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江西省自然科学基金(2010GZY0339)

作品数：2 被引量：8H指数：1
相关作者：钱克俭曾振国丁成志刘芬揭克敏更多>>
相关机构：南昌大学第一附属医院丰城市中医院南昌大学更多>>
发文基金：江西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇多糖
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光定量
  • 2篇脂多糖
  • 2篇实时荧光
  • 2篇实时荧光定量
  • 2篇实时荧光定量...
  • 2篇肿瘤坏死因子
  • 2篇肿瘤坏死因子...
  • 2篇坏死因子
  • 2篇TNF-Α
  • 1篇脂多糖诱导
  • 1篇实时荧光定量...
  • 1篇鼠肺
  • 1篇肺泡
  • 1篇肺泡巨噬
  • 1篇肺泡巨噬细胞
  • 1篇大鼠肺泡巨噬...
  • 1篇MRNA

机构

  • 2篇南昌大学第一...
  • 1篇南昌大学
  • 1篇丰城市中医院

作者

  • 2篇丁成志
  • 2篇曾振国
  • 2篇钱克俭
  • 1篇聂贞蕴
  • 1篇卿城
  • 1篇聂成
  • 1篇詹以安
  • 1篇朱白鹭
  • 1篇邵强
  • 1篇揭克敏
  • 1篇刘芬

传媒

  • 1篇中华急诊医学...
  • 1篇实用临床医学...

年份

  • 1篇2012
  • 1篇2011
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
实时荧光定量PCR检测脂多糖对NR8383细胞TNF-α mRNA的影响
2011年
目的实时荧光定量PCR检测脂多糖(LPS)诱导NR8383肺泡巨噬细胞前后TNF-αmRNA的表达情况。方法体外培养的肺泡巨噬细胞系NR8383分成LPS刺激组和PBS(磷酸盐缓冲液)对照组,LPS终浓度为1μg.mL-1,共培养2 h后,TRIzol法提取细胞总RNA,SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测细胞TNF-αmR-NA的表达,结合管家基因β-Actin进行相对定量分析。结果荧光定量PCR未发现非特异性扩增。与对照组比较,LPS刺激组细胞TNF-αmRNA上调了124.1倍,差异有统计学意义(P<0.01)。结论用于本研究TNF-αmRNA的荧光定量PCR检测体系特异性好,结果可靠,为进一步实验奠定了基础。
熊东林丁成志曾振国钱克俭
关键词：实时荧光定量PCR肿瘤坏死因子-Α脂多糖
脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞中microRNA-146a与TNF-α的相关性研究被引量：8
2012年
目的观察肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和microRNA-146a在脂多糖（LPS）诱导的NR8383肺泡巨噬细胞中的动态表达，分析二者在时间上的变化关系，探讨microRNA-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用及其机制。方法体外培养的肺泡巨噬细胞接种于六孔板，贴壁后加入1μg／mL的LPS，刺激0、3、6、12h后离心收集培养上清液和细胞。采用实时荧光定量PCR检测细胞中microRNA-146a和TNF-αmRNA的表达，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测培养上清液中TNF-α蛋白水平的表达。microRNA-146a和TNF-αmRNA的相关性采用双变量Pearson相关性分析。结果（1）培养上清液中的TNF-α蛋白在LPS刺激3h后显著升高[（359．80±57．54）pg／mL，P〈0．01]，于12h达高峰[（729．22±50．40）pg／ml，pg〈0．01]；（2）LPS刺激3h后，细胞中TNF-αmRNA的表达即达到顶峰[（67．48±24．52）倍，P〈0．01]，6h后开始降低[（29．53±4．26）倍，P〈0．05]；（3）LPS刺激6h后，microRNA-146a表达水平显著增高[（5．33±0．81）倍，P〈0．01]，并且持续增高[12h：（8．21±1．19）倍，P〈0．01]；（4）细胞中microRNA-146a的表达水平与TNF-αmRNA的含量呈负相关（r=-0．895，P〈0．01）。结论在LPS诱导的肺泡巨噬细胞中，microRNA-146a的表达水平与TNF-αmRNA的含量呈负相关，推测microRNA-146a可能参与了肺泡巨噬细胞的炎症反应调控。
曾振国龚洪翰李勇聂贞蕴揭克敏詹以安聂成刘芬丁成志邵强卿城朱白鹭钱克俭
关键词：肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子-Α实时荧光定量PCR
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