国家自然科学基金(31360187)
- 作品数：8 被引量：29H指数：3
- 相关作者：杨海峰何丽君张磊张国盛王雷更多>>
- 相关机构：内蒙古农业大学中国林业科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 沙柳SpsLAZY1a和SpsLAZY1b基因克隆及生物信息学分析被引量：10
- 2017年
- LAZY1基因对于植物分枝角度、分枝方向具有重要影响。以沙柳为试验材料克隆LAZY1基因,利用生物信息学软件分析LAZY1基因序列、构建进化树,并预测蛋白结构。结果表明,SpsLAZY1a和SpsLAZY1b的CDS全长分别为1 161、1 143bp,分别编码386和380个氨基酸。生物信息学分析表明SpsLAZY1a、SpsLAZY1b2种蛋白均为亲水性蛋白,均无信号肽区域。氨基酸序列具有IGT基因家族典型结构域,并且其C端有LAZY1蛋白的典型EAR结构。系统发育树将18个LAZY1蛋白家族聚为2个大类,SpsLAZY1a和SpsLAZY1b属于其中第1类,均为双子叶植物,并与其他植物具有较高相似性。氨基酸同源结构比对发现这些植物间既有相似同源区域,也存在一定差异区域。单子叶比双子叶植物缺少某些同源区域,草本比木本植物又缺少某些同源区域。LAZY1基因在沙柳进化过程中发生基因重复,本研究由沙柳中成功克隆SpsLAZY1a、SpsLAZY1b基因,隶属IGT基因家族,并初步揭示LAZY基因的系统进化关系。
- 张磊叶志玮赵晨曦张国盛杨海峰
- 关键词：沙柳分枝角度基因克隆
- 拟南芥突变体pny的PCR鉴定及茎、下胚轴部位解剖结构变化分析被引量：2
- 2016年
- 利用拟南芥研究木材发育是一种简便而快捷的研究方法。本研究利用前期拟南芥ATH1全基因芯片对毛白杨次生维管系统再生过程中的基因表达分析结果,选择表达差异较大的拟南芥同源基因,由国际拟南芥突变体中心获得拟南芥突变系种子,将其播种进行纯杂合检测以及表型变化研究。研究表明,获得的拟南芥PENNYWISE(PNY)基因突变系均为纯合系,该突变系表型存在明显变化,植株矮化,分枝显著多于野生型分枝。通过冰冻切片进行解剖结构变化分析,发现茎基部次生木质部较野生型发达,细胞排列紧密,韧皮部向外扩增,发育较快,皮层增厚,皮层细胞变大。由此可推测PNY基因可能与维管系统发育相关。本研究将草本模式植物拟南芥与木材发育结合开展研究,可简便快速鉴定相关基因功能,对于木材发育研究具有重要意义。
- 王文娟杨海峰路东晔张磊何丽君
- 关键词：拟南芥分枝
- 沙柳SpsLAS基因克隆及生物信息学分析被引量：11
- 2017年
- LAS基因对于植物侧生分生组织有重要影响。它被证实在拟南芥、番茄等草本科植物营养生长阶段参与腋生分生组织的形成,但在木本植物中的基因功能尚缺乏深入研究。本研究以沙柳为材料,利用RT-PCR技术成功克隆沙柳LAS基因,命名为SpsLAS,并对其进行生物信息学分析。结果表明,该基因CDS序列全长1 320 bp,编码439个氨基酸,预测蛋白分子量为49.876 8 k D,理论等电点(PI)为6.66,是亲水性蛋白;同源氨基酸序列比对结果表明沙柳LAS基因与番茄LS、拟南芥LAS等功能已确认的LS亚家族基因同源性较高,氨基酸相似性达50%以上;系统进化分析表明SpsLAS与杞柳和毛果杨亲缘关系更近;对LAS进行功能结构域分析得知LAS基因具有GRAS基因家族典型特征,属于GRAS基因家族LS亚家族;预测未发现跨膜结构和信号肽区域;SpsLAS蛋白二级结构包含173个α螺旋(Alpha helix),72个延伸链(Extended strand),194个无规则卷曲结构(Random coil);亚细胞定位预测该基因很可能定位于细胞核内。沙柳LAS基因的克隆对于研究木本植物萌蘖及其分枝机制有重要意义,同时丰富了木本植物中GRAS基因家族的相关研究。
- 路东晔贺玉娇金娜刘乐卜松雪王雷杨海峰
- 关键词：沙柳LAS基因克隆生物信息学分析
- 沙柳SpsLAS基因超表达对拟南芥营养生长的影响
- 2018年
- 用沙柳SpsLAS基因构建35S∷SpsLAS超表达载体并转化野生型拟南芥,对转基因拟南芥进行表型观察,利用荧光定量PCR,对分枝、生长素及细胞分裂素相关基因进行表达分析。结果显示:(1)成功构建35S∷SpsLAS超表达载体,并获得9株纯合转基因株系,且转基因株系的萌芽速率快于野生型(对照),生活周期也较长;其中7个株系表现为生长迅速、株高增加、莲座叶叶片增大、分枝增加,2个株系表现为矮化、分枝增加、育性降低等一系列变化。(2)荧光定量PCR显示,与对照相比24h时转基因株系幼苗生长素及细胞分裂素途径关键基因无明显变化,4d时各基因在各转基因株系呈上调趋势;30d时分枝相关基因RAX1、RAX3表达量均上调,而MAX1、MAX3、REV、AXR1无明显变化。研究表明,SpsLAS基因过表达对拟南芥株型、莲座叶有明显影响,该研究结果为进一步研究该基因对分枝调控机制奠定了基础。
- 张磊路东晔张国盛杨海峰
- 关键词：沙柳
- 沙柳休眠芽及嫩枝离体培养的初步研究被引量：4
- 2014年
- 以沙柳休眠芽茎段为试验材料,开展了沙柳休眠芽及嫩枝离体组织培养技术研究。研究结果表明诱导沙柳休眠芽萌生的最佳基本培养基为WPM培养基,叶片较绿,根较长,生长较快;诱导沙柳嫩枝生长的最适培养基激素配比为WPM+6-BA0.1mg·L^(-1)+NAA2mg·L^(-1),嫩枝较壮,高3.4 cm;诱导沙柳嫩枝生根的最适培养基为WPM+NAA0.2 mg·L^(-1),生根率达100%,6-BA会显著抑制沙柳生根。本研究为沙柳优良无性系的组培快繁、沙柳再生体系的建立以及利用基因工程手段改良沙柳遗传特性奠定了研究基础。
- 杨海峰何丽君刘芳敖敦
- 关键词：沙柳休眠芽离体培养
- 沙柳SpsLAS2、SpsLAS3基因的克隆、组织特异性表达及表达载体构建
- 分生组织的发育会影响植物的形态建成,而植株形态会极大影响园林植物的群落配置与景观效果。为促进沙柳(Salixpsammophila)的分子定向育种,研究其基因调控机理,本研究利用同源克隆技术克隆获得沙柳SpsLAS2、S...
- 刘畅
- 关键词：沙柳基因克隆
- 沙柳组织培养的初步研究被引量：1
- 2014年
- 以沙柳叶片和茎段为外植体,采用WPM、MS、F14为基本培养基,附加6-BA与NAA 2种激素组合,摸索了适合沙柳愈伤组织诱导的基本培养基、最佳激素组合浓度以及最适合的外植体。研究结果表明:WPM为最适合愈伤诱导的基本培养基,最佳外植体是茎段,最佳激素组合浓度为6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L,诱导率达87.5%。本研究开展了沙柳组织培养的初步研究工作,这对于沙柳优良无性系的组培快繁体系建立、沙柳细胞遗传学的研究以及基因转化受体系统建立等奠定了研究基础。
- 杨海峰张国盛明海军
- 关键词：沙柳愈伤组织
- 次生诱导拟南芥的茎、下胚轴解剖结构变化的初步研究被引量：1
- 2014年
- 近年利用草本模式植物拟南芥开展木材发育的基因功能研究逐渐开展起来。草本植物与木本植物的发育与结构存在一定差别,但利用次生诱导促进拟南芥的次生结构发育,可模拟"木材"的形成,以便开展木材发育的基因功能研究。本研究利用次生诱导体系培育拟南芥,并与未次生诱导的拟南芥进行解剖结构比较,分析了拟南芥次生诱导后产生的组织结构变化。结果表明:次生诱导后拟南芥下胚轴部位产生大量次生维管组织,可在一定程度上模拟木材发育,可作为木材发育研究的基础研究体系。
- 杨海峰何丽君王雷明海军徐建华
- 关键词：拟南芥
- 胡杨大片段基因在拟南芥中的表达及耐盐性分析被引量：1
- 2015年
- 以根癌农杆菌为介导,利用拟南芥作为受体植物进行胡杨基因大片段的转化。共将1 570个胡杨BIBAC克隆进行了拟南芥转化实验,其中利用抗生素平板筛选,有590个克隆得到了转基因拟南芥,利用PCR进行检测后得到结果跟卡那平板筛选后的结果吻合。对得到的转基因拟南芥进行不同浓度Na Cl筛选(150和175 mmol/L),共得到10个有耐盐表现的克隆;进一步验证试验证实,有两个株系具有稳定的耐盐表现,分离出T2纯合系。对于所获得的转化子进行播种观察得到了两个表型变化的突变体。本研究对于解析胡杨耐盐机理及挖掘胡杨耐盐基因资源具有重要意义。
- 张瑷何丽君黄鹏王文娟杨海峰
- 关键词：拟南芥转基因盐胁迫
- 沙柳SpsTAC2基因克隆、表达及功能分析
- 沙柳是我国西北地区防沙治沙的主要树种之一,对维持沙地生态系统的稳定起着重要作用。沙柳的分枝角度异常多样化,研究其分枝相关遗传机制对于开发沙柳潜在价值有着重要意义。因此,本论文的主要研究对象为沙柳中具有调控分枝角度功能的I...
- 袁梦如
- 关键词：沙柳TAC分枝角度
- 文献传递
