国家自然科学基金(30370500)
- 作品数：6 被引量：41H指数：4
- 相关作者：谢鹏贾延劼牟君何大维李旭良更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学川北医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Ferumoxides标记神经干细胞及其对增殖分化的影响被引量：9
- 2005年
- 目的:研究超顺磁性氧化铁(superparamagneticironoxides.SPIOs)标记神经干细胞及其生物学特性。方法:神经干细胞培养、传代和诱导分化;菲立磁(Ferumoxides,一种SPIOs)标记神经干细胞,制备磁标记神经干细胞;利用免疫细胞化学、透射电镜和Prussianblue染色等方法对磁标记神经干细胞的生长、分化等生物学特性进行研究。结果:在原代及传代细胞中有Nestin阳性细胞即神经干细胞。血清诱导下,神经干细胞可分化为GFAP、MAP - 2、NSE、Tau蛋白及NF2 0 0阳性细胞。Feru moxides与神经干细胞共同孵育后,透射电镜及Prussianblue染色显示胞浆中含有铁颗粒,SPIOs也可以随细胞的分裂增殖而传到子代细胞中。随Ferumoxides浓度的增高(2 .8μg/ml～16 .8μg/ml) ,Ferumoxides对神经干细胞存活、分化能力的影响无显著性差异(P >0 .0 5 )。当Ferumoxides的浓度大于2 2 .4 μg/ml时,SPIOs影响其存活和分化(P <0 .0 5 )。结论:本实验在国内首次利用Ferumoxides作为磁标记探针,对神经干细胞进行成功磁标记。为进一步利用核磁共振(MRI)对神经干细胞活体追踪奠定实验基础。
- 王爽谢鹏牟君赵裕光贾延劼
- 关键词：神经干细胞超顺磁性氧化铁FERUMOXIDES
- 精原干细胞在支持细胞饲养层上的长期增殖特征被引量：19
- 2006年
- 目的:建立体外研究精原干细胞与支持细胞共培养的细胞模型,探讨体外精原干细胞在支持细胞层上的增殖特点。方法:应用两步酶消化法,分别从12-15d及6d龄昆明小鼠睾丸中分离支持细胞及精原干细胞,并用免疫细胞化学方法鉴定。将精原干细胞接种在支持细胞层上,观察不同时间点精原干细胞形成的细胞集落形态及数目。结果:精原干细胞与支持细胞层共培养24h,开始增殖分裂,呈双细胞形态。随着培养时间延长,双细胞集落数逐渐减少,而链状细胞集落逐渐增加。培养120h后,链状细胞局部融汇堆积,且细胞集落维持在相对稳定数量。在每4-5d更换培养液的条件下,细胞集落维持稳定状态的平均时间为51.2±5.8d。结论:精原干细胞在体外支持细胞层上呈集落样生长,并能长时间维持细胞集落形态及数目,这为体外研究药物或毒物干扰精原干细胞功能提供了细胞模型。
- 何大维李旭良魏光辉林涛
- 关键词：精原干细胞支持细胞细胞增殖
- 活体磁共振示踪磁标记大鼠神经干细胞
- 2009年
- 背景：要将神经干细胞替代治疗神经系统疾病应用于临床,必须解决一个重要问题,就是植入人脑内神经干细胞的存活、迁移、识别和动态监测。目的：拟建立菲立磁体外标记胎鼠神经干细胞的方法及检测手段,观察标记细胞移植后在活体上磁共振信号的改变。设计、时间及地点：MRI动态评估,体内实验,于2005-01/08在武警医学院附属医院完成。材料：孕13-18dSD胚胎大鼠10只用于分离、培养大鼠胚胎源性神经干细胞,健康成年清洁级SD大鼠32只,用于制作局灶性脑缺血再灌注模型。方法：分离培养大鼠胚胎源性神经干细胞,使用菲立磁-多聚赖氨酸复合物标记神经干细胞。制作局灶性脑缺血再灌注模型,将菲立磁-多聚赖氨酸复合物标记的神经干细胞分别移植入模型大鼠左侧脑内,右侧移植未标记的神经干细胞。主要观察指标：对标记细胞进行普鲁士蓝染色、电镜观察。细胞活体移植后1,5,14d体内磁共振示踪。结果：菲立磁可以高效率地标记神经干细胞,普鲁士蓝染色显示菲立磁-多聚赖氨酸复合物标记神经干细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒,电镜结果显示菲立磁-多聚赖氨酸复合物标记的神经干细胞胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡。磁共振成像检查发现脑内移植的标记细胞在磁共振上呈明显的低信号改变,移植第5天低信号物质沿胼胝体腹侧迁移。在移植第14天,对称平行的两个针道已经基本看不见,病灶侧侧脑室部位低信号物质向对侧迁移,左侧侧脑室部位低信号物质基本看不见。结论：菲立磁经多聚左旋赖氨酸转染后可体外标记神经干细胞,标记后体内移植的神经干细胞可以在磁共振上产生明显的低信号改变。
- 翟宝进钟士江王爽李双英陈礼明
- 关键词：神经干细胞菲立磁
- 神经干细胞的微环境被引量：7
- 2006年
- 目的:探讨干细胞生长的微环境。资料来源:应用计算机检索Pubmed1975-01/2004-12和Ovid1975-01/2004-12以及Elserve1992-01/2004-12数据库中与干细胞微环境相关的文章,检索词为“neuralstemcells,nicheormicroenvironment,ortransplantation”,并限定文章语言种类为English。同时检索维普中文科技期刊数据库1990-01/2004-12相关干细胞微环境的文章,检索词为“神经干细胞、微环境或移植”,并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,开始查找全文,纳入标准:①近5年文献。②有关干细胞、移植与其微环境关系的文献。排除标准:重复研究、Meta分析和综述类文献。资料提炼:收集了近50篇文章,纳入22篇符合标准的文章进行综述。资料综合:干细胞的自我更新、增殖和分化主要依赖于周围特殊的微环境,即小生境。干细胞小生境可能提供了一种调节体内干细胞数量的手段。小生境不是几种细胞简单的集合体,而是一个有机的组织结构、生理功能整体。成人神经发生是在血管原性的小生境中进行的。基底膜在干细胞小生境中起固定各种因子、细胞和提供各种空间信号的作用。结论:小生境与神经干细胞的生存、分裂、分化及迁移均有关系,要求在移植时尽量满足干细胞的生长微环境。
- 张小东贾延劼赵立波谢鹏
- 关键词：干细胞
- 基因芯片分析Wnt刺激后小鼠多潜能分化干细胞C3H10T1／2的差异基因表达被引量：2
- 2008年
- 目的探讨Wnt信号传导系统对诱导干细胞向神经系统分化的基因表达的影响。方法采用最新的含有22000多个已知基因及EST克隆的小鼠基因芯片U74Av2,检测了Wnt刺激后的小鼠多潜能分化干细胞C3H10T1/2中目标基因表达的变化,并进行实时定量PCR,验证了基因芯片结果。结果Wnt刺激后小鼠多潜能分化干细胞C3H10T1/2中Wnt信号传导系统各主要组成基因表达有不同程度增加;对干细胞向神经系统发育有潜在调节作用的基因表达也有增加或减少。结论表达谱芯片分析成功筛选出Wnt刺激引起表达改变且可能与神经发生有关的基因。
- 朱丹谢鹏康权黄文曾志磊牟君魏有东陈晓彭丹刘庆军
- 关键词：神经系统发育基因芯片干细胞
- 抗炎及抗自由基治疗对脑缺血/再灌注后成年大鼠神经干细胞增殖及BDNF和VEGF表达的影响被引量：4
- 2019年
- 目的:探讨环磷酰胺(Cyc)、秋水仙碱(Col)和维生素C(VitC)对成年大鼠脑缺血/再灌注后海马、室管膜下区和缺血周边区神经干细胞的增殖,以及对海马脑源性神经生长因子(BDNF)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:将雄性SD大鼠140只随机分成5组:单纯缺血再灌注组(I/R组),I/R加Cyc和Col干预组(CC组),I/R加Col干预组(Col组),I/R联合VitC干预组(VitC组)和假手术组(SC组)。线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型。药物干预的时间为10 d。用免疫组化和原位杂交的方法观察不同时间点海马、室管膜下区、缺血周边区不同部位阳性细胞计数情况。结果:与SC组比较,I/R组大鼠海马及室管膜下区的Brdu阳性细胞和Nestin阳性细胞记数明显增加,海马和缺血周边区的BDNF和VEGF阳性细胞记数显著升高;而CC组明显减少(P<0.05);VitC组和Col组变化无统计学意义(P>0.05)。结论:Cyc和Col联合干预,明显抑制缺血再灌注后神经干细胞的增殖及BDNF和VEGF的表达,而VitC和Col单独作用对神经细胞增殖及BDNF和VEGF表达影响较小。
- 张小东王艺蓉贺诗佳谢鹏
- 关键词：秋水仙碱神经干细胞
