国家自然科学基金(30772771)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 补体C3基因敲除小鼠的繁育及子代基因型鉴定
- 2011年
- 目的探讨繁殖和鉴定补体C3基因敲除小鼠的实验方法。方法将所引进的补体C3基因敲除杂合子小鼠(C3+/-)进行饲养并繁殖,其子代出现三种基因型的小鼠,即纯合子C3-/-、杂合子C3+/-、野生型C3+/+,采用ELISA与PCR相结合对子代小鼠基因型进行鉴定。结果繁育出135只子代小鼠,经鉴定,C3+/+、C3+/-、C3-/-各为38只、68只、29只,经χ2检验,子代小鼠分离比例符合孟德尔遗传规律。结论正确的饲养繁殖以及子代鉴定是从杂合子小鼠中获得补体C3基因敲除小鼠的有效途径。
- 郑静刘阳胡松李敏惠李丽梅阳泰杨淑霞邹强
- 关键词：补体C3基因敲除小鼠PCRELISA
- 补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR条件优化被引量：2
- 2010年
- 目的对补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR反应体系及扩增程序进行优化,检测PCR优化体系的适用性和灵敏性。方法通过改进引物设计、改变PCR反应过程中Mg2+浓度、引物浓度、退火温度、模板DNA浓度及反应循环次数,分析比较PCR扩增效果。结果优化后的补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR反应体系中,Mg2+浓度在2-4mmol/L,引物浓度在0.025-0.4μmol/L,循环次数在30-45次之间均能扩增得到清晰均一的特异性条带;同时,引物退火温度在55.5℃-69.6℃范围内均适用;优化后PCR体系能够检测的最低DNA浓度为1.41ng/μl,即模板DNA在反应体系中的总量为约2.82ng.结论已经建立的优化后的PCR基因扩增体系特异性高且稳定可靠。
- 郑静李丽梅阳泰刘阳刘进李敏惠杨淑霞邹强
- 关键词：基因敲除小鼠基因型鉴定
