转基因生物新品种培育专项(2008ZX08006-001)
- 作品数：3 被引量：15H指数：3
- 相关作者：王铁东欧阳红生逄大欣李莉逄大新更多>>
- 相关机构：吉林大学军事医学科学院中国农业大学更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 猪肌肉生长抑制素RNA干涉载体的构建与验证
- 目的:构建针对猪肌肉生长抑制素mRNA的RNA干涉载体,并体内验证其有效性。方法:通过体外转染化学合成的siRNA获取针对肌肉生长抑制素的序列,构建RNA干涉载体,将上述载体分别注射到猪股四头肌中,RT-PCR检测证明其...
- 于永生罗晓彤李娜张树敏
- 关键词：肌肉生长抑制素小干涉RNA
- 文献传递
- 特异性siRNA抑制猪繁殖与呼吸综合症病毒在MARC-145细胞中复制的研究
- 引言猪繁殖与呼吸综合症(PRRS),俗称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)所引起的一种传染性疾病。该病在全世界养猪地区广泛流行,给养猪业带来了巨大的经济损失。当前的PRRS防控策略并不
- 鲍永华李宁
- 关键词：SIRNA繁殖与呼吸综合症
- 文献传递
- 逆转录病毒载体RNAi技术抑制猪瘟病毒在猪胚胎成纤维细胞的增殖被引量：7
- 2009年
- 利用针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)石门株Npro基因mRNA的shRNA逆转录病毒表达载体,转导猪胚胎成纤维细胞,在G418的筛选压力下,获得7个稳定整合shRNA表达构件的猪胚胎成纤维细胞株。以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆,72h后以对感染细胞克隆进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测,结果显示,在所获得的7个抗性细胞株中,有3株细胞上猪瘟病毒的增殖显著降低,表明所构建的针对猪瘟病毒Npro基因mRNA的shRNA逆转录病毒整合细胞基因组后转录产生的siRNA可以有效抑制CSFV的复制。
- 王铁东逄大欣欧阳红生
- 关键词：猪瘟病毒RNA干扰逆转录病毒载体
- 质粒载体表达抑制猪瘟病毒shRNA在猪胚胎成纤维细胞上的复制被引量：5
- 2009年
- 以质粒pSilencer3.1 Hygro为基础,构建了针对猪瘟病毒Npro基因和NS4A基因mRNA的siRNA双表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞后,在潮霉素B的筛选压力下,获得5株稳定整合shRNA表达盒的猪胚胎成纤维细胞克隆。以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆,72 h后对感染细胞克隆进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测,结果显示,在所获得的5株细胞克隆中,有3株细胞上猪瘟病毒的增殖明显降低,表明所构建siRNA双表达载体转录产生的siRNA可以有效抑制CSFV的复制。本试验为研究猪瘟病毒的防治和通过RNAi建立猪的抗病育种提供了新的方法。
- 王铁东李莉逄大新涂长春欧阳红生
- 关键词：猪瘟病毒RNAI抗病毒
- RNA干扰技术在动物抗病育种中的应用前景被引量：4
- 2010年
- 动物疾病尤其是病毒性疾病一直是畜牧业亟待解决的问题,随着转基因技术的出现,生产遗传修饰动物来抵抗特定传染病的策略备受关注。从长远利益来看,这种基因工程动物从遗传本质上提高了畜禽的抗病能力。转基因抗病育种在未来可能成为减少动物传染性疾病的最有前途的方法之一。RNA干扰是双链RNA特异性诱导同源基因表达沉默的现象。研究证实,RNA干扰在细胞水平,小鼠模型以及动物个体的抗病毒效果是非常明显的,RNA干扰技术作为抗病毒策略为生产抗病转基因动物提供了光明的应用前景。RNA干扰技术介导的抗病转基因动物的研究相继取得了阶段性进展,抗疯牛病转基因羊和牛以及抗内源性逆转录病毒猪已经成功获得,虽然目前获得的转基因动物类型有限,但为继续生产抗病转基因家畜提供了有效的参考和依据。
- 鲍永华郭永臣赵志辉李宁
- 关键词：RNA干扰抗病毒感染遗传修饰抗病育种
