广东省自然科学基金(S2012010010323)
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
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- 盐酸克伦特罗快速检测胶体金试纸的研制被引量：9
- 2013年
- 为建立快速检测猪尿等样品中盐酸克伦特罗(CL)的胶体金免疫层析方法,用柠檬酸三钠还原氯金酸制备了胶体金,将其标记抗CL单克隆抗体,制备了金标抗体;以CL-人血清白蛋白(HSA)为包被抗原、羊抗鼠IgG为质控线二抗,制成胶体金试纸。优化了胶体金颗粒粒径、标记抗体用量和pH值等各项参数,最终确定胶体金粒径为15 nm、每毫升胶体金溶液中添加20μg抗体、胶体金溶液pH值为7.4、金标抗体稀释液为添加0.1%牛血清白蛋白(BSA)的0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4)、金标抗体喷涂量为50μL/cm2、CL-HSA和羊抗鼠IgG的包被浓度分别0.5 mg/mL和2 mg/mL。研制的CL胶体金试纸检测限为3 ng/mL,与莱克多巴胺、沙丁胺醇等六种β-兴奋剂类药物无交叉反应。对42份猪尿样品的检测结果与市售酶联免疫(ELISA)试剂盒的符合率为100%。试纸无需仪器辅助,操作简便,可在5 min内完成,适用于对CL残留进行现场检测。
- 肖治理余建华雷红涛杨金易孙远明
- 关键词：抗原-抗体反应胶体层析试纸
- 基于光谱法研究异细交链孢菌酮酸半抗原-抗体的相互作用被引量：1
- 2015年
- 本文采用紫外可见光谱(UV-Vis)、荧光光谱和圆二色谱(CD)技术研究了异细交链孢菌酮酸单克隆抗体(Mc Ab)与其半抗原(Ite AH)之间的相互作用并用ELISA方法对荧光结果进行了验证。结果表明,ITe AH对Mc Ab有荧光猝灭作用,淬灭机理主要为静态猝灭且遵循非辐射能量转移理论。在298、310、318 K 3个温度下,ITe AH与Mc Ab的结合常数分别为1.9×106、1.6×106、1.4×106 L/mo L,结合位点数n≈1,结合距离r为3.35 nm,经ELISA测得的结合常数与荧光分析的结果较一致。由结合作用过程的热力学参数可知,两者之间以静电引力为主要作用力,不同p H下,由ELISA结果可推测其影响了ITe AH与抗体结合。同步荧光光谱显示ITe AH的加入并未使抗体的酪氨酸和色氨酸残基附近的微环境发生明显改变,两者的结合位点更倾向于酪氨酸残基,圆二色谱分析发现ITe AH与Mc Ab相互作用后,抗体的二级结构发生明显变化。
- 王雅丽王锋王弘杨金易徐振林沈玉栋肖治理雷红涛孙远明
- 关键词：单克隆抗体紫外可见光谱荧光光谱圆二色谱
- 氯霉素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制被引量：6
- 2013年
- 为研究应用检测氯霉素(CAP)的胶体金免疫层析技术,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗CAP单克隆抗体,将CAP偶联抗原和羊抗鼠二抗分别结合于硝酸纤维膜作为检测线和质控线,研制CAP胶体金快速检测试纸条。通过优化试验,确定最佳标记pH为8.5、最佳标记量为36μg/mL、最佳抗原包被浓度和最佳二抗包被浓度分别为0.5,1.0 mg/mL。经过试验制成的试纸条检测限为2ng/mL,检测时间5～8min,肉眼即可判断结果。用该试纸条检测CAP残留具有操作简便、快速、特异性强、灵敏度高等特点,适用于现场快速检测和筛选工作。
- 肖治理曾文亮王弘沈玉栋孙远明杨金易
- 关键词：氯霉素胶体金试纸条
- 杂交-杂交瘤技术制备BsMAb的研究进展及其在食品安全检测中的应用被引量：2
- 2016年
- 双特异性单克隆抗体(bispecific monoclonal antibody,BsMAb)是指具有两个不同特异性抗原结合位点的单克隆抗体分子。杂交-杂交瘤技术因其简便易行、制备周期短,在制备Bs MAb方面有较大优势。基于杂交-杂交瘤技术能制备出可以特异性识别两种或者两类小分子药物的Bs MAb,在食品安全多残留免疫分析检测中具有较好的应用价值。本文综述了杂交-杂交瘤技术制备Bs MAb的进展,探讨了基于该技术的Bs MAb生成机制,讨论分析了杂交-杂交瘤及Bs MAb筛选制备的关键技术要点,并归纳了Bs MAb在检测食品中小分子污染物方面的应用进展,旨在为食品安全多残留免疫分析技术的发展应用提供参考。
- 王锋王宇王弘肖治理
- 关键词：双特异性单克隆抗体多残留免疫分析
