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mIL-4昆虫表达载体pIZT/V5-His的构建及其高效表达被引量：7: 2006年; 目的:构建昆虫表达载体pIZT/V5-His的基础上,建立能稳定高效表达mIL-4的昆虫细胞系。方法:PCR体外扩增mIL-4,将目的基因mIL-4和昆虫表达载体pIZT/V5-His用EcoRI和XbaI做双酶切,通过T4 DNA连接酶构建成含mIL-4目的基因的表达载体pIZT/V5-His-IL4。采用脂质体法将重组DNA转染到生长良好的昆虫细胞Sf9中。转染后的第3天,用ELISA方法检测转染细胞的培养上清中分泌型蛋白mIL-4的含量。结果:转染后的昆虫细胞Sf9能产生大量的mIL-4,含量可达1 mg.L-1,明显高于对照组(0.003 mg.L-1)。结论:昆虫表达载体pIZT/V5-His可用于mIL-4的高效表达。; 孙延波李菁华史红艳; 关键词：白细胞介素4 昆虫细胞SF9 基因表达

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美国国立卫生研究院基金(NIH48568)