河南省教育厅自然科学基金(2010C310005)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 相关机构：漯河医学高等专科学校江苏大学附属医院更多>>
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- HEV ORF3 cDNA序列分析及在HepG2细胞的表达
- 2014年
- 目的对构建的HEV新疆株ORF3真核表达载体pcHEV3进行DNA序列分析,并转染HepG2细胞进行表达,为进一步探索ORF3蛋白功能提供基础。方法对HEV ORF3真核表达载体pcHEV3进行DNA测序,分析ORF3蛋白一级结构,脂质体介导法转染HepG2细胞,用免疫荧光法鉴定ORF3蛋白的表达及细胞内定位。结果 HEV新疆株ORF3蛋白具有保守的PPLP基序,转染HepG2细胞后经免疫荧光鉴定能在细胞内表达。结论构建出HEV ORF3蛋白真核表达重组载体,并能在HepG2细胞表达,为进一步研究HEV ORF3蛋白的功能提供了实验基础。
- 赵振宇温雯静刘新胜赵江波刘晓东
- 关键词：戊型肝炎病毒开放读码框架
- HEV ORF3真核表达载体的构建
- 2014年
- 目的构建戊型肝炎病毒(HEV)ORF3真核表达载体pcHEV3并进行初步鉴定。方法从实验感染HEV新疆株的猕猴胆汁中提取HEV RNA,逆转录法合成HEV cDNA,采用RT-PCR方法扩增HEV ORF3 cDNA片段,将其克隆至载体质粒pcDNA3,构建HEV ORF3真核表达载体,经抗生素初步筛选后,重组阳性载体进行酶切和测序鉴定。结果从实验感染HEV新疆株的猕猴胆汁中克隆出HEV ORF3全长cDNA片段,经酶切鉴定及DNA测序鉴定,成功构建HEV ORF3蛋白真核表达载体pcHEV3。结论成功构建HEV ORF3蛋白真核表达载体,为进一步研究HEV ORF3蛋白的功能提供了条件。
- 赵振宇曲振宇刘新胜
- 关键词：戊型肝炎病毒开放读码框架
