工业生物技术教育部重点实验室基金(KLI-KF200505)
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
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- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 重组E.coli胆固醇氧化酶的分离纯化及其酶学性质研究被引量：2
- 2009年
- 对重组E.coli产生的胆固醇氧化酶采用70%硫酸铵盐析、CM Sepharose FF离子层析、Phenyl Sepharose 6 Fast疏水层析、Sephadex G-75凝胶过滤,得到的胆固醇氧化酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带,酶的纯化倍数为93,收率为21%。部分酶学性质表明:酶的最适反应温度为37℃,最适反应pH7.5,热稳定范围在40℃以下,酶的pH稳定范围为6～9,分子量分别为50 kD和52 kD。酶动力学参数Km值及Vmax分别为8.2×10-5mol/L和0.21 mmol/(L.min)。
- 钟学敏张玲孙艳杨海麟王武
- 关键词：胆固醇氧化酶分离纯化酶学性质
- 高密度培养重组大肠杆菌发酵生产胆固醇氧化酶的策略
- 2009年
- 以重组大肠杆菌发酵生产胆固醇氧化酶,依据溶解氧的变化控制底物的流加速率,实现了重组大肠杆菌的高密度培养,最高密度达85(OD600)。在此基础上确定了最佳的诱导时机为发酵中期,菌体产酶水平达.583(1.6U/L,产酶速率为971.77 U·L-1·h-1,生产强度为388.71U·L-1·h-1,实现了胆固醇氧化酶的高效生产。
- 王长城孙艳张玲王武杨海麟
- 关键词：胆固醇氧化酶分批补料
- 胆固醇氧化酶分离纯化及应用的研究进展被引量：6
- 2009年
- 综述了不同微生物所产胆固醇氧化酶的分离纯化方法及应用研究情况,重点介绍了破除乳化体系的方法,血清中胆固醇含量的检测,并针对分离纯化与应用中存在的问题提出了今后的研究方向。
- 钟学敏孙艳张玲杨海麟王武
- 关键词：胆固醇氧化酶分离纯化乳化体系
- 高密度培养重组E-coli产胆固醇氧化酶的乳糖诱导策略被引量：2
- 2011年
- 研究了乳糖诱导重组大肠杆菌表达胆固醇氧化酶。结果表明,乳糖不仅可以作为诱导剂诱导外源蛋白的合成,而且能作为碳源促进菌体的生长。通过对诱导条件的优化,实现了重组大肠杆菌的高密度培养,最高密度达68.9(OD600);在此基础上确定了最佳的诱导时机为发酵中期,菌体产酶水平达6005.66U/L,生产强度为200.19U/L.h,实现了胆固醇氧化酶的高效生产。
- 杨海麟王长城张玲辛瑜孙艳王武
- 关键词：胆固醇氧化酶乳糖
- 产胆固醇氧化酶重组大肠杆菌的发酵培养基和诱导条件的优化被引量：9
- 2009年
- 在摇瓶中对产胆固醇氧化酶重组大肠杆菌的发酵培养基和诱导条件进行了优化,优化培养基为甘油10 g/L,胰蛋白胨10 g/L,酵母粉5 g/L,KH2PO42 g/L,K2HPO44 g/L,Na2HPO4.12 H2O7 g/L,(NH4)2SO41.2 g/L,NH4Cl 0.2 g/L,MgSO4.7 H2O1 g/L;优化的诱导条件为:对数生长中期诱导,IPTG浓度为0.3 mmol/L。在优化的培养基和优化的诱导条件下,单位菌体产酶量达745.86 U/g,菌体产酶水平达1 625.97 U/L,为优化前的700 U/L的2.3倍。
- 杨海麟王长城张玲孙艳白洁王武杨建勋
- 关键词：胆固醇氧化酶培养基优化
