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野生型p53调控结肠癌细胞代谢转换的研究被引量：3: 2015年; 目的观察野生型p53基因在结肠癌细胞系中能量代谢转换中的作用。方法利用流式细胞学方法检测p53在结肠癌细胞系HCTl16中对荧光标记的葡萄糖类似物：2-N[7-硝基苯-2-乙二酸，34羟氨基]-2．脱氧葡萄糖（2-NBDG）摄取的影响，进一步采用Westernblot、实时定量聚合酶链反应（Real．timePCR）等方法检测其可能的下游调控关键酶三磷酸腺苷（ATP）柠檬酸裂解酶（ACLY）、糖酵解的关键酶葡糖糖6-磷酸脱氢酶（G6PD）、乳酸脱氢酶（LDHA）、醛缩酶（ALDOA）及M2型丙酮酸激酶（PKM2）的蛋白及转录水平的表达变化。结果比较于p53缺失型（KO）HCT116细胞，p53野生型（WT）的HCT116细胞对葡萄糖的摄取能力下降41％（P〈0．05）。进一步利用Westernblot法检测能量代谢关键基因进行蛋白水平的比较及半定量分析后发现，相对于p53KO的HCT116细胞，调控细胞脂质代谢关键酶ACLY下调0．3984（t=7．154，P〈0．025）、糖酵解的关键酶G6PD下调0．3578（t=10．99，P〈0．叭）、LDHA下调0．2227（t=7．182，P〈0．05），证明上述基因在p53wT细胞中表达受抑制，而另外两个糖酵解关键酶ALDOA及PKM2的表达则无明显变化（P〉0．05）。进一步检测mRNA水平后发现p53wT的HCT116细胞中ACLY基因下调6．61倍（t=43．18，P〈0．01）、G6PD基因下调6．75倍（t=85．90，P〈0．01）及LDHA基因下调0．99倍（t=32．42，P〈0．01），而ALDOA及PKM2则无明显变化（P〉0．05）。结论野生型p53作为抑癌基因参与肿瘤能量代谢的调控过程，其可能通过抑制多种关键酶发挥作用。; 刘亮陈浩余超然陶德定冷彦胡俊波龚建平李小兰; 关键词：结肠肿瘤 P53 能量代谢

鱼藤素对结肠癌Lovo细胞上皮-间充质转化及侵袭的影响被引量：3: 2014年; 目的观察探讨鱼藤素对结肠癌Lovo细胞上皮-间充质转化（EMT）以及侵袭能力的影响。方法分别用Westernblot法和实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）法检测鱼藤素对E-钙黏蛋白（E—cadherin）、Twist、Snail、波形蛋白（Vimentin）在蛋白和mRNA水平表达的影响；划痕实验和Transwell侵袭实验检测鱼藤素对Lovo细胞侵袭能力的影响。结果1μmol／L鱼藤素作用于结肠癌Lovo细胞0、24、48h后，蛋白水平Twist的相对表达量分别为1．40±0．07、0．41±0．07和0．30±0．03；Snail的相对相对表达量分别为1．04±0．11、0．16±0．04和0．23±0．02；Vimentin的相对表达量分别为4．31±0．30、1．30±0．27和1．21±0．21；E—cadherin的相对表达量分别为2．62±0．33、3．96±0．27和6．89±0．16。mRNA水平Twist的相对表达量分别为0．63±0．09和0．50±0．06；Snail的相对表达量分别为0．46±0．06和0．51±0．19；Vimentin的相对表达量分别为0．76±0．05和0．57±0．04；E—cadherin的相对表达量分别为1．88±0．27和2．29±0．60。1μmol／L鱼藤素作用于结肠癌Lovo细胞24、48h后，相对迁移率分别为（20．23±5．16）％和（27．94±6．66）％，而无鱼藤素的对照组24、48h后相对迁移率则分别为（45．65±4．41）％和（66．14±3．31）％（P〈0．01）。Transwell侵袭实验证实鱼藤素组每个视野穿透细胞数为（130．3±16．19）个，而对照组为（459．0±14．19）个（P〈0．01）。结论鱼藤素能够有效抑制结肠癌Lovo细胞的EMT及侵袭。; 姜建武李小兰冷彦陶德定胡俊波龚建平; 关键词：鱼藤素结肠癌上皮-间充质转化

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国家自然科学基金(81101943)

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