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特布他林杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体制备与鉴定被引量：2: 2012年; 分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,用BSA-TBL免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-TBL包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原进行冲击免疫;无菌手术取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合建立分泌TBL单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备TBL mAb,并对TBL mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果显示,免疫的6只小鼠血清抗体效价均达到10-4;融合后筛选出4C08-G5和3H3-A02共2株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1∶800和1∶1600,腹水效价分别为1∶2.56×105和1∶1.02×106;4C08-G5株分泌的抗体对TBL的IC50为5.25ng/ml,与瘦肉精、莱克多巴胺等其他β2激动剂交叉反应性小于3%。本试验获得了抗TBL mAb,为TBL残留免疫检测方法的建立奠定了坚实的基础。; 杨艳艳职爱民刘庆堂李靓李青梅柴书军胡骁飞邓瑞广张改平; 关键词：特布他林杂交瘤单克隆抗体

新型离子液体中脂肪酶催化薄荷醇选择性酯化被引量：2: 2015年; 设计合成了6种新型对称烷基咪唑六氟磷酸盐离子液体。以脂肪酶Candida antarctica催化(±)-薄荷醇和丙酸酐立体选择性酯化反应为模型反应,考察反应介质对酶行为的影响。结果发现,在1,3-二正辛基咪唑六氟磷酸盐([Dn OIM][PF6])中酶的活性与立体选择性明显高于其他离子液体和正己烷。因此,[Dn OIM][PF6]被选择作为反应介质。通过优化实验,得到最佳反应条件为:反应温度30℃,70 mg脂肪酶,3.0 m L离子液体,底物(±)-薄荷醇与丙酸酐物质的量比1∶1,反应时间20 h。此时,反应转化率与e.e.(p-)值分别可达48.1%与98.1%。酶在[Dn OIM][PF6]中的稳定性是正己烷的4.3倍,且重复使用7次后催化活性没有显著降低。荧光光谱和圆二色谱研究结果表明,酶在[Dn OIM][PF6]中有较大的酶蛋白质分子裸露程度和良好的二级结构稳定性。; 李明徐晓丰李在均朱婷彭杨; 关键词：离子液体脂肪酶薄荷醇

新型对称烷基咪唑醋酸盐离子液体的合成及其理化性质研究: 2015年; 设计合成了4种标题化合物,产物结构经IR、ESI-MS和1HNMR确认。测定了其密度、热稳定性、粘度、极性、表面张力等理化性质。结果表明,阳离子咪唑环1、3位氮上烷基碳链长短与同分异构之间的构型差异都会明显影响离子液体的性质。; 李明魏文杰李在均; 关键词：离子液体理化性质

对称烷基咪唑离子液体单滴微萃取–气质联用测定天然香料中酯类成分被引量：2: 2012年; 设计合成3种新型对称1,3-二正烷基咪唑六氟磷酸盐离子液体([DCn-IM][PF6],n=4,5,8).研究发现,离子液体热稳定性好,其憎水性和黏度随烷基碳原子数的增加而增加,但密度和极性却逐渐降低.以离子液体为顶空单滴萃取剂,分别考察了不同离子液体对5种酯类化合物的萃取性能.结果表明,离子液体的萃取率既受其黏度、憎水性和极性的影响,还与分析物本身的结构及性质密切相关.[DC4-IM][PF6]的萃取效率明显高于其他离子液体而被确定为萃取剂,并结合气质联用技术对萃取与分析条件进行优化.在0.36 g/mL NaCl溶液中,以1.0μL离子液体40℃萃取分析物35min后,250℃解吸1 min,得到富集倍数为260～1429,检出限为0.46～16.1μg/L.该方法应用于天然香料中5种酯类成分的同时测定,回收率为93.8%～108.9%,表明有高的灵敏度和准确性.; 李明李在均李观燕陈琳洁王丽娜姜翠翠李路路张壮太; 关键词：离子液体气相色谱-质谱联用酯类香料

诺氟沙星ELISA试剂盒研制与性能鉴定被引量：5: 2013年; 【目的】建立诺氟沙星(norfloxacin,Nor)免疫检测试剂盒。【方法】基于所制备的诺氟沙星单克隆抗体,通过矩阵法筛选最佳抗体工作浓度和二抗工作浓度,建立诺氟沙星间接竞争ELISA试剂盒(Nor-kit),并对其性能进行了鉴定和确证。【结果】Nor-kit的平均IC50为5.18μg.L-1,灵敏度为0.31μg.L-1,检测限为1.00μg.L-1。试剂盒除了和诺氟沙星反应外,还和同系物中的培氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、洛美沙星及恶喹酸有不同程度的交叉反应。奶样中回收率平均为103.23%,变异系数(CV)为9.33%。3个不同批次试剂盒的测定结果中,批内变异系数小于10%,且批间变异系数也小于10%;在4℃保存条件下,试剂盒可以保存6个月而质量不变。奶样添加回收试验,试剂盒与LC-MS/MS测定结果没有显著差异(P≥0.05);而且检测实际生产中鲜奶样时,试剂盒与LC-MS/MS测定结果也无显著差异(P≥0.05)。【结论】本研究成功研制出灵敏、特异、简便的诺氟沙星残留检测ELISA试剂盒。; 邢广旭王国栋胡骁飞王方雨邓瑞广张改平; 关键词：诺氟沙星单克隆抗体 ELISA 试剂盒

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国家科技支撑计划(2011BAK10B00)