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大菱鲆mIgD重链基因的克隆与表达分析被引量：4: 2014年; 利用RACE技术克隆获得大菱鲆（Scophthalmus maximus）膜结合型免疫球蛋白D（Membrane-boundedIg，mIgD）重链基因的cDNA序列全长，该基因全长3357bp，包含1个2997bp的开放阅读框，编码999个氨基酸，基因结构为VDJ-μ1—δ1—δ2—δ3—δ4-δ5—δ6—δ7-TM。重链恒定区31～67氨基酸序列同源比对结果显示，其与庸鲽（78％）、鳜（71％）、牙鲆（68％）具有较高的同源性；多序列比对结果显示，大菱鲆mIgD的每个8恒定区内均存在色氨酸与半胱氨酸保守位点。利用邻位相连法构建硬骨鱼类免疫球蛋白系统发育树，结果显示，鱼类IgD聚为一大支，大菱鲆IgD与庸鲽及牙鲆聚为一支。利用RT-PCR分析了大菱鲆IgD重链基因的组织差异表达，结果显示，其在外周血白细胞、脾脏、前肾及中。肾组织中具有较高的表达。将大菱鲆腹腔注射福尔马林灭活鳗弧菌后，实时荧光定量PCR检测其前肾组织中mIgD重链基因应答表达量，结果显示，mIgD重链基因在注射鳗弧菌后呈显著下调趋势，在注射后8h时降至最低值，其相对表达量约为对照组的1／28，然后呈逐渐恢复上调趋势，在48h时mIgD相对表达量与对照组无显著差异。; 陈孔茂唐小千绳秀珍邢婧战文斌; 关键词：大菱鲆免疫球蛋白D 基因克隆

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