公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

大鼠脑组织NT-3融合蛋白的表达、纯化及抗体制备: 2007年; 目的克隆大鼠脑组织神经营养素3(NT-3)基因,原核诱导表达并纯化,制备高效价抗体,为研究其对周围神经损伤修复的影响提供实验基础。方法用RT-PCR法扩增目的基因,依次克隆入pMD-18T载体及亚克隆入pRSET-A原核表达载体。导入大肠杆菌BL21经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定后用镍柱纯化。免疫家兔制备特异性抗体。结果RT-PCR得到777 bp的片断,酶切鉴定及测序证实与GeneBank中大鼠NT-3序列一致,成功构建了原核表达载体pRSET-A-NT-3。导入BL21诱导得到一条约34 ku的新蛋白带。免疫家兔获得1∶64000的高效价特异性抗大鼠NT-3血清。; 李志全胡蕴玉朱庆生朱锦宇刘方; 关键词：蛋白纯化

阿仑膦酸钠局部释放对假体周围骨溶解的抑制作用被引量：2: 2009年; 目的通过阿仑膦酸钠（ALN）复合羟基磷灰石（HA）涂层假体，检测局部释放的ALN对骨溶解的抑制作用。方法选择18只雌性新西兰大白兔，随机均分为实验组、阳性对照组和空白对照组，三组均于左侧胫骨平台处向胫骨髓腔竖直植入HA涂层假体。在植入前，实验组于HA涂层表面复合ALN5mg，且实验组和阳性对照组涂层表面均匀涂抹25μg超高相对分子质量聚乙烯颗粒，空白对照组不做处理。术后12周取左侧胫骨行骨组织形态学、生物力学以及影像学测量，检测ALN体外释放周期，并评估抗骨溶解效果。结果与对照组相比，实验组的骨皮质厚度（＋9．26％）、假体生物力学固定强度（极限抗剪强度：＋36．42％、表观抗剪刚度：＋37．79％、总能量吸收值：＋30．00％）、骨-假体接触率（＋44．40％）、假体周围骨体积分数（＋16．07％）、骨矿化水平（钙盐沉积岛平均面积：＋598．86％、钙盐沉积岛面积分数：＋650．11％）和假体周围骨密度（＋62．05％）均明显增高，差异有统计学意义（P〈0．05）；反映成骨细胞活性的各项参数（类骨质表面：＋33．53％、类骨质厚度：＋49．60％、骨形成速率：＋91．62％、松质骨骨矿沉积率：＋48．04％、皮质骨骨矿沉积率：＋60．42％）也有不同程度的增高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论非多孔HA涂层假体复合ALN的局部释放可以明显抑制超高相对分子质量聚乙烯颗粒诱导的假体周围骨溶解，ALN在预防磨屑诱导的假体周围骨溶解过程中能够增强成骨细胞活性。; 牛舜孔令擘杨重飞朱庆生; 关键词：二膦酸盐类羟基磷灰石类人工关节

脊髓内注射NT3重组腺病毒对前角神经元的保护作用被引量：2: 2006年; 目的观察脊髓内注射神经营养素3(Neurotrophin-3,NT3)重组腺病毒对坐骨神经损伤后脊髓前角运动神经元的保护作用。方法制作大鼠坐骨神经夹伤模型,12只大鼠随机分为治疗组与对照组,治疗组大鼠在立体定位仪上于脊髓腹角给予神经营养素3重组腺病毒(Adeno-NT3),对照组给予生理盐水。术后不同时间通过CTB逆标观察脊髓相应节段运动神经元再生的数目；通过尼氏染色计数并计算运动神经元的存活百分率。结果给予Adeno-NT3组与对照组相比,相应节段运动神经元再生数目和存活百分率明显增加,而且再生神经元增加的比例高于存活神经元。结论Adeno-NT3对坐骨神经损伤后的脊髓前角运动神经元具有保护作用。; 李志全胡蕴玉朱庆生朱锦宇刘方; 关键词：坐骨神经重组腺病毒神经营养素3

腺病毒介导NT-3基因在雪旺细胞的表达被引量：5: 2004年; 目的　观察腺病毒介导的NT 3基因在培养雪旺细胞 (Schwanncells,SCs)的表达。方法在2 93细胞中培养扩增NT 3重组腺病毒 (adenovirusvectorforNT 3,Ad NT 3) ,用组织培养半数感染量法测定其滴度。然后用Ad NT 3感染原代培养的SCs,逆转录酶多聚酶链反应 (RT PCR)技术检测NT 3基因的表达。结果　Ad NT 3扩增后获得了较高滴度的病毒。SCs经NT 3重组腺病毒感染 2 4h后有NT 3mRNA的转录。结论　腺病毒介导的NT; 朱锦宇朱庆生黄耀添; 关键词：雪旺细胞基因表达基因转录

人NT3、BDNF基因Tet-on可调控重组腺病毒载体的构建和鉴定被引量：6: 2004年; 目的 :分别构建含人神经营养素 3(NT3)基因和脑源性神经营养因子 (BDNF)基因的重组四环素可诱导的腺病毒载体 ,并进行PCR和酶切鉴定。方法 :将NT3和BDNF基因依次分别亚克隆到pIND载体和pTRE Shuttle2载体中 ,构建重组载体pTRE Shuttle2 NT3和pTRE Shuttle2 BDNF。用PI SceI和I CeuI双酶切后将所获NT3及BDNF基因片段再与线性化的腺病毒载体pAdeno X连接 ,构建成pAdeno NT3及pAdeno BDNF的重组腺病毒载体。以电穿孔转化E .coli后挑取克隆进行PCR及酶切鉴定。结果 :重组腺病毒载体的PCR鉴定表明 ,在 312bp处出现特定的条带 ;酶切鉴定证实 ,得到约 2 3kb的预期片段 ,说明人NT3、BDNF基因与腺病毒载体pAdeno X已正确连接。结论 :成功地构建了含人NT3和BDNF基因的四环素可诱导重组腺病毒载体。; 李志全朱庆生朱锦宇郝伟许彦鸣王成济杨安钢; 关键词：神经营养素3 重组腺病毒载体

Adeno-X Tet-On系统调控LacZ基因在雪旺细胞中表达的研究被引量：2: 2004年; 目的　应用Adeno XTet On系统感染雪旺细胞 ,通过四环素衍生物强力霉素 (doxcycline ,Dox)调控LacZ基因产物 (βgal)的表达。方法　①取生后 5～ 6dSD仔鼠坐骨神经进行雪旺细胞培养 ,并进行形态学及S 10 0蛋白相关抗原免疫组织化学染色鉴定。②将Adeno XTet OnVirusStock与Adeno XTRE βgalVirusStock分别感染HEK2 93细胞 ,收获病毒并作滴度测定。③将扩增后的病毒感染雪旺细胞并绘制Dox调控下βgal诱导表达曲线。结果　①由体外培养获得的雪旺细胞纯度可达 90 %以上并且状态良好 ,免疫组织化学染色阳性结果明显。②扩增后的病毒滴度较高 ,分别达 1.2 6× 10 9、1.99× 10 9pfu/ml。　结论　将病毒感染雪旺细胞后 ,经检测发现DOX对; 郝伟朱锦宇朱庆生李志全杨安钢; 关键词：LACZ基因雪旺细胞周围神经损伤重组腺病毒载体

腺病毒介导的LacZ基因在大鼠坐骨神经的表达被引量：4: 2003年; 目的 :观察腺病毒介导的LacZ基因在大鼠坐骨神经雪旺细胞 (Schwanncells ,SCs)的表达。方法 :大鼠坐骨神经内直接注射报告基因LacZ重组腺病毒 (Ad LacZ) ,X gal组织化学染色检测LacZ基因的表达 ,采用LEICAM 5 5 0型图像分析仪对坐骨神经切片X gal染色强弱进行定量评价。结果 :将滴度为 1× 10 8PFU /ml的Ad LacZ病毒液 10 μl注入坐骨神经 2d后即可检测到LacZ的表达 ,7～ 14d表达显著增加 (与 2d组比较P <0 .0 1) ,7d组与 14d组表达量无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,2 8d时SCs蓝染又减弱 (与 7d组和 14d组比较P <0 .0 1)。注射生理盐水的对照组X gal染色阴性。结论 :腺病毒介导的LacZ基因可转入活体动物坐骨神经内并高效表达 ,表明腺病毒介导神经营养因子等基因治疗有促进周围神经损伤再生的作用。; 朱锦宇朱庆生黄耀添吕荣王军; 关键词：腺病毒坐骨神经基因治疗基因转移

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(30271315)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(30271315)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈