浙江省自然科学基金(Y2110388)
- 作品数：15 被引量：34H指数：3
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- 相关机构：湖州师范学院温州医学院温州医科大学更多>>
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- 斑马鱼在人类疾病及药物筛选模型构建中的应用
- 2014年
- 人类疾病及临床药物筛选大多采用鼠类动物来建模。目前,低等脊椎动物斑马鱼作为模式动物已获得极大的关注。斑马鱼具有多方面的优势:包括在基因和器官系统上与人类具有很高的同源性,强繁殖力,体外受精,基因易于操作以及整个成年早期身体透明等。本文就近10年来人类疾病及药物筛选中有关斑马鱼研究的四个领域展开讨论。这些领域分别是:①伤口愈合/修复;②胃肠道疾病;③微生物-宿主相互作用;④遗传性疾病和药物筛选。
- 刘重斌陈露陈露王瑞王瑞
- 关键词：斑马鱼药物筛选模型构建器官系统鱼具
- 戊四唑(Pentylenetetrazole,PTZ)诱导斑马鱼癫痫模型的优化及评价指标
- 2014年
- 目的探讨建立PTZ诱导斑马鱼癫痫模型的方法,优化PTZ诱导浓度及评价指标。方法在斑马鱼PTZ诱导癫痫模型中,分别对不同浓度PTZ(1.25、2.5、5、10、20、30 mM)、不同的观察指标(快速运动距离、中速运动距离、慢速运动距离、总的运动距离)进行分析。结果 PTZ在10 mM浓度下快速运动距离(V>20 mm/sec)与溶剂组相比,差异显著(<0.01),诱导效率最佳。因此,本模型选择PTZ 10 mM作为诱导浓度,快速运动距离(V>20 mm/sec)的改变作为药效评价指标。结论斑马鱼PTZ诱导癫痫模型中,10 mM PTZ为最佳诱导浓度,快速运动距离的改变为最佳的药效评价指标。
- 刘重斌郭贺杰王瑞王瑞丁启峰
- 关键词：戊四唑斑马鱼癫痫
- 番茄红素对帕金森模型小鼠氧化应激损伤及神经行为的影响被引量：14
- 2013年
- 目的:探究番茄红素对鱼藤酮诱导帕金森小鼠氧化应激损伤及神经行为的影响及可能机制。方法:成年雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为空白对照、鱼藤酮、番茄红素、番茄红素+鱼藤酮4组。实验处理5周后,化学比色法检测脑组织中MDA含量及SOD、GSH-Px和CAT活力判定氧化应激损伤水平;水迷路分析小鼠神经行为改变;免疫组化分析TH、α-SYN和LC3-B阳性表达变化。结果:与空白对照比较,帕金森小鼠黑质及纹状体MDA含量显著增加,SOD、GSH-Px和CAT酶活力显著下降(P<0.05);而番茄红素干预后,黑质及纹状体MDA含量显著下降,SOD、GSH-Px和CAT酶活力显著增加(P<0.05)。水迷路分析结果发现,帕金森小鼠平均逃逸时间和靶象限活动时间显著高于空白对照组(P<0.05);而番茄红素干预后,小鼠平均逃逸时间和靶象限活动时间显著下降(P<0.05)。免疫组化结果发现,番茄红素干预后帕金森小鼠黑质及纹状体TH免疫阳性神经元数显著增加(P<0.05),α-SYN免疫阳性细胞表达显著下降(P<0.05),LC3-B免疫抗原明显下调(P<0.05)。结论:番茄红素能有效降低氧化应激损伤及中脑黑质、纹状体多巴胺DA能神经元的自噬活性,对帕金森PD模型小鼠DA能神经元具有一定的保护作用。
- 刘重斌王瑞潘慧斌丁启峰陆峰彬
- 关键词：番茄红素帕金森病鱼藤酮氧化应激
- 松树皮提取物对帕金森模型小鼠行为损伤及氧化应激的作用被引量：8
- 2013年
- 目的探讨松树皮提取物对鱼藤酮诱导的帕金森模型小鼠行为损伤及氧化应激的保护作用及可能机制。方法成年雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为空白对照组(对照组),鱼藤酮处理组,松树皮提取物干预组,松树皮提取物+鱼藤酮处理组4组。实验处理5 w后,水迷宫实验分析小鼠的行为改变;化学比色法检测脑组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)酶活力判定氧化应激损伤水平;免疫组化分析鼠酪氨酸羟化酶(TH)、α-突触核蛋白(α-SYN)和兔自噬微管相关蛋白(LC3-B)阳性表达变化。结果水迷宫试验分析结果显示,帕金森模型小鼠平均逃逸时间和靶象限活动时间显著高于对照组(P<0.05);而松树皮提取物干预后,小鼠平均逃逸时间和靶象限活动时间显著下降(P<0.05)。与对照组比较,帕金森模型小鼠黑质及纹状体MDA含量显著增加,SOD、GSH-Px和CAT酶活力显著下降(P﹤0.05);而松树皮提取物干预后,黑质及纹状体MDA含量显著下降,SOD、GSH-Px和CAT酶活力显著增加(P﹤0.05)。免疫组化结果显示,松树皮提取物干预后的帕金森模型小鼠黑质TH免疫阳性神经元数显著增加(P﹤0.05),α-SYN免疫阳性细胞表达显著下降(P﹤0.05),LC3-B免疫抗原明显下调(P﹤0.05)。结论松树皮提取物能有效降低帕金森模型小鼠的氧化应激损伤及中脑黑质、纹状体多巴胺(DA)能神经元的自噬活性,对帕金森病(PD)模型小鼠DA能神经元具有一定的保护作用。
- 刘重斌王瑞陆峰彬丁启峰董缪武
- 关键词：帕金森病鱼藤酮氧化应激
- 不同抗癫痫药物在戊四唑(PTZ)诱导斑马鱼癫痫模型中的药效学分析
- 2014年
- 目的探讨卡马西平、苯妥英钠和丙戊酸钠三种抗癫痫药物在戊四唑(PTZ)诱导斑马鱼癫痫模型中的作用。方法在斑马鱼PTZ诱导癫痫模型中,选择卡马西平、苯妥英钠和丙戊酸钠三种抗癫痫药物,并采用3个不同的浓度进行药效评价和行为学分析。结果与溶剂组相比,卡马西平300μM浓度组能显著降低快速运动距离,癫痫治疗效率分别为95.1%(<0.01);100μM浓度组快速运动距离反而比溶剂组增加130.1%(<0.01);30μM浓度组快速运动距离与溶剂组相比均无明显差异(>0.05)。与溶剂组相比,苯妥英钠1000μM浓度组能显著降低快速运动距离,癫痫治疗效率为85.9%(<0.01);300μM浓度组也显著降低快速运动距离,癫痫治疗效率为55.0%(<0.01);100μM浓度组快速运动距离与溶剂组相比均无明显差异(>0.05)。与溶剂组相比,丙戊酸钠3000μM浓度组能显著降低快速运动距离,癫痫治疗效率分别为62.6%(<0.01);1000、300μM浓度组快速运动距离与溶剂组相比均无明显差异(>0.05)。结论卡马西平在300μM浓度时对癫痫发作有治疗作用,而在100μM浓度时能加重癫痫发作;苯妥英钠和丙戊酸钠治疗癫痫量效关系明确。
- 刘重斌王瑞王瑞丁启峰丁启峰
- 关键词：苯妥英钠斑马鱼癫痫
- 大蒜素对慢性铁中毒大鼠氧化应激与肝细胞自噬的抑制作用被引量：3
- 2012年
- 目的探讨大蒜素(allicin)对慢性铁中毒大鼠氧化应激与肝细胞自噬的抑制作用及可能机制。方法 36只SD大鼠按体质量随机分为6组,即正常对照(饲喂基础饲料)、慢性铁中毒模型(饲喂高铁饲料)、正常+大蒜素40 mg·kg-1、慢性铁中毒+大蒜素30,40和60 mg·kg-1组,每组6只。持续饲喂6周后,取血及肝、结肠和肾组织用试剂盒测定铁含量、总铁结合力、丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性。透射电镜和免疫组织化学方法观察肝细胞形态结构、自噬以及胱天蛋白酶3凋亡蛋白、Ki-67细胞增殖抗原和LC3-B微管相关蛋白表达的变化。结果与正常对照组比较,模型组血清铁含量增加(P<0.01),总铁结合力下降(P<0.01),肝和结肠组织铁含量增加(P<0.05)。与模型组比较,饲喂不同剂量大蒜素大鼠血清铁含量显著下降(P<0.05),总铁结合力显著增加(P<0.05),结肠组织铁含量显著下降(P<0.05);饲喂大蒜素40和60 mg·kg-1肝组织铁含量显著下降(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组肝和结肠组织MDA含量显著增加(P<0.05),肝组织T-SOD活性增加(P<0.01),结肠组织T-SOD活性下降(P<0.01)。与模型组比较,饲喂大蒜素组肝组织MDA含量显著下降(P<0.05),结肠和肾组织T-SOD活性显著增加(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组肝实质细胞和肝非实质细胞Ki-67增殖抗原表达显著增加(P<0.05),胱天蛋白酶3凋亡蛋白表达无明显变化(P>0.05)。观察肝细胞超微结构,模型组大鼠肝细胞有大量铁蛋白颗粒累积,线粒体和内质网膜膨胀,胞质中形成自噬前体。模型组大鼠肝细胞LC3-B微管相关蛋白有较强表达,正常对照和正常+大蒜素组肝细胞未发现LC3-B免疫阳性染色。结论大蒜素能有效清除体内自由基,增强机体抗氧化能力,降低肝中铁诱导的氧化压力、线粒体膜的改变和细胞自噬,对慢性铁中毒肝细胞具有一定的保护作用。
- 刘重斌王瑞董缪武吴博肖敏
- 关键词：大蒜素氧化应激自噬
- 番茄红素对慢性铁负荷大鼠肝细胞自噬的保护作用被引量：1
- 2012年
- 目的 :探讨番茄红素对慢性铁负荷大鼠肝细胞自噬的影响。方法:通过饲喂高铁饲料和灌胃番茄红素的方法构建SD慢性铁负荷模型,采用铁染色和透射电镜方法观察肝组织细胞的形态结构及其超微结构的变化,采用免疫组化方法观察肝组织切片中LC3-B蛋白的表达。结果:慢性铁负荷组与对照组及番茄红素组动物比较,肝细胞中有大量铁蛋白颗粒累积,线粒体和内质网膜膨胀,胞质中形成自噬前体,LC3-B微管相关蛋白有较强表达。结论:番茄红素能降低肝细胞中铁诱导线粒体膜的改变和细胞的自噬,具有一定的保护作用。
- 董缪武王瑞吴博刘重斌
- 关键词：番茄红素铁负荷肝细胞自噬
- 番茄红素对氟染毒小鼠氧化应激及行为影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨番茄红素对饮水性氟染毒小鼠氧化应激损伤与神经行为影响及可能机制。方法成年雄性C57BL/6小鼠60只,随机分为对照组、染氟组、番茄红素组、番茄红素低、中、高剂量干预组,每组10只;连续处理6个月后,氟离子选择电极法测定尿氟、血氟和脑氟含量;化学比色法检测血液和海马组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活力;水迷路实验分析小鼠神经行为学改变。结果与对照组比较,染氟组小鼠体重下降,尿氟、血氟和脑氟含量[分别为(3.76±1.60)、(19.26±0.62)、(1.19±0.12)mg/kg]升高(P<0.05),血液和海马组织中MDA含量显著增加、SOD、GSH-Px和CAT酶活力下降(P<0.05);与染氟组比较,番茄红素高剂量干预组尿氟、血氟和脑氟含量[分别为(2.06±0.47)、(13.40±0.35)、(0.52±0.21)mg/kg]明显下降(P<0.05),血液和海马组织中MDA含量降低、SOD、GSH-Px和CAT酶活力升高(P<0.05);与对照组比较,染氟组小鼠平均逃逸时间和靶象限活动时间[分别为(20.84±0.72)、(16.11±0.77)s]延长(P<0.05);与染氟组比较,番茄红素高剂量干预组小鼠平均逃逸时间和靶象限活动时间[分别为(14.01±0.82)、(7.38±0.37)s]下降(P<0.05)。结论番茄红素能有效降低饮水性氟染毒小鼠氧化应激损伤及提高小鼠学习记忆能力,对饮水性氟中毒具有一定保护作用。
- 王瑞刘重斌陈格格叶翎陈露
- 关键词：番茄红素氧化性应激神经行为
- 低铁/高锰饮食对孕鼠运动行为和脑氧化应激的影响
- 2011年
- 目的观察低铁/高锰饮食对孕鼠运动行为和脑氧化应激的影响,并探讨其作用机制。方法 24只SD孕鼠按体重随机分为空白对照组(CN组:饲料含35 mg/kg铁,10 mg/kg锰),低铁组(ID组:饲料含3 mg/kg铁,10 mg/kg锰),高锰组(MnH组:饲料含35 mg/kg铁,100 mg/kg锰)和低铁/高锰组(IDMnH组:饲料含3 mg/kg铁,100 mg/kg锰)4组,持续饲喂40 w。Morris水迷宫实验观察大鼠运动行为的改变;采用血细胞计数仪和试剂盒检测方法测定血液中血红蛋白(Hb)、铁(Fe)、转铁蛋白(Tf)和总铁结合力(TIBC);抗原竞争ELISA法测定脑组织中8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)含量,原子吸收光谱法测定脑组织中铁和锰含量。结果 Morris水迷宫实验显示,IDMnH组与CN,ID组比较,平均逃逸时间明显增加,而靶象限活动时间却明显下降。IDMnH组与CN组比较,体重明显下降。IDMnH组与CN,ID组比较,Hb和血清、小脑、中脑和纹状体中Fe含量明显下降,Tf和TIBC明显增加,海马组织中铁和锰含量显著增加;小脑、海马和纹状体组织中8-iso-PGF2α含量显著升高。但MnH组与CN组比较,小脑、海马和纹状体组织中8-iso-PGF2α含量也有显著升高。结论孕期锰染毒对缺铁雌性大鼠血液和脑组织造成明显的毒性损害,并导致脑的氧化应激,认知行为和空间记忆等功能下降。
- 刘重斌肖敏冯彦红
- 关键词：低铁高锰氧化应激水迷宫
- 番茄红素对铁负荷大鼠抗氧化功能影响被引量：4
- 2012年
- 目的探讨番茄红素对铁负荷大鼠抗氧化功能保护作用。方法 36只SD大鼠按体重随机分为空白对照、铁负荷、番茄红素、番茄红素高、中、低剂量干预6组,每组6只,持续饲喂6周后,取血和肝、肾、脾、心和结肠组织测定铁含量,总铁结合力;测定血清和组织中丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性。结果高剂量番茄红素干预组大鼠血清、肝、脾、心脏和结肠组织中铁含量分别为(19.06±2.1)μmol/L、(25.67±2.7)μg/g、(38.30±4.8)μg/g、(17.30±2.6)μg/g和(12.08±2.9)μg/g,与铁负荷组比较,高剂量番茄红素干预组大鼠组织中铁含量明显下降,血清总铁结合力明显增加,MDA含量明显下降,T-SOD活性明显上升,血清、心脏、肝和结肠CAT、GST活性明显上升(P<0.05)。结论番茄红素能有效清除体内自由基,增强机体抗氧化能力。
- 王瑞张红吴博冯彦红刘重斌
- 关键词：番茄红素铁负荷氧化应激
