安徽省自然科学基金(1308085QC61)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 金龟子绿僵菌MicroRNA在蝉蜕和蚕血淋巴诱导下的差异表达分析
- 2013年
- 金龟子绿僵菌是一类应用广泛的昆虫病原真菌,在害虫的防治中起着重要作用。研究发现MicroRNA能调控基因表达,继而调控生物体生长发育的各个重要环节。本研究采用特异的茎环RT-qPCR方法,对15个绿僵菌miRNA进行不同诱导条件下的差异表达分析;结果表明,在蝉蜕诱导过程中,15个绿僵菌miRNA的表达水平呈现下降趋势;在血淋巴诱导过程中,15个绿僵菌miRNA的表达量差异存在以下2种情况:即man-miR-2等表达水平显著升高或者man-miR-6等显著下降。这些显著差异表达的miRNA可能在绿僵菌侵染昆虫的过程与定殖于昆虫体内发挥相应重要的作用。
- 汪章勋周权孟慧敏张军黄勃
- 关键词：金龟子绿僵菌MICRORNA
- 绿僵菌Argonaute基因片段原核表达载体的构建及其表达被引量：2
- 2013年
- 绿僵菌是一类广泛应用于生物防治的昆虫病原真菌。研究表明小RNA能够调控基因的表达,其中Argonaute基因在整个小RNA通路中发挥重要的作用。本研究通过RT-PCR的方法从绿僵菌中获得了Argonaute基因的部分功能片段,构建了其重组原核表达载体,将重组载体转化至大肠杆菌进行诱导表达;采用镍柱亲和纯化重组的目的蛋白并通过Western blot技术鉴定。结果发现:通过RT-PCR的方法获得长度约为950bp的基因片段;重组原核表达载体经诱导表达后,SDS-PAGE检测发现分子量约为34kDa的目的蛋白条带;诱导5h后蛋白的表达量最高,采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,经Western blot技术检测,重组蛋白可与His-tag抗体发生特异性反应。该纯化重组蛋白的获得为将来绿僵菌Argonaute蛋白抗体的制备,并进一步通过该抗体获得绿僵菌体内的小RNA及其靶基因提供了基础。
- 汪章勋孟慧敏周权
- 关键词：绿僵菌原核表达
- 金龟子绿僵菌小RNA通路相关Dicer,Argonaute基因的功能研究
- 金龟子绿僵菌是一类应用广泛的昆虫病原真菌,在害虫的防治中起着重要作用。非编码小RNA(长约20-30核苷酸)广泛存在于动植物体内,其主要功能是基因转录后调控基因的表达,继而调控生物体生长繁殖的重要环节。我们首先对金龟子绿...
- 孟慧敏汪章勋王玉龙黄勃
- 关键词：金龟子绿僵菌DICERARGONAUTE
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