广东省自然科学基金(05011579)
- 作品数:14 被引量:50H指数:3
- 相关作者:刘新光梁念慈刘振杰阮杰骆艳婷更多>>
- 相关机构:广东医学院广东医学院附属医院广东药学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金湛江市科技招标项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 蛋白激酶CK2在细胞周期调控中的作用被引量:13
- 2006年
- 细胞周期的研究是生物生长、发育、遗传及医学等相关领域中重大问题研究的基础,其运转的分子基础是以Cyc lin-CDK-CK I为中心的细胞周期网络调控系统。蛋白激酶CK2在进化过程中是最保守的蛋白激酶之一,大量的研究表明,其在细胞周期的调控中发挥着举足轻重的作用。
- 刘振杰刘新光梁念慈
- 关键词:蛋白激酶CK2细胞周期
- 蛋白激酶CK2在信号转导中的作用及其与肿瘤发生的关系被引量:5
- 2007年
- 蛋白激酶CK2是一种在真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,可横向介导多条信号途径,以级联和垂直的方式发挥作用,调节细胞的生长和凋亡。其精细调控一旦失衡,可诱发肿瘤;而其特异性抑制剂和以其为靶向的基因治疗可抑制肿瘤。以CK2调节为中心的致瘤机制研究和以CK2为靶点的肿瘤药物开发具有重要的临床应用价值。
- 阮杰刘新光梁念慈
- 关键词:蛋白激酶CK2信号转导肿瘤发生
- 蛋白激酶CK2β SiRNA对肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用被引量:3
- 2009年
- 目的:探讨蛋白激酶CK2B特异性小干扰RNA对肺腺癌细胞系A549生长增殖的影响。方法:构建CK2βsiRNA表达质粒稳定转染A549细胞,RT-PCR、免疫印迹、免疫细胞化学技术检测转染前后CK2β的mRNA和蛋白表达水平,同位素掺入法测定细胞内CK2活性,细胞计数法绘制细胞生长曲线,计算细胞倍增时间,流式细胞术分析细胞周期。结果:与空白组和阴性对照组相比,稳定转染pGPU6-CSNK2B质粒后,A549细胞中CK2β的mRNA水平、胞浆蛋白表达水平以及CK2活性均明显下降(P<0.05),但各组间细胞核中CK2β的蛋白表达水平无明显差异(P>0.05);A549细胞生长明显受到抑制,倍增时间增加;A549细胞阻滞于G0/G1期。结论:CK2β siRNA可以下调A549细胞中CK2β的表达及其激酶活性,并抑制细胞增殖;本研究为CK2特异性siRNA作为抗肿瘤药物的开发和CK2药靶的研究奠定了基础。
- 阮杰王菲菲刘新光骆艳婷刘振杰梁念慈
- 关键词:肺肿瘤蛋白激酶CK2SIRNA
- 山奈酚抑制蛋白激酶CK2活性被引量:19
- 2006年
- 研究体外以及HL-60细胞内山奈酚对蛋白激酶CK2的抑制作用及机制.通过测定药物作用后转移到CK2底物上的[γ-32P]ATP的32P的放射性活度,探讨山奈酚对重组人CK2全酶以及细胞内CK2活性的影响;采用多重RT-PCR检测CK2α、α′和β亚基的mRNA表达水平;通过Lineweaver-Burk作图法,分析CK2的酶动力学机制.山奈酚能显著抑制重组人CK2活性(IC50=1.88μmol/L)和HL-60细胞内的CK2活性,对细胞内CK2的作用效果强于阳性对照四溴-2-氮杂苯并咪唑(TBB).山奈酚作用2h,对CK2各亚基的mRNA表达水平均没有影响.山奈酚对重组人CK2的酶动力学分析表明,山奈酚与ATP(Ki=1.14μmol/L)及酪蛋白(Ki=1.03μmol/L)均呈非竞争性抑制作用.结果提示,山奈酚是一种有效的蛋白激酶CK2的抑制剂,其作用机制可能与其阻碍CK2与ATP以及底物的结合有关.
- 林小聪刘新光陈小文梁念慈
- 关键词:蛋白激酶CK2山奈酚酶动力学
- 蛋白激酶CK2α′相互作用蛋白NADH脱氢酶4的筛选被引量:1
- 2009年
- 目的研究新的男性不育候选基因蛋白激酶CK2α'在精子发生中的作用机制。方法以人蛋白激酶CK2α′为诱饵蛋白,用酵母双杂交实验从构建于pACT2质粒的人睾丸cDNA文库中筛选CK2α'亚基的相互作用蛋白。结果核酸序列分析及同源性检索表明,其中一种与NADH脱氢酶4(NADH dehydrogenase 4)有99.0%同源性。结论NADH脱氢酶是线粒体内参与三羧酸循环的重要酶,也可调节细胞凋亡,深入研究CK2α'与NADH脱氢酶4之间的关系,对了解CK2在精子发生过程中的作用有重要意义。
- 陈碧刘新光郑慧玲梁景耀梁念慈
- 关键词:酵母双杂交系统睾丸
- 米托蒽醌对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响
- 2010年
- 目的:观察米托蒽醌对人乳腺癌细胞MCF-7的影响。方法:台盼蓝拒染观察药物对细胞的不良反应,流式细胞术观察药物对细胞周期的影响。结果:米托蒽醌对MCF-7细胞具有明显的增殖抑制作用,呈一定的时效性;药物作用MCF-7 48h后能引起其细胞周期发生变化。结论:米托蒽醌能明显地抑制MCF-7细胞的增殖,并能引起其细胞周期变化。
- 李春梅刘新光梁念慈
- 关键词:米托蒽醌乳腺癌增殖细胞周期
- 蛋白激酶CK2与衰老的关系
- 2008年
- 骆艳婷刘新光周中军
- 关键词:蛋白激酶CK2衰老
- 3,6-二羟黄酮对乳腺癌细胞株MCF-7细胞生长增殖的影响被引量:1
- 2009年
- 目的观察3,6-二羟黄酮对乳腺癌细胞株MCF-7细胞的影响。方法分别用台盼蓝拒染观察药物对细胞的毒性作用,流式细胞术观察药物对细胞周期的影响。结果3,6-二羟黄酮对MCF-7细胞具有明显地细胞毒作用,呈一定的时效性;流式细胞术药物作用MCF-748h后能引起其细胞周期发生变化。结论3,6-二羟黄酮能明显地抑制MCF-7细胞的增殖,并能引起其细胞周期的变化。
- 李春梅刘新光梁念慈
- 关键词:MCF-7细胞株增殖细胞周期
- 人癌症/睾丸相关蛋白XAGE-1b原核表达载体的构建及融合蛋白的表达
- 2014年
- 目的构建人癌症/睾丸相关蛋白XAGE-1b原核表达载体及诱导XAGE-1融合蛋白表达。方法从文库质粒pACT2-XAGE-1b中利用PCR法扩增XAGE-b cDNA编码序列,将其克隆到pET-32a载体中,并将重组质粒pET-32bXAGE-1b转染大肠杆菌DE3中,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Western blot检测融合蛋白表达。结果原核表达载体pET-32a-XAGE-1b构建成功;转染菌株经IPTG诱导后,出现约29 kD蛋白过表达,Western-blot检测显示His6融合蛋白表达。结论成功构建原核表达载体pET-32a-XAGE-1b,转染菌株可表达His6融合蛋白。
- 郑慧玲刘振杰陈碧丁航刘新光
- 关键词:原核表达融合蛋白
- 蛋白激酶CK2与Wnt信号转导途径被引量:1
- 2007年
- 蛋白激酶CK2是一种真核中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,到目前为止,已发现其300多种底物,且数目还在增加,涉及到许多细胞生命过程,如从DNA复制、转录到细胞生长的信号转导、增殖、转化、细胞凋亡等。近来研究发现,CK2与Wnt信号转导途径存在着很大的联系,CK2可以与-βcatenin和dishevelled等Wnt信号蛋白相结合使它们磷酸化,正性调节Wnt信号转导途径。在肿瘤发生和早期胚胎发育过程中CK2增强Wnt信号转导,本文将从这两个方面加以综述。
- 赵树勇刘新光
- 关键词:蛋白激酶CK2肿瘤发生早期胚胎发育