国家自然科学基金(30571354) 作品数:10 被引量:38 H指数:4 相关作者: 王睿勇 史玉峰 王玲 朱晓飞 赵平芝 更多>> 相关机构: 南京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省科技支撑计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 环境科学与工程 更多>>
地衣芽孢杆菌1411-1羽毛角蛋白固体发酵工艺的优化及角蛋白酶的初步研究 被引量:5 2009年 对角蛋白高效降解菌地衣芽孢杆菌菌株1411-1固体发酵条件进行了优化,着重考察了培养基含水量、起始pH值、温度、接种量及外源添加物的影响,并确定了优化的发酵周期,同时对角蛋白酶的提取进行了初步研究。研究结果表明,1411-1的最适固体发酵条件为:培养基含水量75%,pH值10.0,温度40℃,菌液接种量0.15ml/g,发酵周期88h,氮源对固体发酵有显著的抑制作用,碳源的影响不显著;角蛋白酶的最适提取条件为:以碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(pH值10.0)作为提取剂,4℃下提取60min。 李小会 何斌 李雪影 王玲 史玉峰 王睿勇关键词:地衣芽孢杆菌 固体发酵 角蛋白酶 地衣芽孢杆菌nju-1411-1降解羽毛角蛋白过程中含硫化合物的变化 被引量:3 2010年 利用自行筛选到的1株角蛋白降解细菌———地衣芽孢杆菌n ju-1411-1发酵羽毛角蛋白,发酵2 d时角蛋白降解率、角蛋白酶活、生物量等指标就达到了最大值。降解率的变化和角蛋白酶活力的变化基本是一致的,并且酶的活力明显高出笔者所在实验室筛选的其他2株角蛋白降解菌———链霉菌B221和真菌C281。发酵过程中,硫元素以硫酸根、亚硫酸根、硫离子、硫代硫酸根、巯基化合物、二硫键化合物、半胱氨酸、胱氨酸以及S-磺酸半胱氨酸类物质等9种形态存在,没有检测到过硫化物、多硫化物、连多硫酸盐、芳基类硫代磺酸盐、烷基类硫代磺酸盐等其他形式的含硫化合物。其中硫酸根、亚硫酸根、硫代硫酸根和S-磺酸半胱氨酸类物质是主要形态,而其他5种物质含量相对较少。硫酸根和硫代硫酸根是硫元素代谢的终产物,其中硫酸根在自然状态下和氧化酶的作用下都可以产生,而硫代硫酸根是微生物代谢的产物。亚硫酸根和S-磺酸半胱氨酸类物质出现相互消长的关系,表明硫解作用的存在。发酵液的可溶性物质中,二硫键主要以胱氨酸的形式存在;除了少量的半胱氨酸以外,巯基还存在于多肽和寡肽中。 聂庆霁 史玉峰 王玲 何斌 李雪影 王睿勇关键词:地衣芽孢杆菌 角蛋白 降解机制 含硫化合物 羊毛角蛋白降解菌的筛选鉴定及液体发酵条件优化 被引量:1 2021年 从长年堆积羊毛的土壤中筛选获得3株具有角蛋白降解功能的菌株,经形态观察和16S rRNA测序初步鉴定,并分别命名为链霉菌NJU-05、金黄杆菌NJU-07、地衣芽孢杆菌NJU-10。同时,进行液体发酵工艺优化,得到NJU-05菌株实验室水平的最佳液体发酵条件:温度为40℃,pH值为9.0,发酵周期为3 d;NJU-07菌株:温度为35℃,pH值为9.0,发酵周期为4 d;NJU-10菌株:温度为35℃,pH值为9.0,发酵周期为4 d。 龙宏燕 梁文英 陈风蔚 王睿勇关键词:羊毛角蛋白 液体发酵 降解菌 链霉菌B221降解角蛋白的扫描电镜观察 被引量:3 2011年 应用扫描电子显微镜直接观察链霉菌B221在固体发酵条件下,菌丝与羽毛的相互作用,对比酶作用后羽毛结构,深入了解菌状微生物降解角蛋白机制及菌丝在降解过程中的作用。结果显示,灭菌处理过程有助于降解启动,链霉菌B221菌丝穿透作用在降解前期明显,菌丝穿透羽毛表面,沿羽毛纵向生长,大面积剥落羽毛表面,角蛋白酶活力在前4 d较高,生物量在第4天达到最高,水溶性物质与可溶性蛋白在整个降解过程中的变化与酶活力变化不完全一致。链霉菌B221降解角蛋白过程中机械作用起重要作用,菌丝的生长压力穿透且剥落羽毛表层结构,更多酶作用位点暴露出来,极大提高酶解效率。 何斌 许泽安 李雪影 史玉峰 王玲 王睿勇关键词:扫描电子显微镜 降解机制 链霉菌 耐热链霉菌B221降解羽毛角蛋白的固体发酵条件研究 被引量:11 2007年 以羽毛粉为底物,研究链霉菌Streptomycessp.B221固体发酵条件,分析培养基初始含水量、温度、pH值、接种量、培养基氮源、碳源等参数对角蛋白固体发酵的影响。结果表明,该菌在培养基含水量为35 ml BM/10g羽毛、40℃、pH值9.0、接种量为20%时发酵效果最好,最佳发酵周期为6 d。本研究为进一步工业化生产提供必要的试验依据。 董荣斌 张玲 朱晓飞 赵平芝 王睿勇关键词:链霉菌 生物降解 链霉菌B221与地衣芽孢杆菌NJU-1411-1固体混合发酵工艺的优化 被引量:1 2013年 链霉菌B221和地衣芽孢杆菌NJU-1411-1为2株高效角蛋白降解菌株。采用固体发酵体系,系统研究不同接种顺序、接种时间、接种比例、接种量、培养基起始pH值、培养基含水量对2株菌混合发酵的影响。结果表明,链霉菌B221与地衣芽孢杆菌NJU-1411-1混合发酵的最优条件为:链霉菌B221与地衣芽孢杆菌NJU-1411-1接种比例为4∶1,接种量20%,2种菌同时接种,起始pH值为9.0左右,温度40℃培养6 d。最佳混合发酵工艺参数的获得为羽毛角蛋白资源生物技术利用奠定了基础。 尹浩力 许泽安 崔丹丹 王睿勇关键词:链霉菌 地衣芽孢杆菌 混合发酵 角蛋白酶 链霉菌B221的角蛋白降解机制初探 被引量:13 2007年 利用本实验室自行分离得到的链霉菌B221液体发酵分解羽毛角蛋白,在第2d到第3d角蛋白降解最为迅速,5d后角蛋白降解率达到82.7%。发酵液的无细胞上清液中检测到角蛋白酶活,最大酶活出现在第4d。在角蛋白降解率与角蛋白酶活之间的不完全对应,揭示可能还存在非酶降解途径。硫酸盐是角蛋白降解过程中硫元素的主要转化形式。同时在发酵液中检测到亚硫酸盐,其含量变化与酶活、降解率、可溶性蛋白、巯基化合物的变化存在很强的相关性,表明亚硫酸盐在角蛋白降解中可能起到非常关键的作用。链霉菌B221降解角蛋白的过程中不但存在角蛋白酶降解途径,而且存在非酶降解途径—亚硫酸分解作用。 朱晓飞 张玲 赵平芝 王睿勇关键词:降解机制 含硫化合物 4种含硫化合物对链霉菌B221固体发酵羽毛角蛋白过程的影响 被引量:1 2014年 利用自行分离得到的链霉菌B221固体发酵羽毛角蛋白,设置硫酸钠、亚硫酸钠、硫代硫酸钠和二硫苏糖醇4种含硫化合物添加组,分析发酵后7 d的发酵物中角蛋白酶活力、可溶性蛋白含量以及各种含硫化合物的消长变化规律。结果表明添加的4种含硫化合物对角蛋白酶都具有激活作用,但没有显著增加发酵产物中可溶性蛋白的含量;亚硫酸盐含量、二硫键化合物含量和S-磺酸半胱氨酸类物质含量之间存在着密切的相关性,B221固体发酵角蛋白过程中存在着亚硫酸盐解作用;硫代硫酸盐含量、二硫键化合物含量、S-磺酸半胱氨酸类物质含量、巯基化合物含量之间存在着密切的相关性,B221固体发酵角蛋白过程中存在着另一种降解机制——硫代硫酸盐解作用。 罗蕾 史玉峰 崔丹丹 姜婻婻 王玲 王睿勇关键词:含硫化合物 亚硫酸盐 硫代硫酸盐 链霉菌B221与地衣芽孢杆菌NJU-1411-1固体发酵废弃羊毛角蛋白工艺优化和工业化产品分析 被引量:4 2019年 采用地衣芽胞杆菌NJU-1411-1和链霉菌B221,通过固体发酵降解羊毛角蛋白,研究培养基含水量、培养基初始pH值、发酵温度、发酵周期等发酵条件的优化。结果表明,2株菌的最佳固体发酵工艺条件相同,培养基起始含水量为15 mL/10 g羊毛粉,培养基最佳起始pH值为8~9,最适发酵温度为40℃,发酵周期为5 d。工业化发酵产品的氨基酸含量、体外消化率、动物消化率等方面研究结果表明,发酵产品的氨基酸含量为52. 34%;发酵后体外消化率由67. 44%提高至82. 20%;动物体内消化率达到85. 43%。这些结果表明发酵角蛋白产品作为饲料蛋白添加剂完全可行,可用于替代或部分替代鱼粉、豆粕等蛋白饲料原料。 权金盼 李玉妹 龙宏艳 冯抗抗 王睿勇关键词:羊毛角蛋白 微生物降解 固体发酵 耐热链霉菌B221产生角蛋白酶的液体发酵条件研究 被引量:7 2007年 以羽毛粉为底物,采用链霉菌(Streptomycessp.)B221液体发酵生产角蛋白酶,考察了温度、pH值、氮源、碳源以及接种菌量对角蛋白酶生成的影响。结果表明,该菌能够分解羽毛角蛋白,产生角蛋白酶,且在40℃、pH值为9.0、接种量为5%时酶活力最强。与培养基中只含有羽毛的发酵过程相比,添加蔗糖更有利于提高角蛋白酶的活性,而葡萄糖和可溶性淀粉对酶的活性则有不同程度的抑制作用;添加NH4C l和KNO3对角蛋白酶活性均有一定的促进作用,而尿素和蛋白胨则对角蛋白酶活性有抑制作用。本试验研究结果为进一步利用微生物技术手段开发羽毛角蛋白资源奠定了基础。 张玲 朱晓飞 汤睿 赵平芝 王睿勇关键词:链霉菌 角蛋白酶 生物降解 产酶条件 羽毛