湖南省自然科学基金(07JJ6155)
- 作品数：9 被引量：35H指数：3
- 相关作者：苏琦谭晖易岚吉晓霞何洁更多>>
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- 二烯丙基二硫对人白血病HL-60细胞凋亡启动过程的影响被引量：5
- 2009年
- 背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)作为一种抗肿瘤物质日益受到关注。本研究在建立DADS启动HL-60细胞凋亡模型的基础上,研究DADS启动人白血病HL-60细胞凋亡的相关蛋白。方法:提取未处理HL-60细胞和3.6mg/LDADS处理2d的HL-60细胞的总蛋白,双向电泳分离细胞总蛋白质,绘制图谱,PDQuest软件分析,切割差异蛋白质,进行质谱分析、生物信息学分析,Western blot以及RT-PCR验证部分差异蛋白。结果:对照组和处理组蛋白质表达量相差2倍以上的点有29个,其中22个上调,7个下调。质谱分析和数据库搜索鉴定了9个蛋白质点,其中7个蛋白质点有意义,这些蛋白功能分别与信号转导、基因转录及调控、细胞骨架、细胞新陈代谢等有关。Western blot结果显示DADS处理后Rac2(ras-related C3 botulinum toxin substrate2)蛋白表达明显上调,RT-PCR显示DADS处理后Rac2表达增强。结论:Rac2等蛋白参与了DADS诱导的HL-60细胞凋亡,但其具体机制还有待于进一步研究。
- 易岚曾希谭晖葛玲吉小霞林敏苏琦
- 关键词：DADS白血病HL-60细胞蛋白质组学
- 二烯丙基二硫上调p21、STAT1和CAMTA1诱导人白血病HL-60细胞分化被引量：12
- 2010年
- 目的应用抑制性消减杂交(SSH)研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞分化的分子机制。方法在前期工作中,我们成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病分化的cDNA文库,本实验通过挑取文库中的30个克隆制备质粒并酶切分析、测序和同源性检索。结果18个克隆均具有100～600bp左右的插入片段,测序分析发现10个差异表达基因,分别与细胞周期、信号转导、代谢、RNA结合等有关。RT-PCR验证其中上调的3个基因:p21、STAT1和CAMTA1,结果与SSH相符。结论p21、STAT1和CAMTA1表达上调与DADS诱导白血病分化密切相关。
- 黄卫国谭晖易岚何洁苏琦
- 关键词：二烯丙基二硫白血病HL-60细胞分化P21STAT1
- DADS通过MAPK和PI3K/Akt信号通路下调Mcl-1诱导白血病细胞凋亡被引量：3
- 2011年
- 目的:二烯丙基二硫(DADS)为天然植物大蒜中的提取物,能抑制多种肿瘤细胞生长,本文探讨丝裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)、3-磷酸肌醇激酶(PI3K/Akt)信号通路和Bcl-2家族成员在DADS诱导的人白血病HL-60细胞凋亡中的作用。方法:利用流式细胞术检测DADS诱导的白血病细胞凋亡,Western blot研究MAPKs和PI3K/Akt信号通路在DADS诱导的人白血病HL-60细胞凋亡中的变化及对Bcl-2家族凋亡相关蛋白表达的影响。结果:DADS呈浓度和时间依赖性地诱导人白血病HL-60细胞凋亡,在此过程中ERK/MAPK和PI3K/Akt信号通路被抑制,而p38MAPK信号通路被激活,ERK/MAPK和PI3K/Akt信号通路通过降低Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)和升高Bax的表达诱导人白血病细胞凋亡,而p38MAPK则不是通过调控Mcl-1和Bax的表达诱导人白血病细胞凋亡,进一步利用RNA干扰技术沉默Mcl-1基因可增加DADS对HL-60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。结论:MAPK和PI3K/Akt信号通路通过下调Mcl-1的表达参与了DADS诱导的HL-60细胞凋亡作用。
- 谭晖吉晓霞易岚夏红王娟何洁凌晖苏琦
- MCL1蛋白在胃癌中的表达及临床意义被引量：6
- 2008年
- 目的:MCL1(myeloid cell leukemia-1)与多种恶性肿瘤的发生、发展及转移相关。本文从临床样本和细胞水平检测胃癌组织中MCL1蛋白的表达水平,探讨MCL1蛋白在胃癌发生、发展中的作用。方法:采用S-P免疫组化法检测正常胃黏膜、癌旁胃黏膜和胃癌组织芯片中MCL1蛋白的表达,Western blot检测MCL1蛋白在人胃癌BGC823、SGC7901、MKN28细胞中的表达。结果:免疫组化结果显示,MCL1蛋白表达定位于细胞的胞浆,着色呈黄色至棕黄色;正常胃黏膜、癌旁胃黏膜、胃癌中MCL1蛋白阳性表达率分别为18.18%(4/22)、54.17%(26/48)、83.33%(75/90);MCL1蛋白在胃癌中的表达高于癌旁胃黏膜及正常胃粘膜,癌旁胃黏膜与正常胃粘膜MCL1蛋白表达亦具有明显差异(P<0.05);MCL1蛋白阳性表达率在伴淋巴结转移组为93.48%(43/46),无淋巴结转移组为72.72%(32/44),两者差异有显著性意义(P<0.05);而与性别、年龄和肿瘤大小无关。S-P免疫组化法与Western blot结果显示MCL1蛋白表达与胃癌分化程度呈负相关。结论:MCL1蛋白表达与胃癌发生、分化程度和淋巴结转移相关。
- 谭晖吉晓霞陆丽峰石莺凌晖苏琦
- 关键词：组织芯片胃癌
- 二烯丙基二硫对K562细胞生长抑制和促凋亡的作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对人白血病K562细胞增殖、诱导凋亡和细胞周期的影响。方法采用CCK-8技术检测细胞存活率,进行细胞形态学观察,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测DADS对细胞凋亡及周期的影响。结果 DADS能有效地抑制人白血病K562细胞增殖,15、30、60、120和240μmol/L DADS作用于K562细胞48h后,抑制率分别为26.3%、58.2%、44.7%、62.6%和75.6%。Hoechst形态学观察呈现典型的凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳上呈现出凋亡特征性的梯状条带,流式细胞仪检测可见亚二倍体峰并阻滞细胞于G2/M期,30、60和120μmol/L DADS作用于K562细胞12h后,Annexin V/PI双标记法检测早期凋亡细胞率分别为18.59%±0.81%、20.85%±0.65%、23.5%±1.1%(P<0.05)。结论 DADS呈浓度依赖性抑制K562细胞生长,其机制与诱导细胞凋亡并阻滞细胞于G2/M期有关。
- 谭晖吉晓霞王娟何洁彭娟苏琦
- 关键词：二烯丙基二硫K562细胞凋亡细胞周期阻滞
- Mcl-1在二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞G_2/M阻滞中的作用被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨Mcl-1在二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病HL-60细胞周期阻滞过程中的作用。方法:CCK-8检测DADS抑制HL-60细胞的作用;流式细胞术观察DADS对HL-60细胞的周期阻滞效应;West-ern blotting分析DADS处理HL-60细胞后Mcl-1、PCNA(细胞核增殖抗原)、CDK1(周期依赖激酶1)表达情况;RNAi干扰Mcl-1观察Mcl-1对白血病细胞周期的影响;免疫共沉淀分析Mcl-1与PCNA、CDK1结合作用。结果:CCK-8比色结果显示,15、30、60、120、240μmol/L DADS处理HL-60细胞,细胞增殖抑制率分别为31.15%、55.88%、66.14%、75.29%、80.35%,呈浓度依赖性增加(P<0.05)。流式细胞术检测显示,60μmol/L和120μmol/L DADS作用HL-60细胞24 h和48 h后,呈时间和浓度依赖性诱导HL-60细胞G2/M期阻滞(P<0.05)。Western blotting分析发现60μmol/LDADS处理HL-60细胞后PCNA、Mcl-1、CDK1表达下调(P<0.05)。Mcl-1基因沉默24 h后G2/M期百分率增加到19.4%,与对照组比较有显著差异(P<0.05)。而Mcl-1基因沉默后加入60μmol/L DADS作用时,G2/M期百分率比60μmol/L DADS处理组增加6.0%(P<0.05)。免疫共沉淀发现,HL-60细胞中存在Mcl-1与PCNA、CDK1的相互结合,DADS处理HL-60细胞后Mcl-1与PCNA、CDK1的结合作用减弱。结论:DADS能诱导HL-60细胞增殖抑制和G2/M阻滞,其抑制增殖作用与PCNA表达下调有关。Mcl-1基因沉默可增强DADS对HL-60细胞G2/M期阻滞作用。
- 吉晓霞谭晖易岚唐章文唐仪文玲苏琦
- 关键词：MCL-1白血病G2/M期阻滞二烯丙基二硫SIRNA
- 二烯丙基二硫通过激活Caspase3和释放Cyt-c诱导Raji细胞凋亡被引量：2
- 2009年
- 二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)作为天然植物大蒜中的提取物,能抑制多种肿瘤细胞生长,但其抑瘤的分子机制还不十分清楚。在该研究中,作者采用CCK-8(cell counting ki)t技术检测发现,DADS能有效地抑制人淋巴瘤Raji细胞增殖,形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测证实DADS呈时间和浓度依赖性诱导Raji细胞凋亡,DADS处理细胞24h后,MCL1和Bcl-2蛋白表达下降,而Bax和Bak蛋白表达水平无变化,Bid和Caspase3被激活,线粒体中Cyt-c释放增多,用Caspase抑制剂Z-VAD-FMK能部分阻断DADS诱导人淋巴瘤Raji细胞凋亡,提示DADS诱导的Raji细胞凋亡作用通过Bcl-2/MCL1-线粒体-caspase3通路介导。
- 谭晖吉晓霞凌晖罗招阳何洁易岚周建国苏琦
- 关键词：DADSRAJI细胞凋亡CASPASE3
- 角蛋白19/20表达与胃癌组织学类型及转移的关系被引量：2
- 2010年
- 目的分析角蛋白19/20(CK19/20)表达与胃癌组织学类型及转移的关系。方法选择65例手术切除的胃癌及20例淋巴结转移癌标本,并以18例慢性浅表性胃炎组织作为对照,采用免疫组化SP方法检测CK19/20蛋白表达,分析其表达与临床病理特征之间的关系。结果胃癌患者中CK19和CK20阳性率分别为84.6%(55/65)和81.5%(53/65);转移癌中CK19和CK20阳性率分别为95.0%(19/20)和90.0%(18/20);对照组胃炎患者中CK19和CK20阳性率分别为27.8%(5/18)和27.8%(5/18)。CK19/20表达在转移性胃癌中高于胃癌患者,且均高于对照组胃炎患者(P<0.05);CK19和CK20阳性率与分化、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),而与年龄、性别无关(P>0.05);CK19和CK20在胃癌中的表达呈显著正相关(r=0.836,P<0.01)。结论胃癌组织中CK19/20蛋白表达阳性率增高,与胃癌的分化和转移有关,且相互之间的表达具有相关性。
- 黄卫国赵强曾庆彪苏琦
- 关键词：胃癌角蛋白19角蛋白20分化
- Mcl-1基因及其在白血病中的作用被引量：3
- 2009年
- Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)基因作为Bcl-2家族成员之一,在细胞的生存凋亡,周期及分化调控中起着重要的作用。Mcl-1基因与血液系统恶性肿瘤的发生和发展有着密切的关系。
- 吉晓霞谭晖苏琦
- 关键词：MCL-1基因白血病凋亡细胞周期
