湖南省自然科学基金(01jjy2114)
- 作品数:10 被引量:79H指数:6
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- cagA(+)幽门螺杆菌体外诱导肝细胞凋亡的观察被引量:15
- 2003年
- 目的 探讨幽门螺杆菌对肝细胞系HepG2增殖与凋亡的影响。 方法 将不同浓度的cagA(+)Hp和cagA(- )Hp与HepG2共同培养 ,应用细胞计数 ,Hoechst 332 5 8细胞核荧光染色等技术 ,观察Hp菌液对体外培养HepG2细胞的增殖与凋亡的影响。结果 1 HepG2数随着cagA(+)Hp菌液浓度的增大和作用时间的延长而减少 ;2 HepG2凋亡率随着cagA(+)Hp菌液浓度的增大而升高。 3 未发现cagA(- )Hp对HepG2生长增殖与凋亡的影响。 结论 cagA(+)Hp对HepG2细胞具有明显的细胞毒作用 ,cagA(+)Hp抑制HepG2增殖 ,诱导凋亡 ,其效应与Hp菌液的浓度和作用时间呈明显正相关。
- 陈仁范学工李宁黄燕陈朝晖
- 关键词:体外诱导肝细胞细胞凋亡细胞计数
- 幽门螺杆菌感染与胃肠外疾病被引量:11
- 2003年
- 黄燕范学工
- 关键词:幽门螺杆菌感染胃肠外疾病血管性疾病冠心病肝胆系统疾病
- 肝癌组织中螺杆菌16SrRNA基因的检测被引量:33
- 2002年
- 目的:探讨螺杆菌感染是否与人类肝癌的发生相关.方法:选取经病理诊断的肝癌组织38例,肝硬化15例,慢性肝炎12例,肝良性肿瘤15例,采用聚合酶链反应(PCR)扩增螺杆菌16SrRNA检测螺杆菌,扩增产物经Southern杂交证实,并对部分标本的PCR产物进行测序及同源比较.阳性者再扩增幽门螺杆菌(Hpylori)的特异基因(26Ku蛋白)和相关功能基因(cagA,vacA,glmM,rps4)来验证是否为该菌.结果:52.6%(20/38)的肝癌组织中发现螺杆菌存在,而非肝癌组无一例阳性(P<0.01).所有PCR产物用South-ern杂交得到证实.10例测序及同源比较显示,肝癌组织中的螺杆菌16SrRNA序列与Hpylori的16SrRNA序列有99-100%的同源性.阳性标本中26ku基因大部分亦阳性(14/20),但仅3例扩增出cagA基因,4例扩增出glmM基因,一直未扩增出vacA基因和rps4基因.结论:肝癌组织中存在螺杆菌感染,他与肝癌的发生可能存在某种联系.
- 黄燕范学工陈永平李宁汤立军
- 关键词:肝癌螺杆菌RRNA基因聚合酶链反应
- 幽门螺杆菌对人肝细胞系HepG2的病理作用被引量:4
- 2004年
- 研究采用体外肝细胞和幽门螺杆菌(helicobacter Pylori,HP)共培养,测定HP作用后HepG2细胞周期素D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA及蛋白质的表达,以探讨HP对肝细胞的病理作用.
- 张艳范学工黄宇琨陈仁代洪
- 关键词:幽门螺杆菌肝细胞系HEPG2增殖细胞核抗原蛋白表达
- 幽门螺杆菌对胆汁的耐受性研究被引量:9
- 2004年
- 目的 研究H .pylori对胆汁的耐受情况。 方法 将H .pylori与不同浓度的胆汁 (0 .0 1%~1.8% )共同培养 ,观察H .pylori的生长及形态学的变化。 结果 <0 .1%的胆汁对H .pylori无影响 ,0 .1%~1.2 %的胆汁部分抑制H .pylori的生长 ,≥ 1.4 %的胆汁完全抑制H .pylori的生长。H .pylori在胆汁培养基中可出现球形体和丝状体 ,但耐受胆汁后形态可恢复正常。结论 较高浓度的胆汁可以抑制H .pylori的生长 ,但H .pylori经诱导可耐受胆汁。
- 黄燕邹益友范学工田雪飞张艳
- 关键词:幽门螺杆菌胆汁耐受性
- 原发性肝癌患者肝组织中幽门螺杆菌的免疫组织化学观察被引量:6
- 2004年
- 目的 :研究肝组织中幽门螺杆菌的感染情况。方法 :将 38例原发性肝癌 ,15例肝硬化和 15例肝脏良性肿瘤组织进行幽门螺杆菌的免疫组化染色。结果 :38例肝癌标本中有 16例 (42 % )观察到幽门螺杆菌的存在 ,而肝硬化和对照肝组织中未观察到幽门螺杆菌的存在。结论
- 黄燕范学工周建华田雪飞
- 关键词:原发性肝癌幽门螺杆菌空肠弯曲菌
- 幽门螺杆菌对人肝细胞系HepG2原癌基因c-fos表达的影响被引量:16
- 2004年
- 目的 探讨H .pylori对HepG2c-fos基因表达的影响。 方法 将H .pylori与HepG2共同培养 1、3、6、12和2 4h ,采用RT -PCR和Westernblot方法检测不同作用时相细胞的c -fosmRNA和蛋白表达。结果 cgA+ H .pylori作用HepG2后c -fos呈短暂一过性表达升高 ,c -fosmRNA、蛋白质在H .pylori感染后 1h开始增加 ,6h达高峰 ,表达水平分别为对照组的 2 .5倍和 1.6倍 (P <0 .0 1)。 12h开始下降 ,2 4h基本恢复到刺激前水平。而cgA-H .pylori及空肠弯曲菌与HepG2细胞共培养后 ,未见该基因的表达升高。结论 cag+ A H .pylori可诱导HepG2c -fos基因表达升高 ,其在肝癌发生中的作用有待进一步研究。
- 张艳范学工陈仁代洪田雪飞李宁
- 关键词:幽门螺杆菌HEPG2肝癌
- 螺杆菌感染与肝癌关系的研究被引量:18
- 2002年
- 目的:已有研究发现几种螺杆菌与某些动物肝脏疾病相关,本研究目的旨在探讨螺杆菌感染是否与人类肝癌的发生相关.方法:选取经病理诊断的肝癌患者15例作为研究对象,非肝癌患者13例作对照.用聚合酶链反应(PCR)扩增肝组织螺杆菌16SrRNA来检测螺杆菌,扩增产物用Southern杂交证实,并进行测序及同源比较.结果:60%(9/15)肝癌患者肝组织中发现螺杆菌存在,而非肝癌组无1例阳性(P<0.01);所有PCR阳性产物用Southern杂交得到证实;4例测序及同源比较显示,肝癌组织中的螺杆菌与幽门螺杆菌有99%的同源性.结论:肝癌患者肝组织存在螺杆菌感染,他与肝癌的发生可能存在某种联系.其是肝癌的致病因素抑或伴发感染,需进一步的研究确定.由于是扩增16SrRNA的部分序列,故目前仍不能明确是哪一种螺杆菌.
- 彭小宁范学工黄燕王志明陈永平
- 关键词:螺杆菌感染肝癌聚合酶链反应
- 幽门螺杆菌处理前后HepG2细胞蛋白质双向电泳图谱的差异分析被引量:1
- 2005年
- 目的:利用蛋白质组学方法,识别并鉴定幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)处理HepG2细胞后差异表达的蛋白质,为进一步探讨幽门螺杆菌对肝细胞的病理作用机制奠定基础。方法:运用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离H.pylori处理前后HepG2细胞的总蛋白质,用图象分析软件比较分析,以识别差异表达的蛋白质;应用质谱仪(massspectrometry)得到相应的肽质指纹图谱(peptidemassfingerprint,PMF),然后搜索数据库鉴定差异蛋白质。结果:鉴定出12种差异表达蛋白质,这些蛋白质包括整合素β1、蛋白激酶Cα、PINCH蛋白、Ras相关蛋白Rab37、LIM同源盒蛋白Lhx1、HLAⅠ类抗原、血管抑制素和金属蛋白酶抑制因子2等。这些差异蛋白质涉及基因表达调控、细胞免疫、细胞生长和信号传导等众多关键事件。结论:H.pylori处理前后HepG2的蛋白质组具有差异,这些差异表达的蛋白质可能参与了H.pylori对肝细胞的病理作用过程,这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究H.pylori与人类肝脏疾病的关系。
- 张艳范学工陈仁肖志强冯雪萍田雪飞陈朝晖
- 关键词:幽门螺杆菌HEPG2双向凝胶电泳
- 肝癌患者肝组织中螺杆菌感染的研究被引量:6
- 2003年
- 目的 探讨螺杆菌感染是否与人类肝癌的发生相关。方法 选取经病理诊断的肝癌组织及癌旁组织 2 0例为研究对象 ,非肝癌组织 16例作对照 ,采用聚合酶链反应 (PCR)扩增螺杆菌 16SrRNA基因 (16SrDNA)检测螺杆菌 ,扩增产物经Southern杂交证实 ,并对部分标本的PCR产物进行测序及同源比较。阳性者再扩增幽门螺杆菌 (H pylori)的特异基因 (2 6 -kDa蛋白 )和相关功能基因 (cagA、vacA、glmM、rps4 )来验证是否为该菌。结果 4 0 % (8/ 2 0 )的肝癌组织中发现螺杆菌 16SrD NA存在 ,其对应的癌旁组织大部分亦阳性 (7/ 8) ,而非肝癌组无一例阳性 (P <0 0 1)。所有PCR产物用Southern杂交得到证实。 6例测序及同源比较显示 ,肝癌组织中的螺杆菌 16SrDNA序列与H pylori的 16SrDNA序列有 98 5 %~ 99 0 %的同源性。阳性标本中 2 6 -kDa基因大部分亦阳性 (7/ 8) ,但仅 2例扩增出cagA基因 ,2例扩增出glmM基因 ,一直未扩增出vacA基因和rps4基因。 结论 肝癌患者肝组织中螺杆菌感染率较高 ,它与肝癌的发生可能存在某种联系。
- 黄燕范学工周建华李宁汤立军
- 关键词:肝癌肝组织螺杆菌感染聚合酶链反应