江苏省自然科学基金(BK2006135)
- 作品数：17 被引量：67H指数：5
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- 不同pH值精子营养液对男性精液各参数的影响以及机制的初步探讨被引量：3
- 2007年
- 目的研究不同 pH 值的精子营养液对男性精液各参数的影响。方法采用精子尾部低渗肿胀实验、毛细管穿透实验分别检测了15名健康供精者的精液在 pH 值分别为4.2、5.2、6.2、7.2(为实验对照组)、8.2、9.2、10.2、11.2下的精子的活动率、活力、肿胀率,毛细管爬高高度,同时使用比色法检测精液在不同 pH 值下精子的钠-钾交换 ATP 酶(Na^+/K^+-ATP 酶)的活性变化。结果精子在中性和偏碱的溶液中活力较强,在 pH 值为4.2、11.2时,由于溶液 pH 值过酸或过碱,精子活动被完全抑制。以 pH=7.2为对照组,除 pH 值为8.2组外,其余各组在精子尾部肿胀率、毛细管爬高高度水平上与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);pH 值为5.2、6.2、9.2、10.2各组在精子活动率、活力上与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。同时在 pH 值为5.2、9.2、10.2下的精子肿胀率与精子活动率有相关性(r 值分别为0.633、0.729、0.713,P<0.05),pH 值为5.2、8.2、9.2、10.2下的精子肿胀率与精子的活力也有相关性(r 值分别为0.546、0.532、O.826、0.723,P<0.05)。精子在低于或高于正常精液 pH 值条件下,Na^+/K^+-ATP 酶的活性均有不同程度地下降,精子营养液在 pH 值为4.2、9.2、10.2、11.2时,Na^+/K^+-ATP 酶的活性分别为(0.62±0.38)、(1.51±1.08)、(0.81±0.20)、(0.75±0.28)μmolPi/mgprot/hour,与对照组(pH=7.2)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在低于或高于正常精液 pH 值条件下,氢离子浓度可能引起精子 Na+~/K^+-ATP酶活性的下降,从而影响精子的活动率、活力、肿胀率和毛细管爬高高度,提示女性阴道 pH 环境改变也是引起不孕不育的原因之一。
- 蒋超黄祝徐会茹王晨阳侯林崔英霞黄宇烽姚兵
- 关键词：氢离子浓度精子
- 荧光定量聚合酶链反应检测去颌下腺大鼠睾丸Bcl 2和Bax mRNA的改变被引量：2
- 2008年
- 目的观察切除颌下腺对大鼠睾丸Bax和Bcl 2 mRNA表达的影响。方法切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,提取睾丸总RNA,反转录,设计特异性引物和Taqman探针,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测Bax和Bcl 2 mRNA的改变。结果随着颌下腺切除时间的延长,实验组大鼠睾丸Bax和Bcl 2 mRNA的比值显著升高,与对照组比较,有显著性差异(P<0.01)。结论颌下腺切除大鼠睾丸Bax和Bcl 2 mRNA比值明显升高,提示颌下腺切除所致的大鼠睾丸生精细胞的凋亡可能是由Bax和Bcl 2介导的线粒体途径进行,但Fas/FasL是否参与该凋亡过程还有待进一步研究。
- 王晨阳马百坤侯林徐会茹黄祝蒋超黄宇烽姚兵
- 关键词：荧光定量聚合酶链反应颌下腺睾丸BCL
- 荧光定量RT-PCR检测去下颌下腺大鼠睾丸annexin 5 mRNA和Bax mRNA的表达
- 2008年
- 目的观察下颌下腺切除对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)和Bax mRNA表达的影响。方法切除大鼠下颌下腺,分别于术后14d、28d和42d处死大鼠,提取睾丸总RNA,反转录,设计特异性引物和Taqman探针,荧光定量RT-PCR检测annexin 5和Bax mRNA的表达。结果荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,切除下颌下腺14d和28d后,实验组大鼠睾丸annexin 5 mRNA分别升高了38.5%和55.3%,但无显著性差异;实验组大鼠睾丸Bax mRNA分别升高了70.6%和80.5%,其升高具有显著性差异(P<0.05和P<0.01);切除下颌下腺42d时,实验组大鼠睾丸annexin 5和Bax mRNA分别升高5.6%和2.3%,几乎恢复到与对照组相同的水平。结论下颌下腺切除后14d和28d可造成大鼠睾丸annexin 5和Bax mRNA的表达升高;切除后42d,annexin 5和Bax mRNA又恢复到正常水平。
- 王晨阳马百坤侯林徐会茹黄祝蒋超黄宇烽姚兵
- 关键词：下颌下腺睾丸ANNEXINBAX荧光定量RT-PCR
- 抗FSH自身抗体对大鼠睾丸生精功能影响的初步研究被引量：1
- 2007年
- 目的:建立抗FSH自身抗体大鼠模型,同时研究抗FSH自身抗体对雄性大鼠生精功能的影响。方法:30只SD大鼠(21d龄),随机分为实验组、对照组,各15只。合成大鼠FSHβ亚基上一段特异性氨基酸序列(18肽),将合成多肽与钥孔戚血蓝素(keyholelimpethemocyanin,KLH)偶联,免疫SD大鼠,作为实验组。对照组大鼠用KLH免疫。初次免疫之后,每隔2周加强免疫1次,共7次,于第3次加强免疫后1周(即,免疫第49d)眼眶取血测定血清抗体效价,之后每隔两周测一次抗体效价,至实验结束。并于免疫第77d、91d和105d时,分别处死实验组和对照组大鼠各5只,用光镜和电镜观察大鼠睾丸生精小管结构和附睾精子结构的变化,计数附睾尾精子数量及肿胀精子百分率,并用ELISA法检测大鼠血清T水平。结果:免疫第49d后,实验组大鼠血清抗18肽-KLH抗体效价为1∶200,免疫第63d后,抗体效价达到1∶400,之后抗体效价一直维持在1∶400。免疫第91d后,实验组大鼠附睾尾肿胀精子百分率显著低于对照组(60.4±6.23vs50.60±3.05,P<0.05);免疫第105d后,实验组大鼠生精小管内生精细胞数量及管腔内精子数量均减少,且附睾尾精子数量(46.08±6.56vs32.53±3.41)和肿胀精子百分率(60.60±5.86vs48.60±3.85)均显著低于对照组(P<0.05),而血清T水平显著高于对照组(P<0.05)。结论:抗FSH自身抗体可能会引起睾丸生精障碍。
- 徐会茹施一敏侯林王晨阳蒋超黄祝姚兵
- 关键词：精子数量
- 男性抗FSH抗体与生殖相关激素的增龄性变化
- 2007年
- 目的检测抗FSH抗体在不同年龄段男性中的分布趋势,分析FSH、LH、T和FTI的增龄性变化,并探讨不同年龄男性体内抗FSH抗体的存在与这些激素水平间的关系。方法分别采用放射免疫法和本实验室建立的抗FSH抗体ELISA检测法评价192例不同年龄段男性血清FSH、LH、T和SHBG的水平及血清抗FSH抗体,并根据血清总T和SHBG水平计算游离睾酮指数(FTI)。结果60～89岁组的男性抗FSH抗体阳性率显著高于18～59岁组(P<0.05)。血清FSH和LH水平与年龄呈正相关(r=0.305,P<0.001;r=0.246,P=0.002)。血清T水平和FTI与年龄呈负相关(r=-0.461,P=0.000;r=-0.407,P=0.000)。男性体内抗FSH抗体的存在对血清LH、T、FTI和SHBG水平无明显影响,但60～89岁组男性抗FSH抗体阳性血清的FSH水平显著低于抗FSH抗体阴性血清的水平(P<0.05)。结论抗FSH抗体的存在与男性衰老可能存在一定关系,具体机制尚待进一步研究。
- 徐会茹王晨阳侯林蒋超黄祝王国洪姚兵
- 关键词：FSH
- 精子获能液的pH对精子胞浆内Ca^(2+)水平影响机制的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的研究不同pH值的精子获能液对精子胞浆内Ca2+水平的影响。方法取15例正常生育男性精液,离心沉淀所得精子用不同pH值(4.2、5.2、6.2、7.2、8.2、9.2、10.2、11.2)的精子获能液处理,用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分别检测精子胞浆内游离钙离子的平均荧光强度值。结果流式细胞仪测定结果显示,与pH7.2获能液的荧光值(209.94±89.02)相比,获能液pH为6.2时,精子胞浆内钙离子的荧光强度值(161.91±53.92)降低(P<0.05),pH为8.2、9.2时差异不显著(P>0.05),其余各种pH值的获能液均较pH7.2获能液荧光强度显著降低(P<0.01);激光共聚焦显微镜测定结果显示,与pH7.2获能液荧光值(200.87±27.43)相比,pH为6.2时荧光强度值(152.18±38.05)也显著降低(P<0.05),pH为8.2、9.2时没有差异(P>0.05),其余各组与pH7.2获能液相比,均有显著性降低(P<0.01)。结论不同pH值的精子获能液,可能影响精子胞浆内的钙离子水平的变化,进而导致精子的各种生理活动的改变。
- 蒋超黄祝吴永明徐会茹王晨阳侯林崔英霞姚兵
- 关键词：CA^2+流式细胞仪激光共聚焦显微镜
- 恐惧应激对雄性大鼠生殖激素的影响被引量：10
- 2007年
- 目的:观察比较不同恐惧应激状态下,大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾酮(T)的变化。方法:建立SD大鼠的急性应激、亚急性应激和慢性应激模型,分别在麻醉后心脏取血,酶联免疫分析法测定并比较各实验组及相应对照组大鼠血清FSH、LH和T的含量。结果:急性应激组大鼠血清FSH、LH和T水平略高于对照组大鼠,但无显著差异(P>0.05);亚急性应激组大鼠血清FSH、LH和T水平均低于其对照组,但都无显著差异(P>0.05);慢性应激组大鼠血清FSH、LH和T均低于对照组大鼠,其中LH水平的变化有显著差异(P<0.05);而T水平有极显著差异(P<0.001)。结论:急性应激、亚急性应激和慢性应激能影响大鼠血清FSH、LH和T浓度,尤其慢性应激引起的体内激素的变化最大,提示应激对大鼠生理功能的维持以及生殖保护具有干扰作用。
- 侯林徐会茹王晨阳黄祝蒋超黄宇峰崔英霞戈一峰恽时锋姚兵
- 关键词：卵泡刺激素黄体生成素睾酮
- 恐吓应激对SD大鼠胃GnRH受体表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察恐吓应激状态下SD大鼠胃内促性腺素释放素受体(GnRHR)的分布和表达变化。方法建立SD大鼠恐吓应激模型,分别取急性应激组(2~12h)、慢性应激组(1d^4w)和相应对照组大鼠的胃,利用免疫组织化学和western blotting(WB)法检测GnRHR在各组大鼠胃中的的分布和表达变化。结果免疫组织化学显示:胃底腺壁细胞、胃小凹上皮细胞呈GnRHR阳性。阳性反应物质定位于胞膜和胞质中,胞核呈阴性。WB结果表明:应激从2h到2w时,GnRHR的表达量与对照组相比P<0.01,应激从3w到4w时,GnRHR的表达量与对照组相比P<0.01,差异均有统计学意义。结论GnRHR随着恐吓应激时间的延长,在大鼠胃中表达量改变。提示在恐吓应激中,GnRH对消化功能具有潜在的生理调节功能。
- 黄美娟黄祝蒋超徐会茹王晨阳侯林姚兵
- 关键词：恐吓应激
- 不育患者精子活力与精浆及精子核DNA完整性关系的初步研究被引量：14
- 2008年
- 目的探讨不育患者精子活力与精浆及精子DNA完整性的关系。方法50例男性不育患者,按a+b级活力分为2组,a+b级精子百分率≥50%为Ⅰ组,<30%为Ⅱ组,Ⅰ组25例,Ⅱ组25例。各组精液分成两部分,一部分用于两组间精浆互换,另一部分用作各自的对照。精浆互换后37℃温育40min、90min,用计算机辅助精液分析系统(CASA)分析精浆互换前后及其对照组的a+b级精子百分率。同时检测这些患者的精浆α-葡糖苷酶、酸性磷酸酶和果糖含量,并用吖啶橙荧光染色检测随机抽取的40名患者精子核DNA的完整性。结果Ⅰ组与Ⅱ组精浆置换后,温育40min和90min时Ⅰ组的精浆置换组精子活力为27.5±18.7、25.8±17.1,比相应的对照组33.9±17.3、26.0±15.6降低;Ⅱ组的精浆置换组精子活力为16.7±11.6、14.4±10.5,比相应的对照组12.2±8.7、11.2±9.3升高;两组的精浆置换组与相应的对照组的精子活力均随着温育时间的延长而降低,但均无统计学意义。精浆果糖、酸性磷酸酶与精子活力间没有相关性,而精浆α-葡糖苷酶与Ⅰ组的精子活力呈正相关。精子活力与精子核DNA的完整性呈正相关性。结论精子活力主要与精子结构有关,精浆成分也是决定精子活力的一个因素。
- 黄祝蒋超徐会茹王晨阳侯林姚兵
- 关键词：精子活力精浆精子DNA完整性不育患者
- 去颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5表达的影响被引量：8
- 2007年
- 目的:观察切除颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)表达的影响。方法:切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,Western blotting和免疫组织化学分析大鼠睾丸annexin 5表达及分布的改变。结果:Western blotting结果显示,与对照组相比,切除颌下腺14 d和28 d后,实验组大鼠睾丸annexin 5的表达分别升高了27.5%和35.2%,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01);切除颌下腺42 d后,实验组大鼠睾丸annexin 5又恢复到与对照组几乎相同的水平。免疫组织化学显示,annexin 5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但实验组annexin 5免疫组化显色较深,说明annexin 5的表达升高,这与Western blotting的结果基本一致。结论:颌下腺切除影响大鼠睾丸annexin 5的表达,颌下腺切除早期(14、28 d)颌下腺分泌的某些生物活性物质缺乏,而造成睾丸内annexin 5表达的升高。颌下腺切除后期(42 d),机体内因颌下腺切除而缺乏的某些物质在体内又重新得到了补偿,对睾丸annexin 5的影响消除,睾丸annexin 5的表达也恢复到正常水平。其内在具体机制尚待进一步阐明。
- 王晨阳侯林徐会茹蒋超黄祝崔英霞戈一峰黄宇烽恽时锋姚兵
- 关键词：颌下腺睾丸
