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国家自然科学基金(30971923)

作品数:12 被引量:60H指数:5
相关作者:林进添宾淑英申建梅胡黎明廖泓之更多>>
相关机构:仲恺农业工程学院华南农业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金仲恺农业工程学院校级科研基金更多>>
相关领域:生物学农业科学文化科学理学更多>>

文献类型

  • 12篇中文期刊文章

领域

  • 8篇生物学
  • 3篇农业科学
  • 1篇文化科学
  • 1篇理学

主题

  • 8篇实蝇
  • 6篇小实蝇
  • 6篇克隆
  • 6篇基因
  • 6篇基因克隆
  • 5篇荧光
  • 5篇荧光定量
  • 5篇桔小实蝇
  • 3篇蛋白
  • 3篇荧光定量PC...
  • 2篇昆虫
  • 2篇瓜实蝇
  • 2篇表达谱
  • 2篇表达谱分析
  • 1篇低分子
  • 1篇低分子量
  • 1篇低分子量肝素
  • 1篇多媒体
  • 1篇多媒体技术
  • 1篇嗅觉受体

机构

  • 11篇仲恺农业工程...
  • 1篇华南农业大学

作者

  • 11篇宾淑英
  • 11篇林进添
  • 10篇胡黎明
  • 10篇申建梅
  • 3篇廖泓之
  • 1篇吴仲真
  • 1篇张鹤
  • 1篇孙旭

传媒

  • 4篇昆虫学报
  • 2篇南京农业大学...
  • 1篇安徽农业科学
  • 1篇华中农业大学...
  • 1篇西北农林科技...
  • 1篇Chines...
  • 1篇现代农业科技
  • 1篇仲恺农业工程...

年份

  • 1篇2014
  • 2篇2012
  • 9篇2011
12 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
瓜实蝇普通气味结合蛋白基因的克隆及原核表达被引量:5
2011年
利用RT-PCR和RACE方法克隆获得瓜实蝇Bactrocera cucurbitae(Coquillett)普通气味结合蛋白(general odorant binding protein,GOBP)基因的cDNA全长序列,命名为BcucOBP。测序结果表明,BcucOBP开放阅读框全长447 bp,编码149个氨基酸。氨基酸序列比对及三维结构同源建模表明,此序列具有OBPs的典型特征,序列中具有6个保守的半胱氨酸和6个α螺旋区域。构建了重组表达载体pET28a(+)-BcucOBP,并转化大肠杆菌BL21(DE3)中。SDS-PAGE及Western blotting分析表明,在IPTG进行诱导下目标蛋白以His-标签融合蛋白的形式在宿主菌中得到稳定表达。荧光定量PCR分析表明,BcucOBPmRNA在除雌虫腹节外的各个组织中都有表达,但在触角中的表达量最高。另外,BcucOBPmRNA在昆虫前足和生殖节中具有明显的性别差异表达特征,推测其不仅具有普通气味蛋白的功能,还可能参与了信息素的运输过程,在瓜实蝇交配行为中发挥重要作用。
申建梅胡黎明宾淑英廖泓之林进添
关键词:瓜实蝇气味结合蛋白基因克隆原核表达
瓜实蝇嗅觉受体基因的克隆及表达谱分析被引量:21
2011年
昆虫的嗅觉受体是一个高度变异的蛋白家族,其中一类Or83b嗅觉受体在不同昆虫体内高度保守,在昆虫的行为调控过程中起到十分重要的作用。为进一步探讨Or83b受体的功能,本研究利用RT-PCR和RACE方法克隆获得瓜实蝇Bactrocera cucurbitae(Coquillett)Or83b-like受体的全长cDNA序列,命名为BcucOr83b-like(GenBank登录号:HM745934)。测序结果表明,BcucOr83b-like开放阅读框全长1422bp,编码473个氨基酸残基。氨基酸序列比对表明,此序列具有Or83b受体的典型特征,序列中具有7个跨膜区和高度保守的C端区域。BcucOr83b-like与其他昆虫的Or83b具有较高的氨基酸序列一致性,其中与桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)Or83b的序列一致性高达99.6%。对该基因在瓜实蝇成虫不同组织和发育时期表达量的荧光定量PCR分析表明,BcucOr83b-like主要在瓜实蝇成虫触角中表达,头部(去除触角)、雌虫前足和翅中也有较高的表达;瓜实蝇在各个发育时期的表达水平不同,在刚羽化雌成虫中的表达量最高。本研究为深入研究瓜实蝇Or83b受体的功能提供了理论依据。
申建梅胡黎明宾淑英林进添
关键词:瓜实蝇基因克隆表达谱分析荧光定量PCR
生物信息学在计算机辅助农药分子设计中的应用被引量:1
2011年
随着生命科学、数学、物理学和计算机科学的相互交叉,生物信息学越来越显示出其重要性,尤其是在新药的研究和开发中。综述了生物信息学在药物靶点识别和药物分子设计中的应用,并探讨了生物信息学在农药分子设计中的重要作用。生物信息学的应用无疑将进一步推动农药的开发进程。
申建梅胡黎明宾淑英林进添
关键词:生物信息学药物靶标计算机辅助药物设计农药
桔小实蝇takeout基因的克隆和序列分析及时空表达被引量:3
2012年
采用RT-PCR及RACE技术克隆了桔小实蝇(Bactrocera dorsalis(Hendel))takeout基因的cDNA全长序列,命名为BdorTO。测序结果表明:BdorTO开放阅读框全长747 bp,编码248个氨基酸,相对分子质量约为28.15×103,等电点为5.29。Signal P软件分析表明,该蛋白N端具21个氨基酸的信号肽,为分泌型蛋白。氨基酸序列比对表明,BdorTO蛋白与其他昆虫TO蛋白的序列一致性较低,其中与刺舌蝇(Glossina morsitans)的序列一致性最高,一致性值为48.6%。荧光定量PCR分析表明,BdorTO在触角中的表达量最高,推测BdorTO可能参与了桔小实蝇嗅觉感受过程;在雄虫生殖节中的表达量明显高于雌虫生殖节,提示BdorTO可能与桔小实蝇雄虫的生殖生理过程密切相关。
胡黎明申建梅宾淑英廖泓之林进添
关键词:桔小实蝇基因克隆荧光定量PCR
桔小实蝇14-3-3基因的克隆和表达谱分析被引量:1
2011年
【目的】克隆桔小实蝇14-3-3蛋白的基因(Bactrocera dorsalis14-3-3,Bdor14-3-3),研究Bdor14-3-3mRNA在不同组织和不同发育时期的表达情况,探索其是否参与了桔小实蝇的发育过程。【方法】采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和快速扩增cDNA末端(RACE)技术克隆Bdor14-3-3;采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法,研究Bdor14-3-3 mRNA在桔小实蝇不同组织及不同发育时期的相对表达量。【结果】克隆获得了Bdor14-3-3基因,其编码区长度为747 bp,编码248个氨基酸残基。氨基酸序列一致性分析表明,在昆虫纲中,桔小实蝇与刺舌蝇14-3-3蛋白的序列一致性最高,为98.8%,与豌豆蚜的序列一致性最低,为85.4%。实时荧光定量PCR分析表明,Bdor14-3-3 mRNA在桔小实蝇不同组织和发育时期都有表达;在雌虫头(去除触角)和翅中的相对表达量均较高,分别是触角的1.39和1.44倍;在雄虫胸和后足中的相对表达量均较高,分别是前足的1.28和1.23倍。在蛹的早期发育过程中Bdor14-3-3 mRNA表达量逐渐升高,到7 d蛹期相对表达量达到最高峰,是10 d蛹的4.91倍。【结论】克隆获得了Bdor14-3-3基因,其表达的14-3-3蛋白可能参与了桔小实蝇的变态发育过程,尤其在蛹的发育过程中Bdor14-3-3可能发挥着重要作用。
申建梅胡黎明宾淑英林进添
关键词:桔小实蝇基因克隆实时定量PCR
Partial Hydrolysis of the Fucosylated Chondroitin Sulfate from Sea Cucumber Isostichopus badionotus and Its Mechanism
2012年
The method for preparing low molecular weight fucosylated chondroitin sulfate from sea cucumber Isostichopus badionotus using partial acid hydrolysis was reported, and its hydrolysis mechanism was also investigated. The sea cucumber chondroitin sulfate FCS was hydrolyzed under different conditions (80 ℃ 3 h and 6 h), then isolated and purified on a Bio-P-4 geltration to prepare low molecular weight fractions (LMWF-FCS). The chemical compositions of LMWF-FCS showed the branched fucose (Fuc) was cleaved during acid hydrolysis process, whereas the mole ratio of acetyl-galactosamine (GalNAc) and glucuronic acid (GlcA) in the backbone remained the same, which indicated the backbone was a typical chondroitin sulfate structure. The disaccharide composition analysis of LMWF-FCS suggested that the sulfation patterns of GalNAc in the backbone chain changed and the substitution value was reduced. Furthermore, the 1 D NMR analysis illustrated the branched-Fuc was cleaved during acid hydrolysis, but their substitution patterns were not influenced, which was distinct from the previous reports that the substitutions of branched-Fuc in FCS were easy to change. Simultaneously, the sulfation pattern of GalNAc in backbone chain changed obviously in the acid hydrolysis process. The anticoagulant activity in vitro illuminated the anticoagulant activity of the degradation products over time in the acid hydrolysis are gradually declined, but still kept good. Therefore, the LMWF-FCS prepared could be developed as a new anticoagulant and antithrombotic drug like low molecular weight heparin.
陈士国李国云叶兴乾薛长湖
关键词:部分水解岩藻糖低分子量肝素抗凝血活性水解过程
桔小实蝇肌球蛋白轻链2基因的克隆及表达分析被引量:4
2011年
肌球蛋白轻链在生物的运动过程中具有重要作用,本研究利用RT-PCR和RACE技术获得了桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)肌球蛋白轻链2(myosin light chain 2,MLC2)的cDNA全长序列,命名为BdorMLC2。测序结果表明,BdorMLC2开放阅读框全长669 bp,编码222个氨基酸残基。在线软件SMART分析显示,BdorMLC2具有2个Ca2+结合基序(EFh)结构域,可以结合Ca2+,属于肌钙蛋白C超家族成员。氨基酸序列比对表明,BdorMLC2与其他昆虫的肌球蛋白具有较高的序列一致性,其中与黑腹果蝇Drosophila melanogasterMLC2的序列一致性高达93.2%。BdorMLC2在不同组织和时期的荧光定量PCR分析表明,BdorMLC2在桔小实蝇雄虫胸部的含量最高,在前足、中足、后足和翅中也有较高的表达;BdorMLC2几乎在桔小实蝇发育的各个时期都有表达,刚羽化成虫的表达量显著高于其他发育阶段。结果提示,BdorMLC2可能与桔小实蝇的肌肉收缩运动密切相关。本研究为深入研究桔小实蝇肌球蛋白的功能提供了理论依据。
申建梅胡黎明宾淑英林进添
关键词:桔小实蝇基因克隆表达谱分析荧光定量PCR
分子标记技术在昆虫入侵研究中的应用被引量:5
2014年
遗传变异与种群持续性及其进化潜力密切相关,而生物入侵导致种群遗传变异或遗传多样性的改变为研究自然界中各种生态和进化问题提供了理想模式。分子标记技术是调查种群遗传变异的重要工具,揭示了入侵种的入侵过程和结果,并预测未来的发生情况。本综述归纳了分子标记技术在昆虫入侵机制研究中的应用,以典型的研究个案为例,分别综述了分子标记技术在隐蔽入侵的监测应用,分子标记技术在重构入侵历史研究中的推算方式,分子标记技术在探索种群遗传变异与成功入侵机制方面取得的重要进展,并进一步介绍了高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)分析在昆虫入侵研究中的应用前景。
宾淑英吴仲真张鹤林进添
关键词:生物入侵分子标记
橘小实蝇α1微管蛋白基因的克隆和表达分析
2011年
利用RT-PCR和RACE方法克隆获得橘小实蝇α1微管蛋白基因的cDNA全长序列,命名为α1-Bdortub。测序结果表明,α1-Bdortub开放阅读框全长1 353 bp,编码450个氨基酸残基。氨基酸序列比对表明,α1-Bdortub与黑腹果蝇α1-tubulin的氨基酸序列相似性最高,为99.8%。不同部位和不同时期的实时荧光定量PCR分析表明,α1-Bdortub在不同部位都有表达,雌虫翅中的表达是其生殖节中的12倍。从幼虫期到蛹期α1-Bdortub mRNA表达量逐渐提高;第1、2、3天幼虫中的含量分别为第10天蛹的0.71、1.16、4.01倍;在第1、4、7天蛹中的含量分别为第10天蛹的4.22、13.2、18.5倍。结果提示,α1-Bdortub可能与橘小实蝇的发育有关。
申建梅胡黎明宾淑英廖泓之林进添
关键词:橘小实蝇基因克隆实时荧光定量PCR
香蕉对桔小实蝇的引诱活性及挥发物化学成分分析被引量:5
2011年
采用Y型嗅觉仪测定了香蕉(Musa supientum)对桔小实蝇(Bactrocera dorsalis)雌虫的引诱活性,并采用固相微萃取技术(Solid phase microextraction,SPME)对香蕉挥发性物质进行收集,并运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对香蕉挥发物化学成分进行分析.结果表明,香蕉对桔小实蝇雌虫具有明显的引诱作用;香蕉挥发物的主要成分是酯类物质,含量较高的是丁酸异戊酯和乙酸异戊酯,其相对含量分别为19.31%和13.0%.推测丁酸异戊酯和乙酸异戊酯可能是香蕉引诱桔小实蝇雌虫的活性成分.
申建梅胡黎明宾淑英孙旭林进添
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