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重组人乳头瘤病毒58型L1蛋白在Sf9细胞中的表达条件优化: 2010年; 目的采用昆虫细胞-杆状病毒表达系统扩增人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）58型L1蛋白基因,确定L1蛋白表达的最佳条件.方法取处于埘数生长期的S19细胞以不同的感染复数（MOI）值扩增病毒,用噬斑试验检测病毒滴度,确定扩增重组病毒的最适条件用间接免疫荧光法判断目的蛋白表达情况通过蛋白印迹法测定不同的表达时间和MOI值条件下目的蛋白表达量,确定目的蛋白的最佳表达条件.结果处于对数生长期的细胞以MOI值为0.5表达48 h条件下扩增含HPV58 LI基因的重组杆状病毒,滴度最高,可达5×108pfu/ml 以MOI值为5.0表达72 h获得最佳的目的蛋白表达量.结论确定了扩增病毒和表达相应目的蛋白的最佳条件.; 于世荣孙丽媛刘君丁军颖李军张夕燕张振龙; 关键词：人乳头瘤病毒基因表达重组蛋白质类

不同浓度葡萄糖对sf9细胞生长特性及蛋白表达的影响: 2010年; 目的研究不同浓度葡萄糖对昆虫细胞sf9生长特性及蛋白表达的影响。方法将对数生长期的s丹细胞在含不同浓度葡萄糖的Hyclone无血清培养基（serum—free medium，SFM）中培养。采用台盼蓝拒染法监测细胞密度，分析比较不同浓度葡萄糖对s固细胞生长特性的影响。然后，将对数生长期的sf9细胞在含不同浓度葡萄糖的HycloneSFM中培养表达人乳头瘤病毒（humanpa pillomavims，HPV）18型L1蛋白。以蛋白印迹法鉴定并分析比较不同浓度葡萄糖对s19细胞表达蛋白的影响。结果4个不同葡萄糖浓度实验组的细胞增殖速率及最大细胞密度均大于不加葡萄糖的对照组。两个较低葡萄糖浓度组的细胞凋亡率低于对照组，最高葡萄糖浓度组的细胞凋亡率则高于对照组。另外，加葡萄糖的8个实验组的蛋白表达量均高于不加葡萄糖的对照组，其中，3个较高葡萄糖浓度组显示有目的蛋白的降解条带。在另外5个没有出现降解条带的实验组中，以培养过程中间补加葡萄糖浓度至15mmol／L的实验组蛋白表达量最大。结论葡萄糖可促进s移细胞增殖，不同浓度葡萄糖对细胞凋亡的影响不同；适宜浓度的葡萄糖可提高sf9细胞表达完整外源蛋白的量。; 丁军颖张振龙李军赵建英于世荣许雪梅; 关键词：葡萄糖昆虫细胞增殖蛋白表达

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国家高技术研究发展计划(2007AA022475)

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