钠对草鱼生长性能、血清生化指标、肠道黏膜形态及PepT1基因表达的影响被引量：8: 2021年; 以初始体重(18.65±0.21)g的草鱼为实验对象,研究不同浓度纳米缓释丁酸钠对草鱼的生长性能、血清生化指标、肠道黏膜形态及PepT1基因表达的影响,实验共配制6种等氮等能的草鱼实验饲料,在基础饲料中分别添加0、0.1%、0.2%、0.4%、0.6%和0.8%的纳米缓释丁酸钠,以不添加丁酸钠组为对照组。实验在室外网箱内进行,每网箱饲养50尾草鱼,每个处理重复3次,养殖时间60d。结果表明:当纳米缓释丁酸钠添加量为0.6%时,草鱼的增重率、特定生长率、肥满度和肠绒毛高度均显著高于对照组(P<0.05),具有较好的促进生长的作用;同时,草鱼血清中的球蛋白含量显著增加(P<0.05),尿素氮含量与对照相比显著降低(P<0.05),谷丙转氨酶GOT、谷草转氨酶GPT及葡萄糖含量与对照相比差异不显著;血清中总氨基酸含量及必需氨基酸含量相比对照组增加显著(P<0.05),小肠中PepT1基因表达量提高显著(P<0.05)。在饲料中添加适量的纳米缓释丁酸钠通过保护肠道黏膜和提高肠道PepT1的表达量,从而促进其生长,适宜添加量为0.6%。; 唐建洲曹申平瞿符发彭亮刘臻侯德兴贺喜; 关键词：草鱼血清生化指标

草鱼小肽转运载体PepT1基因的克隆与表达特征研究: 为研究小肽转运载体PepT1介导草鱼肠道对饲料蛋白消化吸收的分子机理,本文采用同源克隆和RACE技术首次克隆草鱼PepT1基因的全长cDNA序列。该cDNA全长为2762bp,包含141bp的5′UTR序列,479 bp...; 刘臻冯军厂鲁双庆张建社; 关键词：草鱼 CDNA 分子特征

草鱼APN基因的克隆及表达特征被引量：3: 2012年; 氨肽酶N(APN)是肽酶M1家族的成员之一,在蛋白质的消化中发挥重要作用。采用同源克隆和RACE技术首次克隆草鱼APN基因的全长cDNA序列。该cDNA全长为3258bp,包含27bp的5UTR序列,552bp的3UTR序列,2679bp开放阅读框,编码892个氨基酸;草鱼与斑马鱼基因同源性和编码氨基酸同源性分别为81.5%和75.4%,与其他动物同源性分别为58.8%～61.2%和54.3%～60.2%。经预测,其编码蛋白的分子量为100.61ku,等电点为5.14,该蛋白具有与哺乳动物十分相似的1个螺旋跨膜结构,但跨膜区氨基酸同源性较低;系统进化分析表明,草鱼APN基因与斑马鱼的亲缘关系最近;利用Real-timePCR技术检测了该基因的发育表达,结果显示草鱼出膜4d后APNmRNA表达量相对稳定;APN在草鱼前肠、中肠和后肠均有较高的表达量,以前肠组织表达量最高;昼夜节律研究发现,肠道APN基因06:00-18:00的表达量较18:00-06:00高。; 冯军厂聂国兴刘臻张建社王赏初鲁双庆; 关键词：草鱼分子特征

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