国家自然科学基金(30271322)
- 作品数：6 被引量：91H指数：4
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- 相关机构：第四军医大学南方医科大学南方医院中国人民解放军第一军医大学更多>>
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- 新型神经营养因子TAT-BDNF对胚胎干细胞分化的影响
- 2008年
- 目的探讨合成的新型神经营养因子TAT-BDNF对胚胎干细胞(ESCs)分化的影响,为进一步TAT-BDNF联合干细胞移植治疗脊髓损伤提供实验依据。方法取ESCs E14进行体外培养,在全反视黄酸诱导分化的基础上加入20μg/LTAT-BDNF,通过免疫细胞化学染色观察此融合蛋白对ESC分化的影响。结果TAT-BDNF能促使E14胚胎干细胞分化为多巴胺能神经元和γ氨基丁酸能神经元。随着作用时间的延长,表达成熟神经元NF-200的细胞比例逐步提高(7 d时约37.4%±2.7%、21 d时82.3%±7.6%);TH阳性的细胞比例也逐渐增多(7 d时约7.9%±1.6%,21 d时44%±3.5%),而且神经元的轴突也更加细长。结论新型神经营养因子TAT-BDNF能促进ESCs细胞向神经元分化并促进神经元成熟。
- 蒋晖金大地瞿东滨鞠躬
- 关键词：胚胎干细胞脑源性神经营养因子分化
- cAMP诱导大鼠脊髓损伤后神经再生被引量：7
- 2005年
- 目的观察在体给入环磷酸腺苷(cyclic adinosine monophosphate,cAMP)对大鼠脊髓损伤后神经再生的作用。方法56只SD大鼠制成脊髓T10背侧半切断损伤模型,随机分为六组。各组分别在脊髓损伤局部、大脑运动皮层和T6蛛网膜下腔内给入cAMP或生理盐水。动物存活6周后处死,制作脊髓组织切片,通过免疫组化染色观察损伤区局部神经丝的分布;通过皮质脊髓束和脊髓顺行追踪观察皮质脊髓束和脊髓神经纤维的再生;通过动物后肢运动BBB评分观察后肢运动功能恢复的程度,并以此来评价治疗措施的脊髓损伤修复效果。结果用三种方式给入cAMP,损伤区神经丝沿脊髓纵轴延伸分布,但未与尾端重新连接。在蛛网膜下腔给入cAMP无明显的脊髓神经再生;在损伤区局部和大脑运动皮层给入cAMP,损伤区可见大量脊髓再生纤维,包括部分皮质脊髓神经纤维再生。各组动物在术后4～5周均恢复正常行走,BBB评分超过20分。结论在脊髓损伤局部和在大脑运动皮层给入cAMP能诱导大鼠脊髓损伤后神经再生,但尚不能达到有效促进实验动物后肢运动功能的效果。
- 陈向荣蒋晖游思维鞠躬金大地
- 关键词：脊髓损伤CAMP诱导大鼠脊髓神经再生神经纤维再生后肢运动功能
- 环磷酸腺苷在大鼠脊髓背侧半切损伤修复中的作用被引量：4
- 2005年
- 目的观察在体内给入环磷酸腺苷(cAMP)对大鼠脊髓损伤修复中的作用.方法采用大鼠脊髓T10背侧半切伤模型,通过在脊髓损伤局部、大脑运动皮层、和蛛网膜下腔内给入cAMP,做组织切片免疫组化染色,观察损伤区局部神经丝(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、皮质脊髓束(CST)纤维、脊髓神经纤维及后肢运动功能评分(BBB).结果 cAMP在脊髓损伤局部和大脑运动皮层给入时,损伤区可见大量脊髓再生纤维,在蛛网膜下腔内给入时损伤区可见极少量皮质脊髓束纤维存在.cAMP组损伤区NF分布较多,GFAP较少.所有动物后肢运动在5～6周恢复正常行走,BBB评分的时间曲线在对照组和cAMP组之间没有明显区别.结论在体内给入cAMP能诱导大鼠脊髓损伤后神经再生.
- 陈向荣游思维金大地
- 关键词：脊髓背侧运动功能评分运动皮层神经丝BBB
- BBB评分评估脊髓损伤大鼠后肢运动功能的探讨被引量：65
- 2004年
- 目的探讨大鼠脊髓损伤后和修复中如何评估大鼠后肢运动的BBB评分。方法对4组大鼠分别行T10脊髓背侧半切断(A组)、T10脊髓全切断(B组)、T10脊髓节段全切除(C组)、T10以下脊髓全切除(D组),制成不同损伤程度的大鼠脊髓损伤模型,对所有动物的后肢运动功能进行BBB评分和脊髓组织学观察。结果A组大鼠BBB评分在损伤后5周达到20分或21分,B组和C组大鼠在术后2周以后BBB评分维持在8分,D组大鼠BBB评分维持在0。B组和C组大鼠脊髓顺行追踪显示脊髓损伤区和尾侧无追踪剂分布,连续矢状冰冻切片抗神经丝(NF)染色未见连续NF通过损伤区。结论大鼠脊髓损伤模型的后肢运动功能BBB评分如果在8分以下,就需要慎重评价,这种运动有可能完全是或包括有自发的后肢运动。
- 陈向荣游思维金大地
- 关键词：脊髓损伤BBB评分
- 新型神经营养因子TAT-BDNF促进胚胎干细胞的神经元性分化
- ＜正＞目的:前期的研究已经证实合成的新型神经营养因子TAT-BDNF通过静脉注射能有效透过大鼠的血脑屏障,本研究旨在探讨TAT-BDNF对胚胎干细胞分化（embryonic stem cell,ESCs）的影响,为进一步...
- 蒋晖瞿东滨金大地鞠躬
- 关键词：胚胎干细胞脑源性神经营养因子
- 文献传递
- 脑源性神经营养因子基因修饰神经干细胞对体外培养的脊髓背根神经节细胞的生物学作用被引量：15
- 2005年
- 目的建立稳定表达脑源性神经营养因子(BDNF)基因的神经干细胞并观察其对于体外培养的脊髓背根神经节(DRG)细胞存活及突起生长的影响。方法以PCR技术从人脑cDNA文库中获取人BDNF基因片段。采用分子克隆技术构建带有绿色荧光蛋白报告基因的多顺反子的MSCVBDNFIRES2EGFP重组鼠干细胞病毒表达载体,病毒经PT67细胞包装后感染神经干细胞株C17.2。通过免疫组化,RTPCR,ELISA检测BDNF的表达,在双室共培养系统中共培养3,10d后观察经筛选的稳定表达株对原代培养DRG细胞的生物学作用。结果RTPCR证实BDNF基因在C17.2细胞中转录,ELISA分析显示转基因C17.2培养上清中在转染24h后即可检测到BDNF表达,并在3个月后仍表达(14.6±0.8)ng·d-1·10-1细胞;免疫细胞化学显示,与对照组相比较,BDNF基因修饰的神经干细胞组,DRG细胞突起生长较长交织呈网状的,节细胞存活较多。结论干细胞病毒介导转染的BDNF基因能够在神经干细胞C17.2中稳定表达,并且BDNF基因修饰的神经干细胞对体外培养的DRG细胞的存活及突起、延伸具有显著促进作用。
- 蒋晖金大地瞿东滨王春婷鞠躬
- 关键词：神经干细胞脑源性神经营养因子基因治疗
- 蛛网膜下腔连续注入环磷酸腺苷对脊髓损伤后神经再生的作用被引量：2
- 2004年
- 目的:观察环磷酸腺苷(cAMP)在蛛网膜下腔内注入对脊髓损伤后神经再生的作用。方法:20只SD大鼠完全随机分为对照组(n=10)和cAMP组(n=10),采用大鼠脊髓半切损伤模型,通过在体内埋入微泵和椎管内置管连续给入db-cAMP,作组织切片免疫组化染色,观察损伤区局部皮质脊髓束(CST)纤维及后肢运动功能BBB评分。结果:cAMP治疗组损伤区可见极少量可疑皮质脊髓束再生纤维,呈现出有利于神经再生的变化;后肢运动在四五周均恢复正常行走,与对照组无明显区别。结论:cAMP导致脊髓损伤区极少量皮质脊髓束纤维存在,可能有利于脊髓损伤的修复。
- 陈向荣蒋辉金大地游思维
- 关键词：环AMP脊髓损伤蛛网膜下腔注射
