国家自然科学基金(30370595)
- 作品数：10 被引量：24H指数：2
- 相关作者：邹萍肖娟吴耀辉刘芳王红祥更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属协和医院滨州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 益康唑诱导白血病细胞凋亡的实验研究(英文)
- 2005年
- 目的为了研究益康唑(Econazole)诱导鼠粒单核白血病细胞WEHI-3凋亡的机制。方法利用Annexin-V/PI双染实验测定细胞凋亡,Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),并抽取WEHI-3 细胞内质网部分蛋白,利用Western blot测定Caspase-7、Caspase-12的蛋白表达。结果Econazole作用后WEHI-3出现典型的凋亡改变。细胞内游离[Ca2+]i较对照明显升高,Western blot结果显示随着细胞内钙离子浓度的提高,Caspase-12和Caspase-7表达逐渐增加。结论Econazole能诱导WEHI-3细胞凋亡,Caspase-12在此过程中起重要作用。
- 刘芳邹萍张敏吴耀辉肖娟
- 关键词：白血病细胞凋亡肿瘤细胞益康唑
- 氯氧甲苯咪唑诱导白血病细胞凋亡的实验研究被引量：1
- 2005年
- 为了研究氯氧甲苯咪唑(econazole)诱导鼠粒单核白血病细胞WEHI3凋亡的机制,利用AnnexinⅤ/PI双染实验测定细胞凋亡,Fura2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),并抽取WEHI3细胞内质网部分蛋白,利用Westernblot测定caspase7、caspase12的蛋白表达。结果显示:econazole作用后WEHI3出现典型的凋亡改变,细胞内游离[Ca2+]i较对照明显升高,caspase12和caspase7表达随着细胞内钙离子浓度的提高而逐渐增加。结论:econazole能诱导WEHI3细胞凋亡,caspase12在此过程中起重要作用。
- 刘芳邹萍张敏吴耀辉肖娟
- 关键词：细胞凋亡CASPASE-12
- 慢性粒细胞性白血病患者间充质干细胞的分离、纯化及向神经元样细胞分化的研究
- 2005年
- 目的研究慢性粒细胞性白血病(CML)骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、纯化、扩增以及在体外向神经元样细胞定向分化的能力。方法获取CML患者的骨髓MSCs,采用低血清培养液培养,瑞士染色观察其形态;流式细胞仪检测其免疫表型和细胞周期;逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测CML特异性表达的bcr/abl基因;分析骨髓MSCs染色体核型。全反式维甲酸(ATRA)诱导MSCs在体外分化为神经元样细胞,倒置相差显微镜观察神经元样细胞的形态,免疫组织化学染色法和Westernblot法检测神经丝蛋白(NF)和神经元烯醇化酶(NSE)的表达。结果CML来源的骨髓MSCs呈纤维样贴壁生长,体外培养易扩增;表达相关抗原CD29、CD44、CD105,不表达CD31、CD13、CD34、CD45、HLA DR;不表达bcr/abl融合基因,且具有正常的核型;不同扩增代数的MSCs在诱导剂的作用下呈现典型的神经元样细胞形态,NF、NSE呈阳性反应。结论CML患者骨髓中可以分离培养MSCs,它具有体外大量扩增并保持低分化状态的特性和定向分化为神经元样细胞的能力,是一种可用于神经系统疾病治疗的种子细胞。
- 唐晓琼赵智刚王红祥黎纬明邹萍
- 关键词：慢性粒细胞性白血病间充质干细胞细胞分化神经元样细胞
- Caspase-12短发夹状RNA在内质网应激性凋亡中的作用被引量：13
- 2005年
- 目的构建凋亡因子Caspase-12的短发夹状RNA(siRNA),观察其在体外对鼠粒单系白血病细胞WEHI-3细胞对凋亡的抵抗作用。方法设计并合成一对针对Caspase-12编码基因的siRNA,构建表达此siRNA的重组质粒psiRNA-Caspase-12,转染入WEHI-3细胞。检测胞内Cas- pase-12的mRNA和蛋白的表达。并检测转染后WEHI-3细胞的抗凋亡能力。结果酶切分析和测序证实构建成功,siRNA对Caspase-12的表达均有明显的抑制作用。染后WEHI-3细胞的抗凋亡能力增加。结论构建的重组质粒能有效抑制Caspase-12基因在白血病细胞株WEHI-3中的表达。并对内质网应激性凋亡具有抵抗能力。
- 刘芳邹萍陈敏张敏吴耀辉肖娟
- 关键词：RNA干扰CASPASE-12益康唑内质网白血病
- Thapsigargin逆转K562/A02细胞多药耐药性的实验研究被引量：2
- 2005年
- 目的 探讨内质网Ca2+ ATP酶抑制剂thapsigargin对白血病多药耐药细胞株K562/A02 化疗敏感性的影响。方法 用MTT比色法检测K562/A02细胞耐药性、thapsigargin的增殖抑制活性及其对K562/A02细胞化疗敏感性的影响; 丫啶橙(AO) /溴化乙锭(EB) 染色荧光显微镜观察thapsigargin处理后K562/A02 细胞形态改变; 流式细胞仪(FCM) 检测P 糖蛋白(P- gp) 表达; 荧光显微镜检测P-gp功能。结果 ①thapsigargin对K562 和K562/A02细胞的增殖抑制活性呈剂量和时间依赖性, K562/A02 细胞较K562 细胞对thapsigargin更敏感, thapsigargin诱导K562/A02细胞呈现典型的凋亡细胞形态学改变。②K562/A02细胞对阿霉素(ADM)、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP- 16)、高三尖杉酯碱(HHT) 和米托蒽醌(MXT) 均出现不同程度的耐药性; thapsigar-gin抑制K562/A02细胞P- gp功能而对其表达无影响, thapsigargin 能增加K562/A02 细胞对ADM、DNR、VCR、VP- 16、HHT和MXT的化疗敏感性。结论 Thapsigargin能诱导白血病多药耐药细胞株K562/A02 细胞凋亡并能部分逆转K562/A02的多药耐药性; thapsigargin的多药耐药逆转功能可能与其凋亡诱导作用和抑制P gp功能有关。
- 冯献启刘芳邹萍
- 关键词：THAPSIGARGINK562多药抗药性P-糖蛋白
- 钙离子浓度对鼠白血病WEHI-3细胞Caspase-3、Caspase-12和Bcl-2表达的影响
- 2005年
- 目的:研究细胞内钙离子浓度[ Ca2+]i的升高对鼠白血病WEHI 3细胞株中Caspase- 3、Caspase- 12和Bcl-2表达的影响。方法:在体外培养下,经不同浓度Econazole处理的WEHI- 3 细胞株用荧光指示剂Fura- 2/AM于双波长荧光分光光度仪上测定[ Ca2+]i。用western blot方法检测Caspase- 3、Caspase- 12和Bcl 2的表达。结果:随着[ Ca2+]i提高,Caspase 12表达逐渐增加,Bcl -2表达逐渐减弱,而Caspase- 3表达不变。结论:[ Ca2+ ]i的升高对WEHI- 3细胞株可诱发不通过Caspase- 3途径的细胞凋亡。
- 刘芳邹萍吴耀辉张敏肖娟
- 关键词：白血病[CA^2+]I
- TRAIL联合三氧化二砷对HL-60细胞生长及凋亡的影响被引量：2
- 2005年
- 目的 研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL) 联合三氧化二砷 (As2O3) 诱导急性早幼粒白血病细胞株HL 60凋亡, 探讨其应用于临床的可行性。方法 在对数生长期的 HL 60 细胞中分别加入不同浓度的TRAIL和1μmol/L的As2O3, 采用MTT比色法测定TRAIL和 As2O3 单独和联合应用时对细胞的生长抑制率, 并用流式细胞术检测细胞凋亡。结果 TRAIL联合 As2O3 可协同降低 HL 60 细胞活力, 抑制细胞增殖, 诱导细胞凋亡。当TRAIL浓度小于100μg/L时, 其作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强 (P<0 .05), 而当 TRAIL浓度再增高时, 对细胞生长抑制率和凋亡率的增强作用不明显 (P>0 .05)。结论 TRAIL与 As2O3 具有协同作用, 能高效杀灭白血病细胞。TRAIL是一种有望应用于白血病临床治疗的新型生物制剂。
- 王红祥邹萍肖娟
- 关键词：TRAILAS2O3HL-60细胞三氧化二砷凋亡率MTT比色法
- 美洛昔康对急性单核细胞白血病细胞增殖和凋亡作用的研究被引量：4
- 2006年
- 急性单核细胞白血病（acute monocyte leukemia，M5）有其独特的核型特征和临床表现，血液病研究者一直以来都在努力寻求治疗M5的新方法。目前，环氧化酶2（cyclooxygenase-2，COX-2）抑制剂在消化系统肿瘤等实质肿瘤发生、发展中的作用已得到广泛研究，最近有研究表明，COX-2也参与慢性髓性细胞白血病等血液肿瘤的发生和发展，并起着重要的作用，但COX-2抑制剂在急性单核细胞白血病中的作用尚未见报道。
- 李秋柏游泳陈智超吕建邵菁王红祥邹萍
- 关键词：急性单核细胞白血病细胞增殖凋亡作用美洛昔康COX-2抑制剂环氧化酶
- 多种化疗药对凋亡抑制蛋白Survivin在HL-60细胞中表达影响的研究(英文)
- 2006年
- 目的通过研究HL-60细胞在多种化疗药物作用后mRNA和蛋白的改变,初步探讨Survivin基因和耐药性之间的关系。方法用合适浓度的柔红霉素(DNR)、米托蒽醌(MIT)和三氧化二砷(As2O3)作用于HL-60细胞,随后用RT-PCR检测给与药物作用的第1天和第3天HL-60细胞中Survivin mRNA的表达情况,用Western blot检测Survivin蛋白的表达情况。结果在给予化疗药的第1天,3组HL-60细胞中Survivin mRNA表达水平全部降低:其中DNR下降了10％,MIT下降40％(P< 0．01),As2O3下降了25％(P<0．01)。在第3天,给予DNR和MIT组的HL-60细胞中Survivin mRNA表达较第1天有明显的升高, 分别上升20％(P<0．05)和65％(P<0．01);但给予As2O3组的Survivin mRNA表达仍持续降低,仅为第1天的68％(P<0．01)。 Western blot检测发现给予DNR和MIT作用3天后的HL-60细胞中Survivin蛋白含量分别升高了14％和11％,而给予As2O3组则下降了82％。结论白血病细胞给予化疗药后Survivin表达降低然后升高的现象可能与化疗中耐药性的发生有关;而三氧化二砷因有着不同的作用机制,可能会在逆转耐药性上发挥重要的作用。
- 吴耀辉邹萍张敏刘芳陈建华
- 关键词：白血病化学治疗米托蒽醌
- 毒胡萝卜素诱导K562细胞凋亡及其调控机制的研究被引量：2
- 2006年
- 目的探讨毒胡萝卜素(TG)对K 562细胞凋亡诱导作用及其调控机制。方法Hoechst 33258染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态改变;A nnex inⅤ-F ITC/P I双染检测细胞凋亡率变化;RT-PCR检测bcl-2、bax、bcl-XL、X IAP、surv iv in基因表达变化并通过免疫组织化学技术检测其在蛋白质水平的表达。结果TG作用后,K 562细胞呈典型的凋亡细胞形态;细胞凋亡率均明显升高(P<0.05),且在一定范围内呈浓度和时间依赖性;bax、bcl-XL、X IAP mRNA和蛋白质表达上调,surv iv in mRNA和蛋白质表达下调,bcl-2/bax比率降低。结论TG可诱导K 562细胞发生内质网应激反应性凋亡,其机制可能与B ax表达上调、surv iv in表达下调有关,bcl-XL、X IAP表达上调可能发挥拮抗凋亡的作用。
- 冯献启聂淑敏苏湛肖娟邹萍
- 关键词：毒胡萝卜素细胞凋亡凋亡调节基因
