国家自然科学基金(30271321)
- 作品数：19 被引量：69H指数：6
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- 相关机构：南方医科大学南方医院中国人民解放军第一军医大学南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技攻关项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人血小板衍生生长因子BB原核表达及生物学活性鉴定
- 2008年
- 目的表达人血小板衍生生长因子(PDGF)BB蛋白并进行生物学活性鉴定。方法基因扩增方法获得人PDGF-B基因;原核表达PDGF-BB蛋白,并纯化、复性;免疫印迹分析重组蛋白的免疫原性;应用培养的大鼠成骨细胞对其生物学活性进行鉴定。结果扩增出327bp目的基因,与预期结果吻合,DNA序列分析正确。SDS-PAGE和免疫印记检测表明获得新生蛋白的分子量及免疫原性均与预期符合。体外细胞学鉴定表明,获得的rhPDGF-BB可明显促进大鼠成骨细胞的增殖和DNA复制,表明重组的PDGF-BB具有较好的生物学活性。结论PDGF-B成熟肽基因克隆成功并成功地在大肠杆菌中实现了高表达。复性后细胞学MTT和FCM鉴定表明获得的rhPDGF-BB具有较好的生物学活性,为生产活性PDGF-BB蛋白及其在促进骨组织和创伤修复方面的进一步功能研究奠定了基础。
- 杨春露陈建庭邓凡王建钧罗深秋金大地
- 关键词：血小板衍生生长因子基因克隆原核表达纯化生物学活性鉴定
- 珍珠层/聚乳酸人工骨的生物相容性研究被引量：6
- 2003年
- 目的:研究珍珠层/聚乳酸人工骨在体内外的生物相容性。方法:将珍珠层/聚乳酸人工骨在体外与兔成骨细胞复合培养作实验组,以脱钙骨/聚乳酸人工骨作对照,行MTT法、组织学和扫描电镜检测,观察成骨细胞在材料表面的粘附、生长和增殖情况;将同种异体成骨细胞-珍珠层/聚乳酸人工骨复合植入体内,观察机体对细胞与材料的排斥反应。结果:MTT法显示随培养时间的延长,细胞在材料表面不断增殖;组织学及电镜显示,在体外细胞于材料表面及孔隙中附着、生长良好,存在接触抑制现象;细胞与材料复合植入体内,珍珠层/聚乳酸组的炎性反应明显比对照组轻。结论:珍珠层/聚乳酸人工骨在体内外有良好的生物相容性。
- 唐焕章陈建庭吴一民杨春露谭小云
- 关键词：生物相容性成骨细胞细胞培养
- 珍珠层人工骨修复兔桡骨节段性缺损的放射学评价被引量：2
- 2007年
- 目的:用珍珠层/聚乳酸人工骨(N/P)复合同种异体成骨细胞(osteoblastsOBs)修复兔桡骨节段性骨缺损,并从放射学角度评价成骨效果。方法:手术制作18只新西兰大白兔15mm双侧桡骨缺损模型;体外培养同种异体成骨细胞,分别种植到珍珠层/聚乳酸人工骨和聚乳酸(PLA)材料上。以复合OBs的珍珠层/聚乳酸人工骨为实验组(ON),以复合OBs的聚乳酸(OP)和未复合OBs的珍珠层/聚乳酸人工骨(N)作对照组,移植修复兔桡骨缺损。分别于植入后4、8、12周取材,经大体观察、X线、放射学评分和X线阻射密度值来评价修复兔桡骨节段性骨缺损的效果并进行统计学分析。结果:复合OBs的N/P人工骨的试验组放射学评分和X线阻射密度值均高于对照组,统计学差异有显著性。在新骨形成的同时,珍珠层粉未完全降解。结论:珍珠层人工骨能较好地修复兔桡骨骨缺损,在复合成骨细胞后修复效果更佳,是一种很有前途的骨组织工程材料。
- 王建钧陈建庭唐焕章杨春露
- 关键词：珍珠层成骨细胞骨缺损
- 珍珠层聚乳酸人工骨对家兔肝肾功能的影响被引量：5
- 2004年
- 目的:在理论上珍珠层聚乳酸人工骨具备了理想人工骨的特性,但其植入体内的生物安全性如何?为此探讨将其植入家兔体内后对家兔肝肾功能的影响。方法:实验于2004-03/06在第一军医大学南方医院中心实验室完成。清洁级新西兰大白兔9只,雌雄不限,体质量(2.5±0.3)kg。将珍珠层聚乳酸人工骨材料植入家兔背部肌袋内,于手术前、手术后第1,2,3,4周抽静脉血,进行肝肾功能检测。术前和术后进行对照,比较观察有无差异。结果:手术前血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、白蛋白(A)、球蛋白(G)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)分别为(33.6±4.7)mmol/L,(86.0±2.3)μmol/L,(44.1±1.5)g/L,(14.9±1.3)g/L,(560.1±78.3)nkat/L,(381.7±76.7)nkat/L,手术后各项指标差异均无显著性意义(F=0.442～2.557,P>0.05)。结论:珍珠层聚乳酸人工骨材料植入家兔背部肌肉内对体现兔肾功能的血尿素氮、肌酐及肝功能的白蛋白、球蛋白等因子无影响。
- 赵勇陈建庭
- 关键词：骨代用品肝功能试验肾功能试验
- 血小板衍生生长因子-BB体外促进破骨细胞样细胞形成被引量：1
- 2003年
- 目的 获得大量和高纯度破骨细胞样细胞。方法 从急性单核细胞性白血病 (M5a亚型 )患者骨髓中分离前体单核细胞 ,与血小板衍生生长因子 (PDGF) -BB共同培养 ,获得多核细胞 ;利用免疫电镜、免疫荧光、扫描电镜等技术鉴定多核细胞的生物学特性。结果 多核细胞表达抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) ,细胞膜具有Vitronectin受体 ,能够形成骨吸收陷窝。结论 所获得的多核细胞是破骨细胞样细胞 ,PDGF -BB能够促进前体破骨细胞向破骨细胞转化。
- 张忠民陈建庭吴彬鲁道海金大地
- 关键词：血小板衍生生长因子-BB破骨细胞样细胞抗酒石酸酸性磷酸酶
- 珍珠层人工骨与人骨髓基质细胞的生物相容性被引量：10
- 2007年
- 目的:探讨人骨髓基质细胞与珍珠层人工骨的生物相容性,为选择更好的骨组织工程材料提供实验依据。方法:实验于2005-05/10在南方医科大学南方医院脊柱骨科实验室完成。采用模压成型专利技术,将珍珠层粉与消旋聚乳酸制成三维多孔材料,孔径200～500nm。将制作好的材料切制成8mm×8mm×2mm大小的块状,乙醇及去离子水湿化,自然干燥,高温湿热灭菌后备用。骨髓基质细胞取自健康成年男性(自愿捐献)。体外培养人骨髓基质细胞,与珍珠层-聚乳酸复合人工骨共同培养。实验分两组:珍珠层人工骨组加入块状的珍珠层人工骨,对照组不加处理因素。采用倒置相差显微镜、扫描电镜进行形态学观察,噻唑蓝法进行细胞增殖等指标测定,考马斯亮蓝法微量测定细胞蛋白含量。结果:①随着培养时间的延长,各组细胞数量逐渐增加,各时间点珍珠层人工骨组与对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。②培养3d,珍珠层人工骨组和对照组蛋白含量相比较差异无显著性意义(分别为0.39±0.02,0.37±0.03,P>0.05);培养7d后,珍珠层人工骨组蛋白含量高于对照组,差异有显著性意义(分别为0.97±0.05,0.83±0.03,P<0.05)。③倒置相差显微镜观察,7d时可见细胞在珍珠层人工骨周围密集生长。珍珠层人工骨组细胞生长状态与对照组相比差异不明显,未见到细胞大量凋亡、衰老及异常分裂现象。④扫描电镜观察,共同培养第7天,可见梭形骨髓基质细胞大量紧密生长在珍珠层人工骨表面,呈集束状排列,边缘部分细胞可见到伪足。结论:珍珠层人工骨具有良好的生物相容性,可作为骨髓基质细胞的载体而应用于骨组织工程的研究。
- 杨春露陈建庭王建钧赵勇金大地
- 关键词：生物相容性材料骨髓细胞珍珠层
- 珍珠层/聚乳酸人工骨植入家犬颈椎椎间的融合效果被引量：4
- 2007年
- 目的:观察珍珠层/聚乳酸人工骨植入家犬颈椎椎间的融合效果。方法:实验于2004-09/2005-06在南方医科大学附属南方医院实验动物中心及脊柱骨病科实验室完成。选择成年家犬14只,随机数字表法分为4组,实验组(n=4):在颈椎5/6或者6/7椎间植入珍珠层/聚乳酸人工骨;异体骨组(n=4):在相同部位植入体积分数为0.75的乙醇浸泡的新鲜同种异体髂骨;聚乳酸组(n=4):植入经环氧乙烷消毒的高分子聚乳酸材料;空白对照组(n=2):未植入任何材料,上述各组均用手外科微型钢板内固定。分别于术后4,8,12,16周行X射线片及组织病理检查。结果:纳入动物14只,均进入结果分析。①通过X射线及组织病理检查对椎间融合进行判断,在术后16周,实验组的融合程度差于异体骨组,优于聚乳酸组。②病理检查显示复合材料前方的软组织量极少,为非特异性的纤维结缔组织,在周围正常骨组织内可见珍珠层粉微粒,细小的颗粒被异物巨细胞吞噬,复合材料中可见大量类骨质,材料中的聚乳酸部分降解。③骨磨片显示新骨组织长入复合材料的小孔内,珍珠层粉微粒对骨组织无明显影响。结论:珍珠层/聚乳酸人工骨在体内有较好的植骨融合效果,并可以被缓慢降解吸收。
- 王建钧陈建庭杨春露张登君林焕阳
- 关键词：生物相容性材料骨代用品乳酸盐类
- 血小板衍生生长因子-BB抑制成骨细胞-破骨细胞共育体系中破骨细胞的作用机制被引量：7
- 2004年
- 目的 探讨血PDGF BB在共育体系中抑制破骨细胞 (OC)功能的机制。方法 将PDGF BB施加于两种培养体系。测定培养上清一氧化氮 (NO)产物的浓度 ;检测诱导型和内皮型一氧化氮合酶表达情况 ;检测共育体系内外骨保护素 (OPG )表达与PDGF BB浓度的关系 ;观察共育体系培养上清对OC吸附骨质的影响。结果 在PDGF BB刺激下 ,NO含量升高至 (2 5 .2 6±3 .2 4) μg/L (P <0 .0 1) ;加入抑制剂后 ,NO含量为 (9.84± 1.5 1) μg/L ;PDGF BB促进成骨细胞(OB)对eNOS和iNOS的表达 ,抑制剂使二者表达减弱 ;共育体系中OPG表达增强 ,而PDGF BB不能直接促进OPG的表达。共育体系培养上清使OC从骨质上脱离。结论 PDGF BB促进OB产生NO产物 ,后者抑制OC功能。
- 张忠民陈建庭金大地
- 关键词：血小板衍生生长因子-BB成骨细胞破骨细胞一氧化氮
- 珍珠层粉在新西兰兔股骨髁内的成骨试验被引量：6
- 2009年
- 目的探讨植入新西兰兔股骨髁内的珍珠层粉的成骨能力及成骨方式。方法将珍珠层加工成粉,植入新西兰兔股骨髁内,术后4、8和12周进行影像学检查及X线阻射度测定;相应时间点取材,进行硬组织切片处理及组织学观察;应用Image-Pro图形软件分析术后8、12周丽春红染色硬组织切片的成骨面积;对X线阻射度做统计学重复测量的方差分析,成骨面积作析因设计的方差分析。结果在不同的时间点,X线片密度有轻度变化,未见到明确的新生骨影像;X线的阻射度测定显示在不同时间点阻射度值逐渐降低,变化有统计学意义;硬组织切片可见到类骨质、编织骨和板层骨随时间变化生成量逐渐增加;图形分析显示出珍珠层粉明显的成骨面积,与空白对照组比较统计学差异显著。结论珍珠层粉植入新西兰兔股骨髁内有明显的成骨作用,在体内的生物降解缓慢,可能以骨诱导的方式成骨。
- 王建钧陈建庭张晓荣
- 关键词：珍珠层新生骨骨诱导股骨髁
- 珍珠层人工骨复合成骨细胞修复兔桡骨缺损的成骨作用被引量：7
- 2005年
- 目的: 观察珍珠层 /消旋聚乳酸 (N/P)人工骨复合同种异体成骨细胞(OBs)修复兔桡骨节段性骨缺损的成骨能力,研究其作为骨组织工程支架材料的可行性.方法: 手术造成 15mm桡骨缺损模型,将体外培养的同种异体新西兰白兔OBs分别种植到N/P人工骨和消旋聚乳酸 (PDLLA)人工骨材料上.以复合OBs的N/P人工骨为实验组,以复合OBs的PDLLA人工骨和未复合OBs的N/P人工骨作对照组,移植修复兔桡骨缺损.分别于植入后 4, 8, 12wk取材,经大体观察、X线、组织学检测,观察细胞-材料复合物修复兔桡骨节段性骨缺损的效果.结果: 复合OBs的N/P人工骨修复兔桡骨缺损术后 8wk材料中形成大片板层骨, 12wk骨痂桥接缺损,骨皮质连续,部分髓腔再通,珍珠层材料降解成粉末状,新骨周围材料降解明显;复合OBs的PDLLA组术后 8wk时形成部分板层骨,但以类骨质多见,材料已大部分降解, 12wk已完全降解,骨痂与断端界限消失,骨痂呈连续的窄条状修复骨缺损,但骨髓腔轮廓不清,骨痂形成的数量较实验组明显减少;未复合OBs的N/P组 12wk时仅在材料与宿主骨两断端连接部有片状成熟新骨形成,但在材料中央处有少许成骨.N/P人工骨材料亦部分降解成粉末状,但降解速度慢于实验组.结论: 珍珠层人工骨复合OBs能很好地修复兔桡骨临界性骨缺损。
- 唐焕章陈建庭金大地杨春露谭小云
- 关键词：珍珠层消旋聚乳酸成骨细胞骨生成
