国家自然科学基金(30370576)
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
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- 相关机构：南京医科大学中国人民解放军解放军第454医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 稳定表达A类I型清道夫受体的HEK293细胞系的建立
- 2007年
- 高松贲晶晶郑媛柏惠范乐明陈琪
- 关键词：病理学与病理生理学清道夫受体基因转染HEK293细胞
- A类清道夫受体N端第1～27位氨基酸胞浆结构域缺失对功能的影响被引量：5
- 2005年
- 目的确定A类清道夫受体胞浆域中的信号序列,探讨其对于受体功能的影响。方法构建A类清道夫受体N端第1～27位氨基酸胞浆结构域缺失体的表达质粒,并将其经脂质体介导瞬时转染入CHO细胞中。用Westernblot检测A类清道夫受体在细胞中的表达,并用流式细胞仪定量检测转染后的蛋白表达效率。用DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白与转染的细胞共孵育,激光共聚焦显微镜下观察乙酰化低密度脂蛋白在细胞内的分布,并进行荧光定量分析。结果A类清道夫受体N端第1～27位氨基酸胞浆结构域缺失体可大量表达于转染细胞膜和细胞浆。在高浓度乙酰化低密度脂蛋白刺激下,A类清道夫受体N端第1～27位氨基酸胞浆结构域缺失体的细胞内定位发生变化,也可存在于转染细胞核内。A类清道夫受体N端第1～27位氨基酸胞浆结构域缺失体摄取DiI标记乙酰化低密度脂蛋白的能力较全长相比下降约60%,细胞粘附能力较全长A类清道夫受体相比则下降约8.9%。结论A类清道夫受体的N端第1～27位氨基酸结构对于A类清道夫受体在细胞内的定位表达、结合和摄取配体以及调节细胞粘附的功能具有重要的作用。
- 陈耀宇管晓翔王晓花乐珅柏惠陈秀英季勇范乐明陈琪
- 关键词：病理学与病理生理学A类清道夫受体粘附
- 蛋白激酶C抑制剂对小鼠腹腔巨噬细胞清道夫受体功能的影响被引量：1
- 2005年
- 目的观察细胞内蛋白磷酸化水平对清道夫受体功能的影响。方法用蛋白激酶C抑制剂星形孢菌素处理小鼠腹腔巨噬细胞,利用蛋白质印迹试验和放射自显影方法观察药物对细胞表面受体表达的影响,并分别测定对照组和处理组细胞对碘标记的氧化型低密度脂蛋白的结合、降解以及细胞内脂质蓄积的程度。结果0.4μmol/L蛋白激酶C抑制剂星形孢菌素可以促进细胞结合碘标记的氧化型低密度脂蛋白,增加细胞表面受体的表达,但抑制细胞降解碘标记的氧化型低密度脂蛋白,同时抑制细胞内胆固醇酯的蓄积。结论以上表明清道夫受体功能与细胞内蛋白质磷酸化水平密切相关。
- 周春蕾陈琪金艳陈秀英王南
- 关键词：病理学与病理生理学清道夫受体巨噬细胞蛋白激酶C抑制剂氧化型低密度脂蛋白
- M-CSF和STAUROSPORINE促进小鼠腹腔巨噬细胞巨涎蛋白摄取OX-LDL被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和蛋白激酶C抑制剂(STA)对小鼠腹腔巨噬细胞 (MPM)巨涎蛋白摄取氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)的影响。方法:M-CSF与蛋白激酶C抑制剂STA预处理MPM后制备膜蛋白,开展SDS-PAGE电泳及配体印迹试验,测定不同条件下巨涎蛋白结合[125I]OX-LDL的值。结果:MPM 膜蛋白经唾液酸酶预处理后,巨涎蛋白与[125I]OX-LDL的结合值为(2．45±0．46)ΜG/G细胞蛋白,显著低于对照组的 (58．38±1．78)ΜG/G细胞蛋白。用M-CSF与STA预处理MPM后,处理组与对照组巨涎蛋白结合配体[125I]OX-LDL 呈现一趋向饱和的浓度曲线,经线性回归得两类似平行的直线,M-CSF组BMAX(453．59±15．39)ΜG/G蛋白,显著高于对照组的BMAX(322．77±12．54)ΜG/G蛋白,而KD值变化不大。STA处理组BMAX(362．40±15．31)ΜG/G蛋白,KD值为 (15．10±2．67)MG/L,对照组BMAX为(264．76±11．29)ΜG/G蛋白,KD值为(17．43±2．98)MG/L。结论:巨涎蛋白接受M- CSF和STA的上调作用,通过增加其在MPM表面数目而促进对OX-LDL的摄取,促进泡沫细胞的形成。
- 周春蕾范乐明陈秀英王南陈琪
- 关键词：巨噬细胞集落刺激因子
