北京大学人类疾病基因研究中心科研基金
- 作品数：29 被引量：322H指数：11
- 相关作者：丁洁杨艳玲秦炯宋金青钱宁更多>>
- 相关机构：北京大学第一医院北京大学北京大学第六医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 以MAGE基因mRNA为特异标记检测肝癌患者外周血肿瘤细胞被引量：6
- 2002年
- 目的 以黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)和MAGE 3基因mRNA为特异性标记物 ,检测肝细胞癌 (HCC)患者外周血中的肿瘤细胞 ,并探讨其临床意义。 方法 采集 2 5例HCC患者及 2 0例健康志愿者的外周血 ,用巢式RT PCR方法检测外周血单核细胞 (PBMC)中MAGE 1和MAGE 3基因mRNA。同时用RT PCR方法检测HCC患者肝癌组织中上述MAGE基因的表达。 结果 4 4 % (11/2 5 )和 36 % (9/ 2 5 )HCC患者的PBMC中可分别检测到MAGE 1和MAGE 3基因mRNA ,而相应肝癌组织中MAGE 1和MAGE 3的表达率分别为 6 8% (17/ 2 5 )和 5 6 % (14 / 2 5 ) ;在 6 4 % (16 / 2 5 )的HCC患者PBMC中至少可检测到一种MAGE基因mRNA ;肝癌组织中不表达MAGE基因的病例以及 2 0例健康志愿者的PBMC中均未测出MAGE基因mRNA。HCC患者PBMC中两种MAGE基因mRNA的检出率与肿瘤TNM分期、直径密切相关 ,而与肿瘤分化程度、血清AFP水平无相关性。但 9例血清AFP正常或轻度升高者 (<5 0ng/ml) ,6例的PBMC中MAGE 1和 /或MAGE 3mRNA为阳性。 结论 MAGE 1和MAGE 3基因mRNA可作为特异性肿瘤标记物用于检测HCC患者PBMC中的肝癌细胞 ,巢式RT PCR的敏感性及特异性较高 ,其检测结果可能有助于判断HCC患者的预后。
- 彭吉润蔡胜利冷希圣牟东成吕建锋陈红松芮静安
- 关键词：MAGE基因肝癌外周血肿瘤细胞
- 丙酮酸脱氢酶E1α亚单位缺陷导致Leigh综合征被引量：18
- 2007年
- Leigh综合征是由于线粒体呼吸链能量代谢障碍所导致的遗传性疾病,丙酮酸脱氢酶E1浕亚单位(pyruvate dehydrogenase complex E1 alpha subunit,PDHA1)缺陷是导致Leigh综合征的常见原因之一。该研究通过PDHA1基因分析首次确诊了1例中国患者。该患儿1岁后运动发育落后,无力,肌张力低下,肌腱反射消失,发热、感冒时间歇性加重,智力发育正常。肌电图检查、腓肠肌病理活检结果提示神经性损害。3岁时脑MRI扫描未见异常,5岁时脑MRI呈现双侧苍白球对称性损害,符合Leigh综合征表现。经基因分析证实患者及其母亲PDHA1基因外显子3存在C214T突变,导致丙酮酸脱氢酶复合物活性下降。经过维生素B1、辅酶Q10、左旋肉碱及低碳水化合物饮食治疗后,患儿运动能力显著改善,现在8岁,正常就学。PDHA1缺陷为X连锁遗传性疾病,表型复杂,临床诊断困难,该患儿以无力为主要表现,经基因诊断确诊。
- 张尧孙芳杨艳玲常杏芝戚豫齐朝月肖江喜秦炯吴希如
- 关键词：LEIGH综合征无力基因突变
- 肝细胞癌抗原基因在肝细胞癌组织中的表达及临床意义被引量：3
- 2003年
- 目的 探讨肝细胞癌抗原 (HCA)基因mRNA在肝细胞癌 (HCC)组织中的表达。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对HCC患者的癌组织和相应癌旁组织及肝硬化和正常肝组织中的 4种HCAmRNA的表达进行检测 ;结合临床病理资料进行分析。 结果 46例HCC患者中 ,HCA90、HCA51 9、HCA52 0、HCA587基因mRNA阳性率分别是 65 2 %、76 1 %、45 7%和 32 6 % ;至少表达一种HCA者达 82 6 % ;而癌旁组织中仅HCA51 9基因有 6 5 %mRNA表达为阳性。 1 0例肝硬化和正常肝组织中 4种HCA基因均不表达。 4种HCA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无显著相关性 (P >0 0 5)。在部分AFP正常的患者中存在HCA基因的表达。 结论 HCA基因在HCC中呈高比例、高特异性表达 。
- 王万祥冷希圣彭吉润牟东成王瑜朱继业杜如昱陈慰锋
- 关键词：肝细胞癌抗原癌组织肝硬化
- TPH基因多态性与共患学习困难的儿童注意缺陷多动障碍的相关性被引量：7
- 2003年
- 目的 探讨伴和不伴学习困难 (LD)的儿童注意缺陷多动障碍 (ADHD)及各种亚型ADHD与色氨酸羟化酶 (TPH)基因A2 18C和A 6 5 2 6G两种多态之间的关联。方法 就 132个LD的ADHD核心家系和 2 2 1个不共患LD的ADHD核心家系的A2 18C和A 6 5 2 6G两种多态进行检测 ,并采用传递不平衡检验 (TDT)和单体型分析两种分析方法进行关联分析。结果 TPH基因与共患LD的ADHD相关联 (χ2 =9.36 2 ,df =3,P =0 .0 2 5 ) ;单体型 2 18A/- 6 5 2 6G在共患LD的ADHD核心家系中传递较少 (χ2 =9.2 5 2 ,df =1,P =0 .0 0 2 )。 结论 TPH基因及TPH基因的 2 18A/- 6 5 2 6G单体型与共患LD的ADHD相关联。
- 李君王玉凤周儒伦杨莉张浩波汪冰
- 关键词：多态性儿童注意缺陷多动障碍
- 应用酵母双杂交系统筛选新基因AngRem104相关蛋白被引量：6
- 2003年
- 目的 :应用酵母双杂交系统筛选与新基因AngRem10 4相互作用的蛋白 ,为该基因的功能研究提供线索。方法 :构建AngRem10 4的真核表达载体AngRem10 4 pGBKT7/c myc,转化酵母菌AH10 9,Westernblot证实蛋白表达 ,进行毒性和自激活检验 ,与转化了成人肾脏cDNA文库的酵母菌Y187接合 ,筛选与AngRem10 4相互作用的蛋白。结果 :AngRem10 4蛋白能在酵母中正常表达 ,对酵母细胞无毒性 ,不存在自激活现象。筛选出的蛋白包括真核翻译延伸因子 1α1、糖皮质激素受体AF 1特异延伸因子、β2 微球蛋白、巴戴 -比德尔综合征 2蛋白及 4个与细胞代谢有关的蛋白。结论 :AngRem10 4可能影响细胞内某些转录因子活性和细胞代谢 ,并与某些免疫相关疾病和遗传病发病有关。酵母双杂交结果为AngRem10
- 张艳玲张宏梁秀彬侯平王海燕
- 关键词：酵母双杂交系统基因蛋白
- 散发性儿童激素耐药型肾病综合征NPHS2基因突变被引量：15
- 2004年
- 目的 分析中国儿童散发性激素耐药型肾病综合征(SRNS)NPHS2基因及其突变特点。方法 研究对象为23例散发性SRNS儿童和53例尿检正常成年人。应用PCR-变性高效液相色谱-DNA序列测定法检测NPHS2基因突变。结果 发现1例患儿为1082T>C突变,该突变引起NPHS2基因编码蛋白podoein第361位亮氨酸变成脯氨酸,而检测对照人群106条染色体,未发现1082T>C。此外,还发现6种NPHS2基因多态性,分别为288C>T、ⅣS3-46C>T、ⅣS3-21C>T、IVS7-74C>G、954T>C和1038A>G。结论 首次证实了中国儿童散发性SRNS存在NPHS2基因突变,其发生率为4.3％(1／23);且1082T>C为新发现的突变,ⅣS3-46C>T和ⅣS3-21C>T为新发现的多态性。
- 余自华丁洁黄建萍姚勇肖慧捷张敬京刘景城杨霁云
- 关键词：基因突变IVS激素耐药DNA序列变性高效液相色谱
- 变性高效液相色谱分析检测人类糖皮质激素受体基因变异被引量：33
- 2003年
- 目的 :以变性高效液相色谱分析 (DHPLC)检测糖皮质激素受体基因 (NR3C1)在中国人群中的变异情况。方法 :提取 6 4例中国人基因组DNA ,参照文献所报道的引物序列 ,PCR方法扩增糖皮质激素受体基因编码区(2～ 9α外显子 )及其邻近的部分内含子序列 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定产物后 ,以DHPLC检测PCR产物 ,对洗脱曲线异常者进行DNA测序。结果 :经DHPLC分析和DNA测序证实 ,研究人群的NR3C1基因中存在 8处变异 ,5处为新发现 ;其中有 2组变异呈紧密连锁的单倍型 ,均为首次报道 ,它们在人群中的基因型频率达 3.1%与 14 .1% ;另一处变异出现频率相对较低。结论 :成功地建立了以DHPLC检测NR3C1基因变异的方法及技术参数 ,证实在中国人群中NR3C1基因存在变异 ,其中 2种频率较高的单倍型为新发现。
- 叶建伟丁洁陈彦黄建萍杨霁云
- 关键词：变性高效液相色谱分析糖皮质激素受体基因变异
- 5-羟色胺转运体基因多态与共患学习困难的儿童注意缺陷多动障碍的相关性被引量：5
- 2004年
- 目的探讨共患学习困难(LD)的注意缺陷多动障碍(ADHD)患儿与5-羟色胺转运体(5-HTT)基因连锁多态区(5-HTTLPR)和第2内含子17 bp数目可变的顺向重复(stin2.VNTR)的关联关系。方法对126例共患LD的ADHD患儿和198例不共患LD的ADHD患儿的5-HTTLPR和stin2.VNTR两种多态进行检测,并采用传递不平衡检测(TDT)和单体型分析方法进行关联分析。结果(1)TDT检测:5-HTTLPR多态的S等位基因在共患LD的ADHD和ADHD混合型(ADHD-C)核心家系中优先传递(X2=5.831和5.281,P=0.015和0.020);所有家系均未观察到stin2.VNTR多态中的任何等位基因有传递不平衡现象(均P>0.05);(2)单体型分析:5-HTT基因与共患LD的ADHD和ADHD-C相关联(X2=11.391和13.343,v=3,P=0.010和P=0.004);单体型L／12在共患LD的ADHD和ADHD-C核心家系中传递较少(X2=10.317和8.948,v=1,P=0.001和0.003),而单体型L／10在共患LD的ADHD核心家系中传递较多(X2=4.065,v=1,P=0.044)。结论5-HTT基因可能与共患LD的ADHD相关联,其中主要为共患LD的ADHD-C亚型。
- 李君王玉凤周儒伦杨莉张浩波汪冰
- 关键词：核心家系单体型儿童注意缺陷多动障碍
- 变性高效液相色谱法检测CpG岛胞嘧啶甲基化被引量：57
- 2001年
- 目的 建立一种新型的CpG岛胞嘧啶甲基化快速检测方法。方法 用亚硫酸氢钠处理DNA ,再用链特异性聚合酶链反应 (PCR)对错配修复基因hMLH1启动子含CpG位点的靶序列进行扩增 ;利用变性高效液相色谱法 (DHPLC)在部分变性温度下测定靶序列的保留时间 ,并与亚硫酸氢钠 酶切法测定结果进行比较。结果 用DHPLC对结肠癌细胞株RKO和胃癌细胞株PACM82的hMLH1启动子进行测定 ,发现RKO细胞PCR产物的保留时间明显长于PACM82细胞PCR产物的保留时间(6 .7min比 6 .2min)。RKO细胞PCR产物保留时间的延长是亚硫酸氢钠处理后的模板中胞嘧啶和鸟嘌呤含量较PACM82高所致。从此结果分析 ,可以判断出RKO的hMLH1启动子已甲基化 ,而PACM82细胞未甲基化。此结果与酶切法结果完全一致。结论 新方法可以快速检测CpG岛胞嘧啶甲基化。
- 邓大君邓国仁吕有勇周静辛慧君
- 关键词：甲基化变性高效液相色谱法肿瘤
- 以肿瘤-睾丸抗原mRNA为特异性标记评价肝癌患者肝移植的预后被引量：7
- 2004年
- 目的探讨肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)患者原位肝移植 (orthotopiclivertrans plantation ,OLT)手术前后外周血中MAGE 1、SSX1及CTp11基因mRNA表达与预后的关系。方法用巢式RT PCR方法检测OLT手术前后外周血单个核细胞 (PBMC)中上述 3种基因的表达 ,并对 2 6例患者进行随访。结果HCC患者术前PBMC中MAGE 1、SSX1和CTp11基因mRNA的表达率分别为4 0 0 % (14 / 35 )、37 1% (13/ 35 )和 31 4 % (11/ 35 ) ,6 0 0 % (2 1/ 35 )患者的PBMC中至少可以检测到其中一种基因表达。 16例术前PBMC中检测到上述基因表达者 ,术后肿瘤复发 /转移率 (75 0 % )显著高于10例不表达这 3种基因者 (30 0 % ) (P =0 0 4 3) ;在术前及术后这 3种基因mRNA持续呈阳性或者由阴性转为阳性的 2 0例患者中 ,15例 (75 0 % )术后发生肿瘤复发 /转移 ,而 3种基因mRNA持续阴性或者由阳性转为阴性的 6例患者无 1例复发 /转移 (P =0 0 0 2 )。结论MAGE 1、SSX1及CTp11基因mR NA可以联合作为肿瘤特异性标志物用于检测HCC患者血循环中的肿瘤细胞 ,并有助于选择OLT受体及判断预后。
- 彭吉润赵力牟东成朱继业黄磊王东李澍冷希圣
- 关键词：预后预后原位肝移植肿瘤-睾丸抗原
